天麻提取物对灰树花胞外多糖理化特性、抗氧化及免疫活性影响的探究

发布时间：2021-04-29 20:03

　　本文主要开展了天麻提取物对灰树花胞外多糖组分、理化特性、结构特点和生物活性等方面的研究。研究内容主要包括:添加7%（v/v）天麻提取物参与灰树花发酵过程中,确定天麻提取物的主要成分及其含量的变化,探究天麻提取物对灰树花胞外多糖组分排布及含量的影响;以多糖主要组分为研究对象（EPS-2和REPS-2）,确定多糖组分间多糖含量、蛋白质含量、糖醛酸含量,分子量、单糖组成和糖苷键键合等方面的差异,探究天麻提取物对灰树花胞外多糖结构特点的影响;以体外抗氧化和小鼠体内免疫实验为研究目标,确定多糖组分间对超氧阴离子自由基清除率、DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、小鼠免疫器官指数、血清免疫因子和血清免疫球蛋白含量的变化,探究天麻提取物对灰树花胞外多糖生物活性的影响,总结多糖结构特点与生物活性差异的关联。研究结果如下:研究并建立了天麻素、对羟基苯甲醇（HA）、对羟基苯甲醛（HBA）和巴利森甙定性和定量的检测方法,分析了高温高压灭菌前后天麻提取物主要成分含量的变化及灰树花对天麻提取物主要成分的利用率。结果表明,经高温高压灭菌后,天麻提取物主要成分会发生改变,其中灭菌后的天麻提取物中天麻素含量增加... 

