从Wnt/β-catenin通路探讨益气养血方干预膝骨关节炎大鼠软骨退变的机制研究
发布时间：2021-02-21 12:52
目的从Wnt/β-catenin信号通路调控作用角度探讨益气养血方对大鼠膝骨关节炎（KOA）膝关节软骨退变的影响,揭示其治疗骨关节炎的部分分子机制,为客观评价益气养血方治疗OA提供理论依据。方法1.采用碘乙酸钠、木瓜蛋白酶、Ⅱ型胶原蛋白酶、手术Hulth法等方法建立KOA模型,HE染色,形态学观察,以筛选动物模型。2.110只大鼠随机分为益气养血方低、中、高剂量组、阳性对照组、模型组、正常组及假手术组,每组15只,除正常组和假手术组,其余大鼠采用改良Hulth法构建KOA模型,假手术组仅切开关节囊,不切断韧带和半月板。造模成功后除正常组外分别予益气养血方低剂量（1.89g/kg.d）、中剂量（3.78g/kg.d）、高剂量（7.56g/kg.d）、双氯芬酸钠肠溶片混悬液（4mg/kg.d）、生理盐水（2.5ml.d）灌胃,另假手术组予生理盐水（2.5ml.d）,正常组不予任何药物。连续给药8周,取右膝关节,进行形态学观察,HE染色,并进行病理评分;应用实时荧光定量PCR检测软骨组织中β-catenin、MMP-13、BMP-4、BMP-2m RNA的表达;腹主动脉取血,ELISA法检测...
【文章来源】：云南中医药大学云南省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文缩略词表
前言
第一部分 KOA模型建立与评价
1 实验材料
2 实验方法
3 结果
4 小结
第二部分 益气养血方通过Wnt/β-catenin信号通路对大鼠KOA软骨退变的作用及机制研究
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 实验药物
1.3 主要试剂
1.4 主要仪器
2 实验方法
2.1 动物造模
2.2 模型评价
2.3 动物给药
2.4 标本制备
2.5 检测指标及方法
2.5.1 形态学观察
2.5.2 RT-PCR检测软骨组织中β-catenin、MMP-13、BMP-4、BMP-2mRNA的表达
2.5.3 ELISA法检测血清Wnt4、Wnt5、SFRP3、DKK-1、WIF-1、Wnt3水平
2.6 统计方法
3 结果
3.1 形态学观察
3.2 益气养血方对KOA大鼠模型膝关节软骨组织β-catenin、MMP-13、BMP-4、BMP-2mRNA表达的影响
3.3 益气养血方对KOA大鼠模型血清Wnt3、Wnt4、Wnt5、WIF-1、DKK-1、SFRP3的影响
4 小结
分析与讨论
结论
参考文献
文献综述
参考文献
附录
研究生期间发表论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]独活寄生汤对膝骨性关节炎患者关节液炎症因子、疗效及膝关节功能状况的影响分析[J]. 芦丹,汪亚群,孙迪. 中华中医药学刊. 2017(04)
[2]基于分子对接的独活寄生汤治痿和治痹药效物质基础研究[J]. 郑春松,严培晶,付长龙,叶蕻芝,吴广文,李西海,刘献祥. 风湿病与关节炎. 2017(03)
[3]独活寄生汤对膝关节骨性关节炎患者关节功能及血清炎性因子的影响[J]. 陈卓. 中国中医药科技. 2017(02)
[4]淫羊藿苷对成骨细胞成骨分化的影响及Wnt/-catenin信号系统的关系研究[J]. 涂艳,熊莉娜,柳湘洁,雷超,李凝旭,张瑞芸. 中国中医急症. 2017(03)
[5]黄芪甲苷对Wnt/β-catenin信号通路活化的人滑膜及软骨细胞共培养体系相关因子的调控作用[J]. 王德刚,许传勇,姜玉祥,阚卫兵,肖志锋,姚丽,刘婉,谢殿洪,汤豪,张玉婷. 广东医学. 2017(03)
[6]骨碎补总黄酮对骨质疏松症大鼠BMP-2蛋白表达及血清骨钙素水平的影响[J]. 黄松,陈敬有,高皓. 中国当代医药. 2017(04)
[7]针灸联合独活寄生汤治疗膝关节骨性关节炎疗效观察及对微炎性反应指标的影响[J]. 任景,李涛,于苗,智勇. 世界中医药. 2016(10)
[8]独活寄生汤对胶原性关节炎大鼠膝关节软骨细胞退变的干预作用[J]. 陈朝蔚,郑洁,杨沛林,周树云,杨梅,戴琪萍. 上海中医药大学学报. 2016(06)
[9]独活寄生汤治疗膝关节骨性关节炎临床疗效及对膝关节液炎症因子的影响[J]. 杨剑标. 河北中医. 2016(08)
