基于ADME的大黄素肝毒性及相关机制研究
发布时间：2021-04-02 07:13
一、研究背景与目的大黄素是存在于大黄和何首乌等药材中的天然蒽醌类物质,具泻下、抗菌、抗炎、抗肿瘤和保护肝肾等作用,因而受到了广泛的关注和研究。然而大黄素对肝脏具双重作用,小剂量起保护作用,大剂量产生毒性。目前关于大黄素代谢与毒性的关系尚不明确,本研究主要考察以下科学问题:①大黄素的肝细胞毒性及细胞色素P450（Cytochromes P450,CYPs）介导的I相代谢对毒性的影响;②葡萄糖醛酸化转移酶（UDP-glucuronosyltransferases,UGTs）介导的Ⅱ相代谢对毒性的影响及转录因子对关键UGT酶的调控;③大鼠长期摄入大黄素致肝毒性具性别差异的机制;④丙磺舒合用大黄素对大鼠肝毒性的影响及机制。为大黄素的临床合理使用提供一定的理论基础和科学依据。二、研究方法1.采用HepG2细胞模型探讨大黄素的肝细胞毒性,并采用CYP1A2/3A4的抑制剂和诱导剂,考察Ⅰ相代谢对毒性的影响。2.结合体外UGTs纯酶实验、55例人肝/36例人肾样本的基因组和转录组学数据探究参与大黄素Ⅱ相代谢的体内主要UGT酶。分别敲低HepG2细胞中UGT2B7和转录因子HNF4A,探讨Ⅱ相代谢与毒...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：161 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１大黄素对ＨｅｐＧ２?（Ａ）和Ｌ０２?（Ｂ）细胞的生存抑制率（《?＝?５）??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ?ｅｆｆｅｃｔ?（％）?ｏｆ?ｅｍｏｄｉｎ?ｏｎ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＨｅｐＧ２?ａｎｄ?Ｌ０２?ｃｅｌｌｓ?｛ｎ?＝?５）??
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Ｎ－乙酰半胱氨酸在体内可转化为谷胱甘肽，补充细胞内源性谷胱甘肽，增??强细胞解毒功能。采用０．５?ｍＭＮ－乙酰半胱氨酸预处理ＨｅｐＧ２细胞，１?ｈ后再加??入大黄素，检测各给药组ＧＳＨ水平和细胞生存率情况。如图２－５所示，单独加??入５０?大黄素可降低ＧＳＨ水平。将Ｎ－乙酰半胱氨酸单独加入至细胞内，ＧＳＨ??水平明显增加。采用Ｎ－乙酰半胱氨酸预处理细胞，再加入大黄素后，ＧＳＨ水平??虽高于对照组，但明显低于单用Ｎ－乙酰半胱氨酸组，细胞生存率高于单用大黄??素组，这是由于大黄素消耗了由Ｎ－乙酰半胱氨酸转化的谷胱甘肽，减少了对细??胞内还原型谷胱甘肽的消耗，从而减轻了对细胞生长的抑制作用。??Ａ「ｎ?ＧＳＨ?Ｂ??料?方??ｐ?丁?ｅ丨仰－??卜?ＬＪｉ?＿??＾?＾ｊ＞ｃ?Ｎ－ａｃｅｌｙｌｃｙｓｔｅｉｎｅ?〇？Ｍ）：?＾?＾?＾??＾?＾?ｖ－＊＊－?Ｆｊｎｏｄｉｎ??１９??
