和厚朴酚对高糖诱导的足细胞氧化应激及凋亡的影响
发布时间:2021-01-11 01:13
目的探讨和厚朴酚对高糖诱导的足细胞氧化应激、凋亡的影响及其机制。方法实验分为对照组(常规培养)、高糖组(30 mmol·L-1 D-葡萄糖)、低剂量实验组(低剂量和厚朴酚)、中剂量实验组(中剂量和厚朴酚)、高剂量实验组(高剂量和厚朴酚)、第1转染组(30 mmol·L-1的D-葡萄糖+miR-182-5p阳性对照质粒)、第2转染组(30 mmol·L-1的D-葡萄糖+miR-182-5p过表达质粒)、第3转染组(30 mmol·L-1的D-葡萄糖+NOX4阴性对照质粒)、第4转染组(30 mmol·L-1的D-葡萄糖+NOX4抑制表达质粒)、第5转染组(10μmol·L-1和厚朴酚+30 mmol·L-1的D-葡萄糖+miR-182-5p阴性对照质粒)、第6转染组(10μmol·L-1和厚朴酚+30 mmol·L-1的D-葡萄糖+miR-182-5p抑制表达质粒)。用试剂盒检测丙二醛(mal...
【文章来源】:中国临床药理学杂志. 2020,36(13)北大核心
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
材料与方法
1 材料
2 实验方法
2.1 细胞转染前分组与处置
2.2 细胞转染和转染后分组[3]
3 检测指标
3.1 用流式细胞术检测细胞凋亡
3.2 用试剂盒检测MDA含量和SOD活性
3.3 用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测miR-182-5p和NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)mRNA的相对表达量
3.4 用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma / leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、NOX4蛋白相对表达量
3.5 荧光素酶报告基因检测实验检测miR-182-5p对NOX4的靶向调控
4 统计学处理
结 果
1 各组细胞凋亡率比较
2 各组细胞MDA含量和SOD活性比较
3 各组细胞中miR-182-5p和NOX4 mRNA的相对表达量比较
4 各组细胞中Bcl-2、Bax、NOX4蛋白相对表达量的比较
5 miR-182-5p靶向调控NOX4的表达
讨 论
本文编号:2969776
【文章来源】:中国临床药理学杂志. 2020,36(13)北大核心
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
材料与方法
1 材料
2 实验方法
2.1 细胞转染前分组与处置
2.2 细胞转染和转染后分组[3]
3 检测指标
3.1 用流式细胞术检测细胞凋亡
3.2 用试剂盒检测MDA含量和SOD活性
3.3 用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测miR-182-5p和NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)mRNA的相对表达量
3.4 用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma / leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、NOX4蛋白相对表达量
3.5 荧光素酶报告基因检测实验检测miR-182-5p对NOX4的靶向调控
4 统计学处理
结 果
1 各组细胞凋亡率比较
2 各组细胞MDA含量和SOD活性比较
3 各组细胞中miR-182-5p和NOX4 mRNA的相对表达量比较
4 各组细胞中Bcl-2、Bax、NOX4蛋白相对表达量的比较
5 miR-182-5p靶向调控NOX4的表达
讨 论
本文编号:2969776
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