基于microRNA调控研究黄芩苷抗结肠癌的作用机制

发布时间：2021-03-14 04:46

　　目的:探索黄芩苷抗结肠癌的作用机制。方法:体外实验:1、采用CCK8法检测不同浓度的黄芩苷（0-800 μM）干预人结肠癌细胞HT-29,SW-480,CAC02后各组细胞的增殖情况,确定后续实验所需黄芩苷浓度。2、通过流式细胞仪检测不同浓度的黄芩苷（0,50,100,150和200 μM）对细胞凋亡的影响,并通过western blot实验检测黄芩苷干预后,与对照组相比细胞中的凋亡标志物cleaved-caspase3的表达,以验证黄芩苷对细胞凋亡的诱导作用。3、通过miRNA生物芯片,检测黄芩苷干预后HT29细胞中miRNAs表达谱的改变,筛选出特异性变化的miRNAs,并通过qRT-PCR进行验证。4、在对细胞予以黄芩苷处理的同时,分别转染miR-10a,miR-23a,miR-30c,miR-31,miR-151a和miR-205的类似物（mimics）或抑制剂（inhibitors）以人为升高或降低细胞中这些miRNAs的表达,通过qRT-PCR检测细胞中这些miRNAs的表达量;同时检测转染后细胞中cleaved-caspase3蛋白的表达及细胞凋亡情况,以验证黄芩苷是否通... 

【文章来源】：南京中医药大学江苏省

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－２ａ黄芩苷诱导ＨＴ－２９细胞凋亡??Ｃ注：＊代表Ｐ＜〇．〇５，?＊＊代表Ｐ＜０．０１，＊＊＊代表Ｐ＜０．００１）??

图１－３黄答Ｕ诱导ｃｌｅａｖｅｄ－ｃａｓｐａｓｅ３表达上升??（注：＊代表Ｐ＜０．０５，?＊＊代表Ｐ＜０．０１，?＊＊＊代表Ｐ＜０．００１）??

图２－１黄芩苷处理后，ＨＴ－２９细胞中ｍｉＲＮＡ表达谱的基因芯片结果??

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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[3]黄芩苷干预错配修复基因功能缺失的裸鼠结肠原位移植瘤的作用及分子机制研究[D]. 陈红锦.南京中医药大学 2013

硕士论文
[1]黄芩苷减轻小肠缺血再灌注损伤及其抗内质网应激机制研究[D]. 李智慧.滨州医学院 2016



本文编号：3081512