积雪草苷对糖尿病心肌病大鼠Nrf2的表达及氧化应激的影响
发布时间：2021-01-17 22:02
目的探讨积雪草苷对大鼠糖尿病心肌病的保护作用。方法雄性SD大鼠32只,随机分为正常对照组、模型组、积雪草苷组、氯沙坦钾组,每组8只。予高脂饲料喂养后行链脲霉素腹腔注射制造糖尿病大鼠模型。积雪草苷组予积雪草苷6.48 mg·kg-1·d-1灌胃,氯沙坦钾组予氯沙坦钾4.5 mg·kg-1·d-1灌胃。正常对照组及模型组予等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃。实验第112天,行心脏超声检查后处死大鼠,HE染色观察心肌病理学变化;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应（q PCR）法检测心肌Nrf2 m RNA含量;Western blot观察心肌Nrf2、Caspase3蛋白含量;免疫组化法观察Nrf2蛋白在心肌组织中分布及表达;ELISA试剂盒检测心肌N末端脑钠肽前体（NT-pro BNP）、肌钙蛋白T（c Tn T）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平。结果与正常对照组相比,模型组大鼠HE染色心肌细胞排列紊乱、间隙增大。心脏超声左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短率（LVFS）下降,左心室校正质量及左心室舒张末期内径（LVEDd）升高,心肌NT-pro BNP和c Tn T水平升高（...
【文章来源】：心电与循环. 2020,39(04)
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
各组大鼠心肌组织Nrf2及Caspase3蛋白表达
各组大鼠心肌组织Nrf2蛋白免疫组化结果（A：积雪草苷组，B：氯沙坦钾组，C：模型组，D：正常对照组，×400;E：各组大鼠心肌组织Nrf2免疫组化AOD值）
目前针对DCM的治疗，主要集中在强化血糖控制。然而，这一策略并不能预防与高血糖相关的心脏并发症的发生[23]。在DCM动物模型中发现Nrf2的许多天然和合成激活物通过直接或间接机制表现出炎症、氧化应激、细胞死亡和纤维化功效，对DCM具有良好的治疗作用。积雪草及其提取物在既往研究中表现出色，具有强大的抗氧化及抗纤维化能力[7-8]，但对于治疗DCM的具体机制研究仍未明确。本研究选择中药积雪草苷作为治疗DCM的药物，与经典抗心力衰竭药物血管紧张素受体阻滞剂（angiotensin receptor blocker,ARB）氯沙坦钾作阳性对照，通过基因及蛋白检测Nrf2，观察积雪草苷是否通过该信号轴对DCM氧化应激产生影响。从本研究结果看，积雪草苷减轻心脏病理改变、改善心力衰竭生物学指标、保护心功能、延缓心脏重构，其可以上调心肌细胞中Nrf2的m RNA及蛋白表达，对Nrf2下游氧化应激系统亦产生相应调控，包括上调SOD活性，下调MDA的蛋白表达。此外积雪草苷还减少Caspase3蛋白表达。因此，我们推断积雪草苷对DCM的治疗作用可能是通过上调Nrf2表达，从而改善氧化应激。但是本研究发现，氯沙坦钾组无论在Nrf2基因及蛋白的表达上调还是在改善氧化应激相关指标上，均不亚于积雪草苷组。进一步分析发现，虽然积雪草苷在微观指标上与氯沙坦钾比较不占优势，但反应在最终的靶效应上，如改善临床心功能评估指标、心力衰竭生物学评估指标、延缓心脏大体结构改变及改善心脏病理纤维化方面效果较好。由此可见，中药往往多靶点、多环节起作用，积雪草苷可能除了改善氧化应激，尚在其他通路上发挥作用，从而最终保护心功能。图2 各组大鼠心肌组织Nrf2蛋白免疫组化结果（A：积雪草苷组，B：氯沙坦钾组，C：模型组，D：正常对照组，×400;E：各组大鼠心肌组织Nrf2免疫组化AOD值）
