白鲜碱通过下调HIF-1α和Slug信号通路抑制细胞上皮间质转化作用机制研究
发布时间：2021-02-21 19:33
目的:白鲜碱是一种从白鲜根中分离出来的天然生物碱,已被证明具有多种生物学功能,包括抗炎,抗真菌,抗血管生成和抗癌活性。然而,白鲜碱抑制肿瘤生长的机制尚不完全清楚。在本项研究中,我们探讨了白鲜碱作为癌症治疗方法的有效性,并确定了其抗癌活性的潜在机制方法:1.采用分子对接试验模拟了白鲜碱与HIF-1α或Slug之间的相互作用;2.运用蛋白免疫印迹法来检测白鲜碱对HIF-1α、Slug蛋白表达影响;3.用免疫荧光实验来检测白鲜碱对HIF-1α、Slug在细胞核内表达的影响;4.通过蛋白免疫印迹法证明白鲜碱是通过抑制HIF-1α蛋白的合成来降低HIF-1α的表达;5.采用蛋白免疫印迹法来检测白鲜碱对mTOR/p70S6K/eIF4E和MAPK通路以及GSK-3β/Slug信号通路的影响;6.利用蛋白免疫印迹实验和RT-PCR实验在白鲜碱和靶向HIF-1α、Slug的siRNA处理的HCT116细胞中检测对EMT相关蛋白在蛋白水平和mRNA水平上的影响;7.通过划痕实验来检测白鲜碱对细胞迁移的影响;8.利用细胞侵袭实验来检测白鲜碱对细胞侵袭能力的影响;9.采用流式细胞术来检测紫草素对细胞凋亡的影...
【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１常氧和缺氧下ＨＩＦ－１调控机制图??，生子（ＶＥＧＦ）、血红素??
自动蛋白质结构同源建模服务器ＳＷＩＳＳ－ＭＯＤＥＬ建立ＨＩＦ－ｌａ和Ｓｌｕｇ的三维??结构。使用Ａｕｔｏｄｏｃｋ?ｖｉｎａ?１．１．２进行分子对接研宄以探索白鲜碱与ＨＩＦ－ｌｃｉ或??Ｓｌｕｇ蛋白之间的结合模式。如图３－１?Ａ所示白鲜碱与ＨＩＦ－ｌａ结合作用位点。??白鲜碱采用紧密构象结合ＨＩＦ－ｌａ位点。白鲜碱的ｆｕｒ〇［２，３－ｂ］喹啉支架位于疏??水袋中，被残基Ｔｒｐｌ８９，?Ｖａｌｌ９１，?Ｇｌｙ２９８，?Ｖａｌ３２３和Ｔｙｒ３２５包围，形成强疏水??键。重要的是，在白鲜碱和ＶａｌＩ９１之间观察到氢键相互作用，这是ｆ－丨鲜碱和??ＨＩＦ－ｌａ之间的主要相互作用（图３－１?Ａ）。所有这些相互作用有助于在白鲜碱与??ＨＩＦ－ｌｕ结合位点的敲定。白鲜碱与Ｓｌｕｇ结合位点的理论结合模式如图３－１?Ｂ??所示，白鲜碱采用紧密构象结合Ｓｌｕｇ部位。在白鲜碱和Ｇｌｕ２６１之间观察到氢??键相互作用，这是白鲜碱和Ｓｌｕｇ之间的主要相互作用（图３－丨Ｂ）。总之，分??子模拟为白鲜碱和ＨＩＦ－１？或Ｓｌｕｇ之间的相互作用提供了解释，这为进一步幵??发Ｈ１Ｆ－Ｉａ和Ｓｌｕｇ抑制剂提供了有价值的信息。??镳??ｖ?—＊？％?０?ｉ，？ｒｓ??图３－１白鲜碱与模拟ＨＩＦ－ｌｏｔ／Ｓｌｕｇ的分子相彳Ｉ：作用??３．?２在肿瘤细胞中白鲜
ＭＧ－１３２，单独加入白鲜碱（］０（Ｈｉｍ〇ｌ／Ｌ），或者ＭＧ－１３２和白鲜碱（１００｜ａｎｉｏｌ／Ｌ）??共同处理细胞时为１°／。的氧气条件，培养细胞］２小时后，进行核蛋丨＾１提収。??如图３－３?Ａ所示，同在缺氧情况下，与对照组相比，加入ＭＧ－］３２处Ｍ后汙饨??２９??