[10]WNT信号通路抑制因子-1和β连环蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义[J]. 李波,宋永胜,张超,司青乐. 疑难病杂志. 2016(07)
博士论文
[1]鹿茸归经靶向调控骨关节炎TGF-β/Smads信号通路机制研究[D]. 孙志涛.广州中医药大学 2013
硕士论文
[1]骨性关节炎患者膝关节等速测试与Q角测量研究[D]. 程亚博.成都体育学院 2012
本文编号：3044372
【文章来源】：云南中医药大学云南省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文缩略词表
前言
第一部分 KOA模型建立与评价
1 实验材料
2 实验方法
3 结果
4 小结
第二部分 益气养血方通过Wnt/β-catenin信号通路对大鼠KOA软骨退变的作用及机制研究
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 实验药物
1.3 主要试剂
1.4 主要仪器
2 实验方法
2.1 动物造模
2.2 模型评价
2.3 动物给药
2.4 标本制备
2.5 检测指标及方法
2.5.1 形态学观察
2.5.2 RT-PCR检测软骨组织中β-catenin、MMP-13、BMP-4、BMP-2mRNA的表达
2.5.3 ELISA法检测血清Wnt4、Wnt5、SFRP3、DKK-1、WIF-1、Wnt3水平
2.6 统计方法
3 结果
3.1 形态学观察
3.2 益气养血方对KOA大鼠模型膝关节软骨组织β-catenin、MMP-13、BMP-4、BMP-2mRNA表达的影响
3.3 益气养血方对KOA大鼠模型血清Wnt3、Wnt4、Wnt5、WIF-1、DKK-1、SFRP3的影响
4 小结
分析与讨论
结论
参考文献
文献综述
参考文献
附录
研究生期间发表论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]独活寄生汤对膝骨性关节炎患者关节液炎症因子、疗效及膝关节功能状况的影响分析[J]. 芦丹,汪亚群,孙迪. 中华中医药学刊. 2017(04)
[2]基于分子对接的独活寄生汤治痿和治痹药效物质基础研究[J]. 郑春松,严培晶,付长龙,叶蕻芝,吴广文,李西海,刘献祥. 风湿病与关节炎. 2017(03)
[3]独活寄生汤对膝关节骨性关节炎患者关节功能及血清炎性因子的影响[J]. 陈卓. 中国中医药科技. 2017(02)
[4]淫羊藿苷对成骨细胞成骨分化的影响及Wnt/-catenin信号系统的关系研究[J]. 涂艳,熊莉娜,柳湘洁,雷超,李凝旭,张瑞芸. 中国中医急症. 2017(03)
[5]黄芪甲苷对Wnt/β-catenin信号通路活化的人滑膜及软骨细胞共培养体系相关因子的调控作用[J]. 王德刚,许传勇,姜玉祥,阚卫兵,肖志锋,姚丽,刘婉,谢殿洪,汤豪,张玉婷. 广东医学. 2017(03)
[6]骨碎补总黄酮对骨质疏松症大鼠BMP-2蛋白表达及血清骨钙素水平的影响[J]. 黄松,陈敬有,高皓. 中国当代医药. 2017(04)
[7]针灸联合独活寄生汤治疗膝关节骨性关节炎疗效观察及对微炎性反应指标的影响[J]. 任景,李涛,于苗,智勇. 世界中医药. 2016(10)
[8]独活寄生汤对胶原性关节炎大鼠膝关节软骨细胞退变的干预作用[J]. 陈朝蔚,郑洁,杨沛林,周树云,杨梅,戴琪萍. 上海中医药大学学报. 2016(06)
[9]独活寄生汤治疗膝关节骨性关节炎临床疗效及对膝关节液炎症因子的影响[J]. 杨剑标. 河北中医. 2016(08)
[10]WNT信号通路抑制因子-1和β连环蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义[J]. 李波,宋永胜,张超,司青乐. 疑难病杂志. 2016(07)
博士论文
[1]鹿茸归经靶向调控骨关节炎TGF-β/Smads信号通路机制研究[D]. 孙志涛.广州中医药大学 2013
硕士论文
[1]骨性关节炎患者膝关节等速测试与Q角测量研究[D]. 程亚博.成都体育学院 2012
本文编号：3044372
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