麦门冬汤通过SDF-1/CXCR4轴对肺纤维化大鼠BMSCs定向归巢的影响

发布时间：2021-01-23 03:30

　　目的:骨髓间充质干细胞（BMSCs）是肺纤维化（PF）后修复组织损伤部分的一种有效的干细胞来源,但疗效有限,原因之一是归巢并存活于肺纤维的BMSCs数量较少。基质细胞衍生因子-1（SDF-1）与其特异性受体趋化因子受体4（CXCR4）构成的SDF-1/CXCR4轴在BMSCs归巢、定值到损伤部位参与修复的过程中发挥重要作用。前期研究表明,麦门冬汤可以有效改善大鼠肺纤维化,且该作用可通过促进BMSCs动员、归巢以及向肺泡上皮细胞定向分化而实现。本研究旨在进一步探讨麦门冬汤预处理的BMSCs是否通过SDF-1/CXCR4轴改善肺纤维化组织的修复。方法:第一部分将150只6-8周SD雌性大鼠随机分为3组:空白组（n=50）,肺纤维化对照组（PF组）（n=50）,口服汤剂麦门冬汤组（MMD组）（n=50）,各组分别在1天、7天、14天、21天、28天处死取材,通过HE、MASSON染色、ELISA、RT-qPCR检测纤维损伤肺组织SDF-1的动态变化,选择SDF-1表达高峰作为第二部分移植BMSCs或MMD-BMSCs的时间点。第二部分将大鼠随机分为假手术组:气管注入同等剂量生理盐水5mg/k... 

【文章来源】：广西中医药大学广西壮族自治区

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

SD大鼠BMSCs不同传代生长情况（荧光显微镜100）

2 绿色荧光蛋白转染的 BMSCs（荧光显微镜 100）3 麦门冬汤预处理 BMSCs 细胞存活率最佳剂量的选择MTT 检测不同浓度麦门冬汤提纯物作用于 BMSCs 后在不同时间结果见表 4。从表中可以看出，与空白组比较，模型组细胞存活所降低，但无明显差异。在 3.125～50mg/L 各浓度麦门冬汤孵育着浓度的增加，细胞存活率显著提高（P<0.01）,表现出麦门冬处理 BMSCs 呈现剂量依赖效应，通过结果筛选在于 BMSCs 后在h 时间段浓度 3.125mg/L 为最佳剂量的选择。见表 4。 4 麦门冬汤预处理 BMSCs 细胞存活率的最佳剂量及时间的筛选结果（x s，n=1Table1 4 The effect of MMD on viability of BMSCs （x s，n=6）

5.5 静脉移植 BMSCs 的归巢和存活情况如图所示，在 DAY1、DAY7、DAY14、DAY28 四个时间点中，在第1 天中，BMSCs 组与 MMD-BMSCs 组中 GFP-BMSCs 显著归巢至肺组织（24.64 2.47vs.25.62 1.82，P>0.05）。并且我们发现在第 28 天中给予 MMD 预处理 BMSCs（MMD-BMSCs）组归巢到纤维肺组织的 BMSCs显著多于仅移植 BMSCs 组（16.39 3.79 vs.12.06 2.95，P<0.05）,进一步提高了 BMSCs 的归巢和存活；但给予 SDF-1/CXCR4 阻断剂AMD3100 后，归巢并存活于纤维肺组织的 BMSCs 明显减少（P<0.05），在纤维区域我们没有发现 GFP 阳性的细胞。上述结果提示，MMD 预处理 BMSCs 可以通过 SDF-1/CXCR4 轴显著提高 BMSCs 的归巢和存活。


本文编号：2994461