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羟基积雪草苷抗骨关节炎作用的实验研究

发布时间:2021-01-22 02:27
  背景及实验目的骨性关节炎(Osteoarthritis,OA),是一种由软骨下骨破坏和软骨退变引起的关节疾病,其中软骨退变是OA的根本病变。促炎因子如白细胞介素-1β(IL-1β)在OA发展中起着重要的作用。羟基积雪草苷(Madecassoside,MA)是一种源于积雪草(Centella asiatica)的三萜类成分,具有抗氧化和抗炎等多种药理活性作用。本研究中,我们通过在体外和体内的实验探讨了羟基积雪草苷(MA)对软骨细胞的保护和抗骨性关节炎(OA)的作用,以及相关的作用机制。实验方法在体外实验中,我们提取了大鼠膝关节软骨细胞进行培养。首先CCK-8被用来测定羟基积雪草苷对大鼠软骨细胞的毒性作用。其次,我们利用IL-1β建立了大鼠软骨细胞骨性关节炎模型,经过不同浓度的羟基积雪草苷干预,通过聚合酶链反应(qRT-PCR)检测实验组与对照组中的COX-2,iNOS,MMP-3及MMP-13的mRNA表达情况;蛋白印迹技术(Western Blotting)被用来检测COX-2,iNOS,MMP-3,MMP-13,Ⅱ型胶原(Co12),sox-9 及 NF-KB pp65/p65的蛋白... 

【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:58 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

羟基积雪草苷抗骨关节炎作用的实验研究


图1?CCK-8结果图,MA对软骨细胞活性的影响

蛋白表达,软骨细胞


及MMP-13蛋白表达明显增加(;??<0.05),且随着羟基积雪草苷浓度的增高??COX-2,?iNOS,?MMP-3和MMP-13蛋白表达降低。此部分结果与PCR结果??一致,并有明显的差异(图3)。??17??

软骨细胞,实验结果


Western?blot实验结果显示,IL-1(3?(10ng/ml)刺激后,Col2和Sox9的蛋??白表达显著降低(p<〇.〇5),而5(^M浓度的MA恢复了?Col2和Sox9的蛋白水平??(图4)。此外,MA恢复了由IL-1J3诱导的软骨细胞中SafraninO染色的下降(图??5)?〇??18??


本文编号:2992368

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