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水飞蓟素通过调控Nrf2抗氧化通路抑制NLRP3炎症小体改善非酒精性脂肪性肝病

发布时间:2021-04-12 23:12
  目的探究水飞蓟素(Silymarin)影响非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)病变进展的机制。方法溶剂、(PA+LPS)、(PA+LPS+Silymarin)3种方式干预人肝癌HepG2细胞后,分别用Western blot、qPCR及荧光探针法检测Nrf2、SIRT2、NLRP3以及其下游Casp1 P45、Casp1 P20蛋白的表达水平以及Nrf2、HO-1、NQO-1的细胞mRNA表达水平以及ROS代谢水平的影响。(PA+LPS+siNC)、(PA+LPS+Silymarin+siNrf2)、(PA+LPS+Silymarin+siNC)、(PA+LPS+siNrf2)四种方式干预HepG2细胞后,再次检测上述蛋白和mRNA等指标。溶剂、HFD和(HFD+Silymarin)3种方式干预小鼠后,对肝脏HE病理切片进行评估,IHC检测肝脏石蜡包埋切片的NLRP3蛋白的组织表达水平的改变。结果 Silymarin可明显升高HepG2细胞的Nrf2和SIRT2表达水平,降低NLRP3、Casp1 P20和ROS表达水平,以及降低小鼠肝脏的NLRP3表达水平。用Nrf2-siRNA特异性抑... 

【文章来源】:中国药理学通报. 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章页数】:7 页

【文章目录】:
1 材料
    1.1 药物与试剂
    1.2 仪器
2 方法
    2.1 细胞培养
    2.2 转染处理
    2.3 药物处理
    2.4 Western blot检测Nrf2、SIRT2、NLRP3、pro Caspase-1及cleaved caspase-1 P20蛋白
    2.5 qPCR检测Nrf2、NQO-1、HO-1的mRNA表达水平
    2.6 ROS检测
    2.7 动物饲养与处理
    2.8 小鼠肝脏形态学观察
    2.9 IHC检测
    2.10 统计学方法
3 结果
    3.1 Silymarin对于HepG2中Nrf2,ROS以及NLRP3炎症小体通路的影响
    3.2 SiRNA的筛选与Silymarin对于HepG2中HO-1、NQO-1表达的影响
    3.3 siNrf2对于Silymarin抑制NLRP3炎症小体作用的影响
    3.4 Silymarin对于小鼠体质量增长与肝脏病理改变的影响
    3.5 Silymarin对于小鼠肝脏中NLRP3蛋白表达的影响
4 讨论



本文编号:3134147

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