【参考文献】：
期刊论文
[1]大黄牡蛎汤灌肠治疗痛风性肾病的临床观察[J]. 刘永红,张琨. 云南中医中药杂志. 2017(07)
[2]三黄胶囊治疗急性痛风性关节炎20例[J]. 章懿婷,刘秋红. 中国继续医学教育. 2015(33)
[3]Emodin ameliorates lipopolysaccharides-induced corneal inflammation in rats[J]. Guo-Ling Chen,Jing-Jing Zhang,Xin Kao,Lu-Wan Wei,Zhi-Yu Liu. International Journal of Ophthalmology. 2015(04)
[4]131I-标记大黄素在动物体内的药物动力学和组织分布[J]. 杜丹,吴小艾,范成中,梁勇,辛光,张瑞,刘燕,吴晓华,何杨,黄文. 应用基础与工程科学学报. 2014(01)
[5]清开灵注射液提取物及清开灵注射液与抗生素联合对含blaNDM-1超级细菌的抑菌效果[J]. 尚伟,王雪松,邹大阳,张状年,廖祥儒,袁静. 中国中西医结合杂志. 2013(04)
[6]Inhibitory effect of emodin and Astragalus polysaccharide on the replication of HBV[J]. Shuang-Suo Dang, Xiao-Li Jia, Ping Song, Yan-An Cheng, Xin Zhang, Ming-Zhu Sun, Department of Infectious Diseases, the Second Affi liated Hospital of Medical School of Xi’an Jiao Tong University, Xi’an 710004, Shannxi Province, ChinaEn-Qi Liu, The Center of Experimental Animal, Xi’an Jiao Tong University, Xi’an 710004, Shannxi Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2009(45)
[7]Emodin protects rat liver from CCl4-induced fibrogenesis via inhibition of hepatic stellate cells activation[J]. Miao-Xian Dong, Ying-Bo Zhang, Cheng-Chong Li, Yu-Tao Geng, Li Zhou, Xue-Yan Li, Ji-Cheng Liu, Ying-Cai Niu, The Institute of Medicine, Qiqihar Medical University, Qiqihar 161042, Heilongjiang Province, China Yan Jia, Department of Pathophysiology, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, Heilongjiang Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2009(38)
[8]复方丹参注射液对冠心病患者硝酸酯耐药的影响[J]. 王静,吴时达,陈守春,闫亚非,吴昌碧,徐俊波,郑铿. 中国中西医结合杂志. 2005(01)
[9]小檗碱竞争血浆蛋白结合部位所致药物相互作用的研究[J]. 谭毓治,伍爱婵,谭炳炎,吴珏珩,汤丽芬,李娟好,黎元勋,张栋健. 中国药理学通报. 2002(05)
[10]大黄素对人肾成纤维细胞增殖的影响[J]. 宁英远,王俭勤,屈遂林. 中国中西医结合杂志. 2000(02)
本文编号：3114839
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：161 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１大黄素对ＨｅｐＧ２?（Ａ）和Ｌ０２?（Ｂ）细胞的生存抑制率（《?＝?５）??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ?ｅｆｆｅｃｔ?（％）?ｏｆ?ｅｍｏｄｉｎ?ｏｎ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＨｅｐＧ２?ａｎｄ?Ｌ０２?ｃｅｌｌｓ?｛ｎ?＝?５）??
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（＾ｉＭ）?Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（＾ｉＭ）??图２－１大黄素对ＨｅｐＧ２?（Ａ）和Ｌ０２?（Ｂ）细胞的生存抑制率（《?＝?５）??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ?ｅｆｆｅｃｔ?（％）?ｏｆ?ｅｍｏｄｉｎ?ｏｎ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＨｅｐＧ２?ａｎｄ?Ｌ０２?ｃｅｌｌｓ?｛ｎ?＝?５）??将不同浓度的大黄素（６．２５－２００?＾Ｍ）同时作用于ＨｅｐＧ２细胞４８?ｈ，采用ＳＰＳＳ??１９．０软件中独立样本ｔ检验对各组细胞生存率进行两组间的差异比较，Ｐ?＜?０．０５??认为有统计学意义。结果如图２－２所示，可观察到低浓度大黄素（６．２５－２５?ｐＭ）??促进细胞的生长，使细胞生存率高于对照组，而高浓度大黄素（５０－２００?ｐＭ）却??抑制细胞生长，降低细胞的生存率，因此大黄素对ＨｅｐＧ２细胞的毒性具有浓度??依赖性。??ＨｅｐＧ２??１５０－??｜１〇〇－｜｜｜｜??二??１?ＩＨＩｎｕｉｉ??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（从?Ｍ＞??图２－２大黄素作用于ＨｅｐＧ２细胞后的生存率（《?＝?５，与对照组比，＞＜０．０５／＞＜０．０１，??＊＊＞＜０．００１）??１６??
