基于代谢组学技术的Flavokawain A抗前列腺癌作用及其机制的研究

发布时间：2021-04-21 17:22

　　研究背景:卡瓦胡椒（Piper methysticum G.Forst）是太平洋岛屿上的一种传统作物,在太平洋地区被广泛食用。大量的研究发现,太平洋岛国的前列腺癌和肺癌的发病率较低,人们推测群体中较低的癌症发病率可能与他们饮食卡瓦胡椒有关。Flavokawain A（FKA）是植物卡瓦胡椒中的一种新型查尔酮类化合物,已有研究报道其对乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌等多种肿瘤细胞有显著的抑制作用,且对正常细胞损害较小。前列腺癌（PCa）是男性最常见的泌尿生殖系统恶性肿瘤,美国2019年肿瘤统计报告显示,前列腺癌在男性中的新增发病率居首位,死亡率排名第2。近年来,我国中老年人口中前列腺癌的发病率呈现明显持续增长态势,前列腺癌的预防及治疗引起了人们的极大关注。研究目的:本课题主要研究FKA对前列腺癌细胞株PC3的抑制作用,并对其分子机制进行探究。研究方法:（1）采用MTT法检测FKA对PC3细胞增殖的影响;（2）采用流式细胞术分析FKA对PC3细胞凋亡及周期的影响;（3）通过蛋白质免疫印迹实验（Western blot）测定FKA对细胞周期相关蛋白β-tubulin及Survivin表达的影响;（4... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
引言
第一章 FKA的抗前列腺癌药理活性研究
    1 实验材料
        1.1 仪器和设备
        1.2 试剂
        1.3 实验细胞株
    2 实验方法
        2.1 实验相关溶液的配制
        2.2 细胞培养
        2.3 MTT法检测FKA对 PC3 细胞增殖的影响
        2.4 流式细胞术检测FKA对 PC3 细胞凋亡的影响
        2.5 流式细胞术检测FKA对 PC3 细胞周期分布的影响
        2.6 免疫荧光实验检测FKA对 PC3 细胞tubulin蛋白分布的影响
        2.7 蛋白免疫印迹（Western blot）实验检测FKA对PC3细胞tubulin及 Survivin蛋白表达的影响
        2.8 分子对接
        2.9 统计学方法
    3 结果
        3.1 FKA对 PC3 细胞增殖的影响
        3.2 FKA对 PC3 细胞凋亡的影响
        3.3 FKA对 PC3 细胞周期的影响
        3.4 FKA对微管蛋白分布的影响
        3.5 FKA对PC3细胞中β-tubulin和 Survivin蛋白表达的影响
        3.6 分子对接模拟分析
    4 讨论
    5 本章小结
第二章 FKA对 PC3 细胞代谢重编程的影响
    1 实验材料
        1.1 仪器和设备
        1.2 试剂与试药
        1.3 主要软件
        1.4 主要网站
    2 实验方法
        2.1 细胞样品的收集及处理
        2.2 色谱条件
        2.3 质谱条件
        2.4 样品分析及质量控制
        2.5 数据处理
    3 结果
        3.1 前列腺癌细胞PC3样品代谢组分析结果
        3.2 差异代谢物的筛选及鉴定
        3.3 差异代谢物的鉴定结果
        3.4 代谢通路分析
    4 讨论
    5 本章小结
第三章 前列腺癌组织代谢重编程的研究
    1 实验材料
        1.1 仪器和设备
        1.2 主要试剂
        1.3 主要软件
        1.4 主要网站
    2 实验方法
        2.1 临床组织样品的收集及处理
        2.2 超高效液相色谱条件
        2.3 质谱条件
        2.4 样品分析及质量控制
        2.5 数据处理
    3 结果
        3.1 前列腺癌组织样品代谢组学分析结果
        3.2 差异代谢物的筛选及鉴定
        3.3 差异代谢物的鉴定结果
        3.4 代谢通路分析
    4 讨论
    5 本章小结
第四章 前列腺癌差异基因的获取及代谢组学数据的进一步研究
    1 材料与方法
        1.1 仪器和设备
        1.2 试剂与试药
    2 实验方法
        2.1 数据的收集及预处理
        2.2 差异基因的筛选
        2.3 基因功能及通路分析
        2.4 代谢组学数据进一步挖掘
        2.5 代谢通路的验证
        2.6 ELISA实验
        2.7 流式细胞术检测细胞内ROS（活性氧）含量
    3 结果
        3.1 基因表达检测结果
        3.2 GO分析及KEGG分析结果
        3.3 差异基因与差异代谢物联合分析
        3.4 谷胱甘肽代谢途径中GSH含量,GSS及 GSTP1 活性的测定
        3.5 FKA作用于PC3 细胞后活性氧（ROS）含量的变化
    4 讨论
    5 本章小结
全文总结
参考文献
附录
个人简历
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]代谢组学研究技术及其应用概述[J]. 刘伟,寇国栋.  生物学教学. 2018(09)
[2]基于质谱技术的细胞代谢组学研究进展[J]. 汪思媛,赵星阳,徐玮蔚,刘慧雯.  中国细胞生物学学报. 2017(08)
[3]2013年中国老年人群恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,张思维,曾红梅,邹小农,赫捷.  中华肿瘤杂志. 2017 (01)
[4]鞘氨醇激酶信号通路[J]. 刘佳丽,刘晓惠.  中华临床医师杂志(电子版). 2016(06)
[5]中国前列腺癌发病现状和流行趋势分析[J]. 韩苏军,张思维,陈万青,李长岭.  临床肿瘤学杂志. 2013(04)
[6]2000～2010年我国前列腺癌和乳腺癌流行状况的系统性综述[J]. 唐志柳,白洁,顾丽娜,李岚,薛迪.  中国肿瘤. 2013(04)
[7]秋水仙碱对微管蛋白的作用机制及其细胞效应研究进展[J]. 王亚茹,邓高松,李云,姜金仲,孙宇涵.  西北植物学报. 2010(12)

硕士论文
[1]NDRG1基因启动子甲基化在前列腺癌中的初步研究[D]. 乔鹏飞.天津医科大学 2014



本文编号：3152172