【参考文献】：
期刊论文
[1]红芪多糖对糖尿病心肌病db/db小鼠核因子2相关因子2信号通路的影响[J]. 何流,金智生,张花治,王栋,王东旭,和彩铃. 中国临床药理学杂志. 2018(15)
[2]积雪草苷对心肌梗死大鼠转化生长因子-β1、Ⅰ和Ⅲ型胶原表达的影响[J]. 王策. 中国老年学杂志. 2016(23)
[3]积雪草的研究进展[J]. 项佳媚,肖伟,许利嘉,肖培根. 中国现代中药. 2016(02)
本文编号：2983669
【文章来源】：心电与循环. 2020,39(04)
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
各组大鼠心肌组织Nrf2及Caspase3蛋白表达
各组大鼠心肌组织Nrf2蛋白免疫组化结果（A：积雪草苷组，B：氯沙坦钾组，C：模型组，D：正常对照组，×400;E：各组大鼠心肌组织Nrf2免疫组化AOD值）
目前针对DCM的治疗，主要集中在强化血糖控制。然而，这一策略并不能预防与高血糖相关的心脏并发症的发生[23]。在DCM动物模型中发现Nrf2的许多天然和合成激活物通过直接或间接机制表现出炎症、氧化应激、细胞死亡和纤维化功效，对DCM具有良好的治疗作用。积雪草及其提取物在既往研究中表现出色，具有强大的抗氧化及抗纤维化能力[7-8]，但对于治疗DCM的具体机制研究仍未明确。本研究选择中药积雪草苷作为治疗DCM的药物，与经典抗心力衰竭药物血管紧张素受体阻滞剂（angiotensin receptor blocker,ARB）氯沙坦钾作阳性对照，通过基因及蛋白检测Nrf2，观察积雪草苷是否通过该信号轴对DCM氧化应激产生影响。从本研究结果看，积雪草苷减轻心脏病理改变、改善心力衰竭生物学指标、保护心功能、延缓心脏重构，其可以上调心肌细胞中Nrf2的m RNA及蛋白表达，对Nrf2下游氧化应激系统亦产生相应调控，包括上调SOD活性，下调MDA的蛋白表达。此外积雪草苷还减少Caspase3蛋白表达。因此，我们推断积雪草苷对DCM的治疗作用可能是通过上调Nrf2表达，从而改善氧化应激。但是本研究发现，氯沙坦钾组无论在Nrf2基因及蛋白的表达上调还是在改善氧化应激相关指标上，均不亚于积雪草苷组。进一步分析发现，虽然积雪草苷在微观指标上与氯沙坦钾比较不占优势，但反应在最终的靶效应上，如改善临床心功能评估指标、心力衰竭生物学评估指标、延缓心脏大体结构改变及改善心脏病理纤维化方面效果较好。由此可见，中药往往多靶点、多环节起作用，积雪草苷可能除了改善氧化应激，尚在其他通路上发挥作用，从而最终保护心功能。图2 各组大鼠心肌组织Nrf2蛋白免疫组化结果（A：积雪草苷组，B：氯沙坦钾组，C：模型组，D：正常对照组，×400;E：各组大鼠心肌组织Nrf2免疫组化AOD值）
【参考文献】：
期刊论文
[1]红芪多糖对糖尿病心肌病db/db小鼠核因子2相关因子2信号通路的影响[J]. 何流,金智生,张花治,王栋,王东旭,和彩铃. 中国临床药理学杂志. 2018(15)
[2]积雪草苷对心肌梗死大鼠转化生长因子-β1、Ⅰ和Ⅲ型胶原表达的影响[J]. 王策. 中国老年学杂志. 2016(23)
[3]积雪草的研究进展[J]. 项佳媚,肖伟,许利嘉,肖培根. 中国现代中药. 2016(02)
本文编号：2983669
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