槲寄生素对人骨肉瘤U20S细胞的抑制及对PI3K/Akt/mTOR通路的调控作用

发布时间：2021-01-29 10:03

　　目的:探讨槲寄生素对人骨肉瘤U20S细胞的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/Akt/m TOR通路的调控作用。方法:对数期生长U20S细胞分为5组:空白组,阳性组,槲寄生素低剂量组、中剂量组、高剂量组,空白组、槲寄生素各剂量组分别用0、5、10、20 mg·L^-1槲寄生素溶液处理,阳性组用245 mg·L^-15-FU处理,干预24 h后比较各组细胞形态学变化;采用MTT法检测并对比干预24、48、72 h后细胞增殖情况;分别采用Transwell法、流式细胞术检测并对比干预48 h时穿膜细胞数、凋亡率;分别采用RT-qPCR、Western blot法检测并对比干预48 h时细胞中PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白及磷酸化Akt（pAkt）蛋白表达情况。结果:空白组细胞生长状态良好,不同干预组细胞数量减少、轮廓及遮光性变差,部分细胞变圆,呈漂浮状态,其中槲寄生素高剂量干预组生长状态最差。不同时刻各干预组MTT实验OD值从大至小、穿膜细胞数从多至少依次为:空白... 

【文章来源】：中医学报. 2020,35(02)

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞株
        1.1.2 药物、主要试剂和仪器
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 MTT法检测各组细胞增殖能力
        1.2.3 Transwell法检测穿膜细胞数
        1.2.4 流式细胞术检测细胞凋亡情况
        1.2.5 RT-qPCR检测PI3K、Akt、m TOR m RNA表达
        1.2.6 Western blot法检测b FGF、MMP-9、TIMP-1蛋白表达
    1.3 观察指标
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 各组U20S细胞形态学比较
    2.2 各组MTT实验OD值比较
    2.3 各组穿膜细胞数比较
    2.4 各组U20S细胞凋亡率比较
    2.5 各组U20S细胞PI3K、Akt、m TOR m RNA表达水平比较
    2.6 各组U20S细胞PI3K、m TOR蛋白表达及p Akt/Akt比较
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[2]UPLC-MS/MS法测定槲寄生抗肿瘤成分1,7-bis（4-hydroxyphenyl）-1,4-heptadien-3-one的含量[J]. 张照燕,龙猜,田秀敏,于治国,党晓伟,赵云丽.  沈阳药科大学学报. 2018(01)
[3]局部复发性骨肉瘤临床治疗疗效的系统文献分析[J]. 王文剑,于秀淳.  中国骨与关节杂志. 2017(06)
[4]虎杖苷通过PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导人宫颈癌细胞凋亡的初步研究[J]. 潘纪红,王海滨,杜晓飞,刘江月,张代娟.  中国中药杂志. 2017(12)
[5]槲寄生碱影响Ras蛋白表达抑制肺癌H358细胞增殖[J]. 田忠林,李季泓,张凤芹,赵克明.  沈阳药科大学学报. 2017(05)
[6]槲寄生凝集素抗胆管癌的作用及机制研究[J]. 高旭亮,王佐权,胡江波,詹俊宏.  陕西医学杂志. 2016(02)



本文编号：3006700