基于诱导调节性T细胞分化的黄芪、甘草多糖对HCT-116的作用机制
发布时间：2021-01-20 03:55
目的:以黄芪多糖、甘草多糖及其复合多糖为研究对象,利用细胞和分子生物学技术,选用小鼠调节性T细胞和人结肠癌HCT-116细胞作为目标细胞,从细胞水平、基因水平和蛋白水平,研究人结肠癌HCT-116细胞对小鼠调节性T细胞分化和相关细胞因子分泌的影响;研究黄芪多糖和甘草多糖分别对与人结肠癌HCT-116细胞共培养前后小鼠调节性T细胞分化和相关细胞因子分泌的影响;研究黄芪甘草复合多糖对共培养后小鼠调节性T细胞分化和相关细胞因子分泌的影响,并对黄芪多糖、甘草多糖和黄芪甘草复合多糖三者对调节性T细胞影响程度进行比较。深入探讨其诱导调节性T细胞分化和抗肿瘤活性的作用机制。方法:1.流式细胞仪检测小鼠调节性T细胞,确定细胞表型。2.CCK-8法检测黄芪多糖、甘草多糖培养24h后小鼠调节性T细胞的存活率,确定药物的无细胞毒浓度范围;在无细胞毒浓度范围内,检测给药72h后小鼠调节性T细胞的存活率,排除给药时间对调节性T细胞存活率的影响;检测给药72h后HCT-116细胞的存活率,排除共培养模型中药物对HCT-116细胞存活率的影响。3.在无细胞毒浓度范围内,Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡...
【文章来源】：山西省中医药研究院山西省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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图 1-4 细胞表型流式图3.3APS、GP 对 Tregs 细胞、HCT-116 细胞存活率的影响CCK8 法检测经 APS、GP 处理 24h 后 Tregs 细胞的存活率，获得细胞无毒性的安全剂量范围。实验结果表明：APS、GP 均在终浓度为 0.5-250μg/mL 的浓度范围内对 Tregs 细胞没有任何细胞毒性，见图 1-5。选用 APS、GP 药物终浓度为 0.5-50μg/mL 处理 Tregs 细胞和 HCT-116 细胞72h，验证在此浓度范围内，APS 和 GP 不影响细胞的存活率。实验结果表明：经 72h APS、GP 药物终浓度为 0.5-50μg/mL 处理后的 Tregs 细胞和 HCT-116 细胞的存活率与对照组比较没有差异。见图 1-6、1-7。
图 1-5 APS、GP 处理 24h 对 Tregs 细胞的影响（APS 与空白组比较 * ：P<0.01；**：P<0.05；GP 与空白组比较 ：P<0.01； ：P<0.05）
本文编号：2988318
【文章来源】：山西省中医药研究院山西省
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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图 1-4 细胞表型流式图3.3APS、GP 对 Tregs 细胞、HCT-116 细胞存活率的影响CCK8 法检测经 APS、GP 处理 24h 后 Tregs 细胞的存活率，获得细胞无毒性的安全剂量范围。实验结果表明：APS、GP 均在终浓度为 0.5-250μg/mL 的浓度范围内对 Tregs 细胞没有任何细胞毒性，见图 1-5。选用 APS、GP 药物终浓度为 0.5-50μg/mL 处理 Tregs 细胞和 HCT-116 细胞72h，验证在此浓度范围内，APS 和 GP 不影响细胞的存活率。实验结果表明：经 72h APS、GP 药物终浓度为 0.5-50μg/mL 处理后的 Tregs 细胞和 HCT-116 细胞的存活率与对照组比较没有差异。见图 1-6、1-7。
图 1-5 APS、GP 处理 24h 对 Tregs 细胞的影响（APS 与空白组比较 * ：P<0.01；**：P<0.05；GP 与空白组比较 ：P<0.01； ：P<0.05）
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