短叶老鹳草素抗肿瘤活性及作用机制研究

发布时间：2021-04-26 07:27

　　目的:探索短叶老鹳草素的抗肿瘤活性及其作用机制,为其在肿瘤治疗的开发应用方面提供科学依据。方法:以人肺癌A549细胞、人肝癌HepG2细胞、人宫颈癌Hela细胞、人黑色素瘤A875细胞、小鼠结肠癌CT26细胞为受试对象,采用MTT法检测不同浓度的短叶老鹳草素作用48 h对A549、HepG2、Hela、A875、CT26细胞增殖的影响;选择抑制效果较好的CT26细胞作为研究对象,利用BALB/c小鼠建立CT26实体瘤模型,观察短叶老鹳草素对小鼠体重、CT26肿瘤生长和脏器指数的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织cleaved-caspase-3及LC3-Ⅱ的表达情况;应用Annexin V-FITC/PI双染法检测短叶老鹳草素处理CT26细胞72 h后细胞的凋亡情况;Western Blot分析不同浓度的短叶老鹳草素对CT26细胞凋亡及自噬相关蛋白表达的影响;激光共聚焦观察短叶老鹳草素作用下CT26细胞自噬标志蛋白LC3的表达和分布。结果:短叶老鹳草素对人肺癌A549细胞、人肝癌HepG2细胞、人宫颈癌Hela细胞、人黑色素瘤A875细胞、小鼠结肠癌CT26细胞均有较好的增殖抑制作用,并... 

【文章来源】：湖北中医药大学湖北省

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词释义
前言
研究思路与技术路线
第一章 综述
    1 短叶老鹳草素抗肿瘤研究概况
        1.1 短叶老鹳草素抑制肿瘤细胞增殖
        1.2 短叶老鹳草素促进肿瘤细胞凋亡
        1.3 短叶老鹳草素逆转肿瘤多药耐药作用
        1.4 短叶老鹳草素对核基因NF-κB的影响
    2 结肠癌研究进展
        2.1 结肠癌的流行病学研究概况
        2.2 结肠癌的分类
        2.3 结肠癌的致病因素
        2.4 结肠癌的分子机制
    3 抗肿瘤作用机制研究
        3.1 诱导细胞凋亡
        3.2 诱导细胞自噬
        3.3 抑制肿瘤细胞转移
        3.4 免疫调节
        3.5 其他抗肿瘤机制
    4 本论文研究意义
第二章 短叶老鹳草素的提取分离
    1 试验材料
        1.1 试验药材
        1.2 主要仪器设备及试剂
    2 提取分离
    3 结构鉴定
    4 讨论
第三章 短叶老鹳草素体外抗肿瘤活性研究
    1 试验材料
        1.1 细胞株
        1.2 受试药物
        1.3 主要仪器与试剂
        1.4 常用试剂及试药的配制
    2 试验方法
        2.1 细胞复苏
        2.2 细胞培养与传代
        2.3 细胞冻存
        2.4 MTT法检测短叶老鹳草素对肿瘤细胞增殖的影响
        2.5 数据统计与分析
    3 结果
    4 讨论
第四章 短叶老鹳草素体内抗小鼠结肠癌CT26活性研究
    1 试验材料
        1.1 细胞株
        1.2 试验动物
        1.3 受试药物
        1.4 主要仪器与试剂
    2 试验方法
        2.1 肿瘤模型的建立
        2.2 分组与给药
        2.3 小鼠体重与瘤重
        2.4 器官系数
        2.5 组织切片
        2.6 免疫组织化学法检测肿瘤组织cleaved-caspase-3 和LC3-Ⅱ的表达水平
    3 试验结果
        3.1 小鼠一般情况观察
        3.2 短叶老鹳草素抑制肿瘤生长
        3.3 短叶老鹳草素对荷瘤小鼠器官的影响
        3.4 短叶老鹳草素对肿瘤组织细胞cleaved-caspase-3、LC3-Ⅱ表达的影响
    4 讨论
第五章 短叶老鹳草素抗肿瘤作用机制研究
    1 试验材料
        1.1 细胞株
        1.2 受试药物
        1.3 主要仪器设备及试剂
        1.4 常用试剂的配制
    2 试验方法
        2.1 流式细胞术检测小鼠结肠癌CT26细胞的凋亡
        2.2 Western Blot检测细胞凋亡及自噬相关蛋白
        2.3 激光共聚焦观察小鼠结肠癌CT26细胞的自噬
    3 结果
        3.1 短叶老鹳草素诱导CT26细胞凋亡
        3.2 短叶老鹳草素促进CT26细胞凋亡蛋白的表达
        3.3 短叶老鹳草素促进CT26细胞自噬蛋白的表达
    4 讨论
        4.1 短叶老鹳草素诱导细胞凋亡
        4.2 短叶老鹳草素诱导细胞自噬
结语与创新
参考文献
已发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[10]莪术对黑色素瘤细胞转移相关能力的影响[J]. 夏卫军,程罗根,徐建亚,顾勤.  中药药理与临床. 2007(02)

硕士论文
[1]鹅不食草化学成分及抗肿瘤活性研究[D]. 朱艳平.湖北中医药大学 2012
[2]鹅不食草乙酸乙酯部位抗肿瘤活性成分的研究[D]. 刘玉艳.湖北中医药大学 2010



本文编号：3161005