黄芩含药血清对神经干细胞分化钠离子通道基因及cAMP/PKA信号通路的影响

发布时间：2021-03-06 02:07

　　目的研究黄芩含药血清对神经干细胞分化的影响及可能机制。方法分离培养原代乳大鼠神经干细胞,利用免疫荧光法进行鉴定。SD大鼠分别给予500和1000mg/kg黄芩水煎剂每日灌胃1次,连续7天后制备黄芩高、低剂量含药血清。黄芩低、高含药血清均设0.1%、1%、10%三个浓度干预神经干细胞,进行试验药物浓度筛选。收集神经干细胞以每孔1×10⁵个接种于24孔板中,实验分为对照组、黄芩含药血清组和含药血清加抑制剂组,每组3个复孔。对照组每孔加入10μl空白大鼠血清,黄芩含药血清组每孔加入10μl筛选浓度的黄芩含药血清,含药血清加抑制剂组每孔加入10μl筛选浓度的黄芩含药血清及1μl浓度为10mmol/L的H89溶液,隔天换液,共分化7天。比较各组细胞中双肾上腺皮质激素（DCX）、神经元核心抗原（NeuN）细胞增长率;检测细胞中钠离子通道亚型SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表达,蛋白激酶A（PKA）、磷酸化蛋白激酶A（p-PKA）蛋白表达,细胞上清中腺苷酸环化酶（AC）、环磷酸腺苷（cAMP）浓度。结果筛选出1%黄芩高剂量含药血清用于后续实验。与对照组比... 

【文章来源】：中医杂志. 2020,61(16)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 动物
    1.2 药物与试剂
    1.3 主要试剂及仪器
    1.4 大鼠神经干细胞的分离、培养及鉴定
    1.5 黄芩含药血清的制备及浓度筛选
    1.6 实验分组及干预方法
    1.7 观察指标及方法
        1.7.1 细胞中DCX、NeuN标记的阳性细胞数
        1.7.2 细胞中钠离子通道亚型SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表达
        1.7.3 细胞中PKA、p-PKA蛋白表达
        1.7.4 细胞上清AC及cAMP浓度
    1.8 统计学方法
2 结果
    2.1 黄芩含药血清浓度筛选结果
    2.2 各组细胞中DCX及NeuN阳性细胞增长率比较
    2.3 各组细胞中SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表达比较
    2.4 各组细胞上清中AC、cAMP浓度比较
    2.5 各组细胞中p-PKA/PKA值比较
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]贝叶斯网络模型在中医证候研究中的应用[J]. 曲淼,唐启盛,包祖晓,王耘,马良.  中华中医药学刊. 2008(07)
[2]抑郁症中医辨证证型因子频次分析[J]. 姜劲峰,王玲玲.  新中医. 2008(02)



本文编号：3066254