Ｎ－乙酰半胱氨酸在体内可转化为谷胱甘肽，补充细胞内源性谷胱甘肽，增??强细胞解毒功能。采用０．５?ｍＭＮ－乙酰半胱氨酸预处理ＨｅｐＧ２细胞，１?ｈ后再加??入大黄素，检测各给药组ＧＳＨ水平和细胞生存率情况。如图２－５所示，单独加??入５０?大黄素可降低ＧＳＨ水平。将Ｎ－乙酰半胱氨酸单独加入至细胞内，ＧＳＨ??水平明显增加。采用Ｎ－乙酰半胱氨酸预处理细胞，再加入大黄素后，ＧＳＨ水平??虽高于对照组，但明显低于单用Ｎ－乙酰半胱氨酸组，细胞生存率高于单用大黄??素组，这是由于大黄素消耗了由Ｎ－乙酰半胱氨酸转化的谷胱甘肽，减少了对细??胞内还原型谷胱甘肽的消耗，从而减轻了对细胞生长的抑制作用。??Ａ「ｎ?ＧＳＨ?Ｂ??料?方??ｐ?丁?ｅ丨仰－??卜?ＬＪｉ?＿??＾?＾ｊ＞ｃ?Ｎ－ａｃｅｌｙｌｃｙｓｔｅｉｎｅ?〇？Ｍ）：?＾?＾?＾??＾?＾?ｖ－＊＊－?Ｆｊｎｏｄｉｎ??１９??
【参考文献】：
期刊论文
[1]大黄牡蛎汤灌肠治疗痛风性肾病的临床观察[J]. 刘永红,张琨. 云南中医中药杂志. 2017(07)
[2]三黄胶囊治疗急性痛风性关节炎20例[J]. 章懿婷,刘秋红. 中国继续医学教育. 2015(33)
[3]Emodin ameliorates lipopolysaccharides-induced corneal inflammation in rats[J]. Guo-Ling Chen,Jing-Jing Zhang,Xin Kao,Lu-Wan Wei,Zhi-Yu Liu. International Journal of Ophthalmology. 2015(04)
[4]131I-标记大黄素在动物体内的药物动力学和组织分布[J]. 杜丹,吴小艾,范成中,梁勇,辛光,张瑞,刘燕,吴晓华,何杨,黄文. 应用基础与工程科学学报. 2014(01)
[5]清开灵注射液提取物及清开灵注射液与抗生素联合对含blaNDM-1超级细菌的抑菌效果[J]. 尚伟,王雪松,邹大阳,张状年,廖祥儒,袁静. 中国中西医结合杂志. 2013(04)
[6]Inhibitory effect of emodin and Astragalus polysaccharide on the replication of HBV[J]. Shuang-Suo Dang, Xiao-Li Jia, Ping Song, Yan-An Cheng, Xin Zhang, Ming-Zhu Sun, Department of Infectious Diseases, the Second Affi liated Hospital of Medical School of Xi’an Jiao Tong University, Xi’an 710004, Shannxi Province, ChinaEn-Qi Liu, The Center of Experimental Animal, Xi’an Jiao Tong University, Xi’an 710004, Shannxi Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2009(45)
[7]Emodin protects rat liver from CCl4-induced fibrogenesis via inhibition of hepatic stellate cells activation[J]. Miao-Xian Dong, Ying-Bo Zhang, Cheng-Chong Li, Yu-Tao Geng, Li Zhou, Xue-Yan Li, Ji-Cheng Liu, Ying-Cai Niu, The Institute of Medicine, Qiqihar Medical University, Qiqihar 161042, Heilongjiang Province, China Yan Jia, Department of Pathophysiology, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, Heilongjiang Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2009(38)
[8]复方丹参注射液对冠心病患者硝酸酯耐药的影响[J]. 王静,吴时达,陈守春,闫亚非,吴昌碧,徐俊波,郑铿. 中国中西医结合杂志. 2005(01)
[9]小檗碱竞争血浆蛋白结合部位所致药物相互作用的研究[J]. 谭毓治,伍爱婵,谭炳炎,吴珏珩,汤丽芬,李娟好,黎元勋,张栋健. 中国药理学通报. 2002(05)
[10]大黄素对人肾成纤维细胞增殖的影响[J]. 宁英远,王俭勤,屈遂林. 中国中西医结合杂志. 2000(02)
本文编号：3114839
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