内质网应激对白藜芦醇Ⅱ相代谢的影响研究

发布时间：2021-01-28 18:14

　　目的:本研究选择正常及肝纤维化引发的内质网应激模型大鼠为研究对象,以白藜芦醇为工具药物,考察肝纤维化疾病模型下内质网应激对UGTs代谢酶表达及活性的影响;通过在体外孵育实验中分别加入UGT1A1特异性抑制剂胆红素、UGT1A7和UGT1A9的选择性抑制剂厚朴酚,和UGT1A9特异性抑制剂尼氟酸,考察通过大鼠肝微粒体和细胞裂解酶介导的白藜芦醇体外孵育实验中,起主要作用的UGTs亚型;通过构建内质网应激模型细胞及阻断内质网应激通路模型细胞,研究内质网应激对白藜芦醇II相代谢影响的分子机制。本研究的结果将为内质网应激影响药物代谢的相关研究提供理论依据和实验基础,也为白藜芦醇在临床上安全、合理、有效应用提供科学指导。方法:本实验首先建立大鼠肝纤维化所引发的内质网应激动物模型,内质网应激HepG2细胞模型及阻断内质网应激通路的HepG2细胞模型;采用UPLC-PDA法对白藜芦醇及其代谢产物进行定量分析;建立葡萄糖醛酸化代谢反应体外孵育模型,通过水解法求出白藜芦醇的代谢产物与母药之间的转换因子;用Western blot法测定并比较正常组及模型组大鼠,正常及内质网应激细胞模型,阻断内质网应激通路细... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

白藜芦醇及其UGTs代谢物的UPLC-PDA色谱图

图 2-1 内质网应激相应通路在正常及模型组大鼠肝中蛋白的相对表达。数据均来自 3 次行实验，组间差异用 Student’s t 检验分析，*p<0.05，***p<0.001。5.2 肝纤维化引发的内质网应激对大鼠 UGTs 蛋白表达的影响这部分数据考察肝纤维化引发的内质网应激模型是否改变 UGTs 蛋白表平。实验数据显示，如图 2-2 所示，与正常组相比，模型组大鼠肝脏中 UGT1A1UGT1A7 表达分别增高 2.21，1.90 倍，差异非常显著（p<0.01）。

图 2-1 内质网应激相应通路在正常及模型组大鼠肝中蛋白的相对表达。数据均来自 3 次平行实验，组间差异用 Student’s t 检验分析，*p<0.05，***p<0.001。5.2 肝纤维化引发的内质网应激对大鼠 UGTs 蛋白表达的影响这部分数据考察肝纤维化引发的内质网应激模型是否改变 UGTs 蛋白表水平。实验数据显示，如图 2-2 所示，与正常组相比，模型组大鼠肝脏中 UGT1A1，UGT1A7 表达分别增高 2.21，1.90 倍，差异非常显著（p<0.01）。


本文编号：3005451