一株海洋来源真菌的次生代谢产物及其抗水产类致病菌研究
发布时间:2021-01-28 00:25
生态环境对真菌的次生代谢产物有很大的影响,海洋真菌在寡营养、弱碱性的含盐海洋环境中,产生了有别于陆生和淡水真菌的多种次生代谢产物,其中一些肽类化合物对鳗弧菌具有较好的抑制作用。本论文一共分成四个部分,第一章为绪论,综述了海洋真菌次生代谢产物的结构以及对水产类致病菌的研究进展。第二章为实验部分,采用了 OSMAC策略,通过改变培养基条件,对采集自近海红树林土壤的曲霉进行培养条件的筛选,通过HPLC,TLC等检测方法确定条件进行放大实验,共从浸膏中分离得到10个化合物。第三章为化合物1-10的结构鉴定,通过NMR、UV等波谱手段确定化合物为(-)-Cyclopenol、(-)-Cyclopenin、3-ethylidene-6-isopropyl-piperazine-2,5-dione、Cyclo(L-Pro-L-Leu)、xylariolide D、roquefortine C、Cyclo(D-Pro-L-Tyr)、Cyclo(Phe-Ala)、Cyclo(Val-Ala)、Cyclo(4-hydroxy-proline-isoleucine)。第四章以恩诺沙星作为阳性对照药,评价化合...
【文章来源】:浙江工业大学浙江省
【文章页数】:56 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
aspergillus-1.1号培养基(人工海水组)254tuv下的HPLC谱图
培养基的处理:在28°C条件下发酵两个星期,滤去菌丝体,滤液用乙酸乙酯萃??取三遍,比例为滤液:乙酸乙酯=1:2,取乙酸乙酯相减压浓缩。菌丝体置于丙酮??中浸泡超声8h,滤去菌丝体,将丙酮减压浓缩除去,余下的水相用乙酸乙酯萃??取三遍,比例为滤液:乙酸乙酯=1:2,取乙酸乙酯相减压浓缩浓缩,得到的部分??并入之前的浸膏,用TLC、HPLC-DAD分析方法对得到的40组浸膏进行分析。??实验结果分析:菌种在液体培养基中4-5天能够长满,形成墨绿色圆形菌饼漂浮??在培养基表面,液体浑浊。在小麦麸培养基和玉米柏培养基中生长良好,4-5天??能够长满固体培养基表面,菌体呈墨绿色。HPLC-DAD对萃取物进行分析,得??到各条件下的代谢物液相指纹图谱,取每株菌种次生代谢产物最丰富的一组进行??展示,其余见附录。液相的条件是流动相甲醇:水=15:?85至100:?0,温度为??28°C,流速lmL/min,?—共运行50分钟。???Absorbance?62>4077?mAU?Tnw:?00:21^2??
浙;t工夂大孝硕士嗲忮洽夂??图2-3?aspergillus-3A、3号培养基(蒸馏水组)254腦下的HPLC谱图??Figure?2-3?aspergillus-3A>?medium?No.3?(distilled?water)?HPLC?chromatogram?(254nm)??Absorbaace:?133.7681?mAU?f?ne:?00:00?0??166?i????????r:6?〇以;舶^——^—???14〇?7?U?21?2t?35?42?49?????P?6nitte?l?????.????图2-4?aspergillus-3B、2号培养基(蒸馆水组)254nm下的HPLC谱图??Figure?2-4?aspergillus-3B、medium?No.2?(distilled?water)?HPLC?chromatogram?(254nm)??结果分析:在本小节中,一共有4株菌株,使用了?5种培养基,每种培养基设置??了人工海水组和蒸馆水组,根据HPLC-DAD数据显示,aspergillus-]、1号培养??基(人工海水组),aspergillus-2、4号培养基(蒸馆水组),aspergillus-3A、3号??培养基(蒸馏水组)和aspergillus-3B、2号培养基(蒸馏水组)这四组是每株菌??株中产物较为丰富的组别。从图1可以看出aspergillus-1在人工海水组的1号培??养基中代谢产物较少,且峰型对称度不高,出峰时间集中在7-14分钟和28-40??分钟之间
本文编号:3004011
【文章来源】:浙江工业大学浙江省
【文章页数】:56 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
aspergillus-1.1号培养基(人工海水组)254tuv下的HPLC谱图
培养基的处理:在28°C条件下发酵两个星期,滤去菌丝体,滤液用乙酸乙酯萃??取三遍,比例为滤液:乙酸乙酯=1:2,取乙酸乙酯相减压浓缩。菌丝体置于丙酮??中浸泡超声8h,滤去菌丝体,将丙酮减压浓缩除去,余下的水相用乙酸乙酯萃??取三遍,比例为滤液:乙酸乙酯=1:2,取乙酸乙酯相减压浓缩浓缩,得到的部分??并入之前的浸膏,用TLC、HPLC-DAD分析方法对得到的40组浸膏进行分析。??实验结果分析:菌种在液体培养基中4-5天能够长满,形成墨绿色圆形菌饼漂浮??在培养基表面,液体浑浊。在小麦麸培养基和玉米柏培养基中生长良好,4-5天??能够长满固体培养基表面,菌体呈墨绿色。HPLC-DAD对萃取物进行分析,得??到各条件下的代谢物液相指纹图谱,取每株菌种次生代谢产物最丰富的一组进行??展示,其余见附录。液相的条件是流动相甲醇:水=15:?85至100:?0,温度为??28°C,流速lmL/min,?—共运行50分钟。???Absorbance?62>4077?mAU?Tnw:?00:21^2??
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本文编号:3004011
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