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年浙江省肿瘤登记地区恶性肿瘤发病与死亡分析[J]. 王悠清,李辉章,龚巍巍,朱陈,陈瑶瑶,钟节鸣,俞敏,杜灵彬. 中国肿瘤. 2019(01)
[2]Epithelial-mesenchymal transition mediated tumourigenesis in the gastrointestinal tract[J]. Ammar Natalwala,Robert Spychal,Chris Tselepis. World Journal of Gastroenterology. 2008(24)
本文编号：3044815
【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１常氧和缺氧下ＨＩＦ－１调控机制图??，生子（ＶＥＧＦ）、血红素??
自动蛋白质结构同源建模服务器ＳＷＩＳＳ－ＭＯＤＥＬ建立ＨＩＦ－ｌａ和Ｓｌｕｇ的三维??结构。使用Ａｕｔｏｄｏｃｋ?ｖｉｎａ?１．１．２进行分子对接研宄以探索白鲜碱与ＨＩＦ－ｌｃｉ或??Ｓｌｕｇ蛋白之间的结合模式。如图３－１?Ａ所示白鲜碱与ＨＩＦ－ｌａ结合作用位点。??白鲜碱采用紧密构象结合ＨＩＦ－ｌａ位点。白鲜碱的ｆｕｒ〇［２，３－ｂ］喹啉支架位于疏??水袋中，被残基Ｔｒｐｌ８９，?Ｖａｌｌ９１，?Ｇｌｙ２９８，?Ｖａｌ３２３和Ｔｙｒ３２５包围，形成强疏水??键。重要的是，在白鲜碱和ＶａｌＩ９１之间观察到氢键相互作用，这是ｆ－丨鲜碱和??ＨＩＦ－ｌａ之间的主要相互作用（图３－１?Ａ）。所有这些相互作用有助于在白鲜碱与??ＨＩＦ－ｌｕ结合位点的敲定。白鲜碱与Ｓｌｕｇ结合位点的理论结合模式如图３－１?Ｂ??所示，白鲜碱采用紧密构象结合Ｓｌｕｇ部位。在白鲜碱和Ｇｌｕ２６１之间观察到氢??键相互作用，这是白鲜碱和Ｓｌｕｇ之间的主要相互作用（图３－丨Ｂ）。总之，分??子模拟为白鲜碱和ＨＩＦ－１？或Ｓｌｕｇ之间的相互作用提供了解释，这为进一步幵??发Ｈ１Ｆ－Ｉａ和Ｓｌｕｇ抑制剂提供了有价值的信息。??镳??ｖ?—＊？％?０?ｉ，？ｒｓ??图３－１白鲜碱与模拟ＨＩＦ－ｌｏｔ／Ｓｌｕｇ的分子相彳Ｉ：作用??３．?２在肿瘤细胞中白鲜
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【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年浙江省肿瘤登记地区恶性肿瘤发病与死亡分析[J]. 王悠清,李辉章,龚巍巍,朱陈,陈瑶瑶,钟节鸣,俞敏,杜灵彬. 中国肿瘤. 2019(01)
[2]Epithelial-mesenchymal transition mediated tumourigenesis in the gastrointestinal tract[J]. Ammar Natalwala,Robert Spychal,Chris Tselepis. World Journal of Gastroenterology. 2008(24)
本文编号：3044815
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