肝脏特异敲除SphK2调控NAFLD的分子机制及虎杖苷的干预研究
发布时间：2021-01-29 12:07
第一部分目的:鞘氨醇激酶（sphingosine kinases,SphKs）是生物体内催化鞘氨醇（sphingosine,Sp）并将其转化为生物活性物质1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate,S1P）的关键酶。SphKs包含SphK1和SphK2两个亚型,调控S1P/神经酰胺（ceramide,Cer）的动态平衡,其在生物体内表达及活性的变化与多种疾病密切相关。目前SphK2在非酒精性脂肪肝（Non Alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD）疾病中的具体作用及相关分子机制尚不明确。本课题旨在探究SphK2在高脂饮食（high-fat diet,HFD）诱导小鼠肝脏脂质代谢紊乱及NAFLD疾病进程中的具体作用及分子机制,为NAFLD的防治及新型药物靶点的筛选提供前期实验依据。方法:1、本研究采用野生型WT小鼠与肝细胞特异敲除SphK2基因(SphK2Hep-/-)小鼠HFD诱导20周。动物水平上探索SphK2与NAFLD的相关性及其在NAFLD进程中的作用;2、体外细胞水平,提取WT小鼠、SphK2H...
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肝脏特异性敲除SphK2小鼠DNA鉴定
图 2-1：肝脏特异性敲除 SphK2 小鼠 DNA 鉴定。尾鉴定小鼠基因型，分别鉴定 SphK2 Flox/Flox 基因和 Alb-cre 基因，明确小鼠稳定构Fig.2.1. DNA identification of SphK2Hep-/-mice. Mice tail was used to identify the mousgenotype, and stable silencing of SphK2 gene was determined.
图 2-3：肝脏特异性敲除 SphK2 加重 HFD 诱导小鼠肝脏脂质沉积和肝脏损伤（A）小鼠 HFD 诱导 20 周后肝脏切片 HE、油红 O 病理染色图（B）小鼠血清 ALT、FFA表达水平及肝脏 FFA、TG 水平。WT ND 组（n=5）、WT HFD 组（n=6）、SphK2Hep-/-ND组（n=5）、SphK2Hep-/-HFD 组（n=5）。*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001。Fig.2.3. SphK2Hep-/-HFD mice aggravated liver lipid deposition and liver injury induced by HFDin mice.(A) Liver tissue section stained by HE and Oil red O. (B) Serum ALT and FFA level and liverFFA,TG level in mice. WT ND group (n=5), WT HFD group (n=6), SphK2Hep-/-ND group(n=5),SphK2Hep-/-HFD group (n=5).*p < 0.05,**p < 0.01,***p < 0.001.
本文编号：3006858
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【部分图文】：
肝脏特异性敲除SphK2小鼠DNA鉴定
图 2-1：肝脏特异性敲除 SphK2 小鼠 DNA 鉴定。尾鉴定小鼠基因型，分别鉴定 SphK2 Flox/Flox 基因和 Alb-cre 基因，明确小鼠稳定构Fig.2.1. DNA identification of SphK2Hep-/-mice. Mice tail was used to identify the mousgenotype, and stable silencing of SphK2 gene was determined.
图 2-3：肝脏特异性敲除 SphK2 加重 HFD 诱导小鼠肝脏脂质沉积和肝脏损伤（A）小鼠 HFD 诱导 20 周后肝脏切片 HE、油红 O 病理染色图（B）小鼠血清 ALT、FFA表达水平及肝脏 FFA、TG 水平。WT ND 组（n=5）、WT HFD 组（n=6）、SphK2Hep-/-ND组（n=5）、SphK2Hep-/-HFD 组（n=5）。*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001。Fig.2.3. SphK2Hep-/-HFD mice aggravated liver lipid deposition and liver injury induced by HFDin mice.(A) Liver tissue section stained by HE and Oil red O. (B) Serum ALT and FFA level and liverFFA,TG level in mice. WT ND group (n=5), WT HFD group (n=6), SphK2Hep-/-ND group(n=5),SphK2Hep-/-HFD group (n=5).*p < 0.05,**p < 0.01,***p < 0.001.
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