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片仔癀对骨肉瘤干细胞裸鼠移植瘤的作用机制研究

发布时间:2021-03-09 19:43
  目的:本课题组在前期行体外实验证实了片仔癀可以通过抑制骨肉瘤细胞中ABCB1、ABCG2的表达,有效抑制骨肉瘤的生长并逆转其耐药性的基础上,通过体内实验进一步探讨片仔癀对人骨肉瘤CSCs裸鼠移植瘤的作用及对ABCB1、ABCG2蛋白表达的影响。方法:1、人骨肉瘤肿瘤干细胞移植瘤模型的建立对数期MG63/ADM细胞胰酶消化制成单细胞悬液,采用无血清培养基悬浮培养的方式,连续传代3次,富集MG63/ADM细胞中的肿瘤干细胞。48只裸鼠皮下接种肿瘤干细胞建立人骨肉瘤肿瘤干细胞移植瘤模型。依照随机数字表法将其分为对照组、阿霉素组、片仔癀组、片仔癀与阿霉素联合组。2、测量瘤体体积及称重,计算肿瘤体积及重量抑制率末次给药24h后颈椎脱臼处死裸鼠,剥离裸鼠皮下瘤体,测量瘤体体积及称重,计算肿瘤体积、重量抑制率。3、HE观察瘤体病理情况使用HE染色,在光镜下观察各组瘤体病理情况。4、免疫组织组化学法(SP法)及western blot检测瘤体内ABCB1、ABCGG2的表达。采用免疫组织化学法检测不同组间瘤体中ABCB1、ABCG2阳性积分光密度的表达情况;Western blot法检测不同组间瘤体中... 

【文章来源】:福建中医药大学福建省

【文章页数】:45 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
ABSTRACT
中英文缩略词
引言
实验内容
    1 实验材料
        1.1 细胞株
        1.2 实验动物
        1.3 主要试剂
        1.4 主要仪器
        1.5 主要试剂配制
    2 实验方法
        2.1 骨肉瘤干细胞的培养
        2.2 骨肉瘤肿瘤干细胞裸鼠移植瘤模型建立及分组
        2.3 标本采集及计算肿瘤抑制率
        2.4 瘤体包埋、HE染色观察瘤体病理情况
        2.5 免疫组化检测移植瘤内ABCB1、ABCG2的表达情况
        2.6 Westen blot检测瘤体内ABCB1、ABCG2的表达
        2.7 数据统计分析
        2.8 技术路线图
    3 实验结果
        3.1 片仔癀对骨肉瘤肿瘤干细胞裸鼠移植瘤体积及重量的影响
        3.2 HE下观察骨肉瘤细胞的病理情况
        3.3 免疫组化检测片仔癀对裸鼠移植瘤ABCB1、ABCG2表达的影响
        3.4 western blot检测片仔癀对裸鼠移植瘤ABCB1、ABCG2表达的影响
    4 讨论
        4.1 手术联合新辅化疗治疗骨肉瘤
        4.2 肿瘤干细胞与骨肉瘤耐药的关系
        4.3 ABCB1、ABCG2与骨肉瘤干细胞及其耐药的关系
        4.4 中医药治疗肿瘤多药耐药
        4.5 片仔癀在骨肉瘤治疗的应用
结论
参考文献
文献综述 骨肉瘤耐药机制及逆转耐药策略
    参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]片仔癀干预骨肉瘤干细胞ABC转运蛋白逆转耐药的机制研究[D]. 林海英.福建中医药大学 2016
[2]人甲状腺癌中肿瘤干细胞样细胞的分离培养与鉴定[D]. 谭灿亮.南方医科大学 2015
[3]片仔癀逆转大肠癌多药耐药的作用机制研究[D]. 沈阿灵.福建中医药大学 2014



本文编号:3073370

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