【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 灰树花多糖的研究
    1.2 多糖分析方法的研究进展
        1.2.1 多糖的结构及表征
        1.2.2 多糖分子量(纯度)
        1.2.3 多糖的单糖组成
        1.2.4 化学结构
    1.3 多糖的生物活性
        1.3.1 抗氧化作用
        1.3.2 抗肿瘤作用
        1.3.3 免疫调节作用
        1.3.4 其他生物活性作用
    1.4 多糖分子量、结构特点及生物学活性的关联
    1.5 本论文研究基础及立题意义
    1.6 本论文研究的主要内容
第二章 天麻提取物对灰树花胞外多糖组分分布及含量变化的探究
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 菌种与天麻种类
        2.2.2 实验药品
        2.2.3 实验仪器与设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 培养基
            2.3.1.1 斜面种子培养基
            2.3.1.2 液体种子培养基
            2.3.1.3 发酵培养基
        2.3.2 培养方法
            2.3.2.1 斜面种子培养
            2.3.2.2 液体种子培养
            2.3.2.3 发酵培养
        2.3.3 天麻提取物的制备
        2.3.4 天麻提取物及主要成分检测
        2.3.5 DEAE-52 预处理
        2.3.6 Sephadex G-100 预处理
        2.3.7 胞外多糖的分离纯化
        2.3.8 多糖含量的测定
        2.3.9 蛋白质含量的测定
    2.4 糖醛酸含量的测定
        2.4.1 统计方法
    2.5 结果与讨论
        2.5.1 天麻素标准曲线
        2.5.2 对羟基苯甲醇标准曲线
        2.5.3 对羟基苯甲醛标准曲线
        2.5.4 巴利森甙标准曲线
        2.5.5 天麻提取物主要成分的确定
        2.5.6 天麻提取物灭菌前后主要成分含量的变化
        2.5.7 灰树花发酵过程中天麻提取物含量变化
        2.5.8 灰树花胞外多糖(对照组)组分研究
        2.5.9 灰树花胞外多糖(实验组)组分研究
    2.6 多糖含量的测定
        2.6.1 蛋白质含量的测定
        2.6.2 糖醛酸含量的测定
    2.7 本章小结
第三章 灰树花多糖结构解析
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 菌种与天麻种类
        3.2.2 实验药品
        3.2.3 实验仪器与设备
    3.3 实验方法
        3.3.1 培养基
            3.3.1.1 斜面种子培养基
            3.3.1.2 液体种子培养基
            3.3.1.3 发酵培养基
        3.3.2 培养方法
            3.3.2.1 斜面种子培养
            3.3.2.2 液体种子培养
            3.3.2.3 发酵培养
        3.3.3 天麻提取物的制备
        3.3.4 灰树花多糖的制备
        3.3.5 多糖分子量测定
        3.3.6 单糖组成的测定
        3.3.7 傅里叶红外光谱测定
        3.3.8 GC-MS甲基化测定
        3.3.9 统计方法
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 灰树花多糖EPS-2和REPS-2 的分子量
        3.4.2 单糖混合标准品高效阴离子色谱图
        3.4.3 灰树花胞外多糖单糖组成分析
        3.4.4 傅里叶红外光谱图
        3.4.5 GC-MS甲基化
    3.5 本章小结
第四章 灰树花多糖影响体外抗氧化活性的研究
    4.1 引言
    4.2 实验材料
        4.2.1 菌种与天麻种类
        4.2.2 实验药品
        4.2.3 实验仪器与设备
    4.3 实验方法
        4.3.1 培养基
            4.3.1.1 斜面种子培养基
            4.3.1.2 液体种子培养基
            4.3.1.3 发酵培养基
        4.3.2 培养方法
            4.3.2.1 斜面种子培养
            4.3.2.2 液体种子培养
            4.3.2.3 发酵培养
        4.3.3 天麻提取物的制备
        4.3.4 灰树花多糖的制备
        4.3.5 超氧阴离子自由基的测定
        4.3.6 DPPH自由基的测定
        4.3.7 ABTS自由基的测定
        4.3.8 统计分析
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 超氧阴离子自由基的测定
        4.4.2 DPPH自由基的测定
        4.4.3 ABTS自由基的测定
    4.5 本章小结
第五章 灰树花多糖影响小鼠免疫活性的研究
    5.1 引言
    5.2 实验材料
        5.2.1 菌种与天麻种类
        5.2.2 实验药品
        5.2.3 实验仪器与设备
    5.3 实验方法
        5.3.1 培养基
            5.3.1.1 斜面种子培养基
            5.3.1.2 液体种子培养基
            5.3.1.3 发酵培养基
        5.3.2 培养方法
            5.3.2.1 斜面种子培养
            5.3.2.2 液体种子培养
            5.3.2.3 发酵培养
        5.3.3 天麻提取物的制备
        5.3.4 灰树花多糖的制备
        5.3.5 小鼠的喂养
        5.3.6 免疫缺陷型小鼠模型的构建
        5.3.7 胸腺和脾脏指数的测定
        5.3.8 小鼠血清因子的测定
        5.3.9 统计分析
    5.4 结果与讨论
        5.4.1 灰树花多糖对免疫缺陷小鼠免疫器官指数的影响
        5.4.2 灰树花多糖对免疫缺陷小鼠血清TNF-α和IFN-γ含量的影响
        5.4.3 灰树花多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫因子IL-2和IL-6 含量的影响
        5.4.4 灰树花多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫球蛋白Ig G和 Ig A含量的影响
    5.5 本章小结
第六章 总结与展望
    6.1 主要结论
    6.2 论文创新点
    6.3 展望
致谢
主要参考文献
硕士期间发表论文清单
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]灰树花菌丝体β-葡聚糖提取工艺优化[J]. 钟敏,吴天祥,聂文强,芦红云.  中国酿造. 2017(08)
[2]灰树花多糖抑制乙型肝炎病毒活性的研究[J]. 赵霏,宋雷,郭培燕,马艳庆,杨克虎.  食品与生物技术学报. 2017(06)
[3]灰树花多糖的分离纯化及体外抗肝癌作用研究[J]. 张媛媛,孟梦,王明飞,王春玲.  食品研究与开发. 2016(15)
[4]对羟基苯甲醛等3种天麻成分对灰树花胞外多糖生物合成的影响[J]. 吴彩云,吴天祥,朱俊杰,刘昕,赵群丽.  食品科学. 2016(07)
[5]对羟基苯甲醇对灰树花产胞外多糖的影响及其发酵动力学[J]. 朱俊杰,吴天祥,吴彩云,刘昕,赵群丽.  食品科学. 2016(19)
[6]灰树花胞外多糖的结构及免疫调节活性[J]. 韩丽荣,程代,王莉蕊,王春玲.  生物工程学报. 2016(05)
[7]多糖的化学修饰对其生物活性影响研究进展[J]. 孟思彤,徐艳芝,王振月.  天然产物研究与开发. 2014(11)
[8]中药天麻成分对灰树花胞外多糖合成及相关关键酶的影响[J]. 贺宗毅,吴天祥,徐晓宝.  食品科学. 2013(11)
[9]鹿茸多糖分离纯化及抗氧化活性研究[J]. 赵玉红,金秀明,韩睿.  食品工业科技. 2012(12)
[10]中药黄芪对发酵生产灵芝多糖的影响[J]. 王玉红,丁重阳,徐鹏,章克昌.  食品与生物技术学报. 2005(02)

博士论文
[1]猴头菇多糖的结构表征、免疫调节活性及其机理研究[D]. 伍芳芳.华南理工大学 2018

硕士论文
[1]灰树花多糖对HT-29细胞的抗癌作用及机制研究[D]. 王艳停.天津科技大学 2017
[2]石耳子实体多糖的分离纯化、结构解析及生物活性研究[D]. 陈阳阳.南京农业大学 2015



本文编号：3168089