靛玉红-3’-肟抑制红细胞凋亡损伤的研究

发布时间：2021-03-10 03:11

　　目的探讨靛玉红-3’-肟（IDM）对红细胞的凋亡损伤影响及其可能机制。方法选择300例健康献血志愿者为研究对象,分别留取新鲜血样,设立实验组、对照组和空白组,其中实验组包含不同浓度梯度的IDM（等比浓度梯度设立为3μM,6μM,12μM）。常规分离新鲜标本得压积红细胞,各组配制成0.4%浓度的红细胞悬液,并按实验设计的要求分别加入不同浓度的IDM、DMSO等孵育24h。孵育后经Annexin V-FITC荧光探针标记,用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞体积大小,用共聚焦激光扫描显微镜观察并拍摄荧光标记红细胞形态;再用Fluo 3-AM作为荧光探针标记钙离子,通过检测荧光强度反映胞内钙离子浓度;然后用荧光探针DCFH-DA标记胞内活性氧类,通过荧光强度的变化反映胞内活性氧类的含量;最后用间接法检测胞膜神经酰胺含量。另外,于12μM IDM孵育24h的红细胞中,分别设立能量缺乏、加入一定浓度的离子霉素（ionomycin）及叔丁基过氧化氢（t-BHP）等实验条件,观察比较红细胞凋亡是否被抑制及其程度。结果与空白、对照组比较,IDM降低了磷脂酰丝氨酸外翻的红细胞比率（即凋亡率）(^**... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

IDM对红细胞磷脂酰丝氨酸外翻率（即凋亡率）的影响

图 2 IDM 对红细胞体积大小的影响A. 最具代表性直方图示红细胞在孵育液中不含 IDM（黑线）及含有 12μM IDM（红线）孵育 24h 后红细胞体积的变化。B. 红细胞体积大小（前向散射表示）在空白组（不含 IDM，白条图）与实验组（3-12μM IDM，黑条图）Ringer 溶液中孵育 24h 后的比较。为了更方便比较，还显示了溶剂组（DMSO）的红细胞体积大小（前向散射表示）（灰条图）。Fig2 结果：在Ringer林格氏孵育液中含有或不含有IDM（3-12μM IDM）的情况下孵育24h后，红细胞体积（前向散射）未有明显的差异。Figure 2. Effect of IDM on erythrocyte forward scatter.(A) A representative histogram of forward scatter of erythrocytes following exposure

(B) Arithmetic means ± SEM (n = 9) of the erythrocyte forward scatter followingincubation for 24 h in Ringer solution without (white bar) or with (black bars) IDM(3–12μM); N.S indicates no significant difference from the absence of IDM(ANOVA).3.3 靛玉红-3'-肟（IDM）对红细胞胞内钙离子荧光强度变化


本文编号：3073956