粗毛纤孔菌胞外多糖对酒精肝损伤保护作用及其液体发酵条件优化
发布时间：2021-05-09 02:46
酒精是继肝炎病毒之后导致肝损害的第二大诱因,开发安全有效的药物对酒精肝损伤的预防与治疗具有重要意义。粗毛纤孔菌是一种珍贵的药用真菌,在民间常用于治疗各种肝病、胃病等,然而这些功效大多缺乏系统的实验数据来支撑,这在很大程度上限制了该菌的进一步开发和利用。多糖是粗毛纤孔菌的主要活性成分之一,在其生物活性上发挥着重要作用,但粗毛纤孔菌子实体一年生,难以快速并大量地获取,而液体发酵技术能够快速大量生产多糖物质,易于实现工业化。为促进粗毛纤孔菌的开发利用,本研究先对1株寄生于枣树的疑似粗毛纤孔菌的菌株进行种属鉴定,然后分析了粗毛纤孔菌液体发酵胞外多糖对小鼠酒精肝损伤的保护作用及药理作用机制,在明确粗毛纤孔菌胞外多糖具有改善酒精肝损伤活性后,进一步优化了粗毛纤孔菌胞外多糖发酵工艺。主要研究内容与结果如下:（1）通过形态学特征和ITS20rDNA序列分析,对寄生枣树的野生疑似粗毛纤孔菌菌株进行鉴定;基于ITS1-5.8S-ITS2序列的长度、碱基构成和变异程度,对粗毛纤孔菌遗传多样性进行分析。研究结果表明,该野生菌株为粗毛纤孔菌（Inonotus20hispidus）,其在自然界中具有丰富的遗传多样...
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
1 课题研究背景及意义
2 粗毛纤孔菌概述
3 粗毛纤孔菌多糖药理活性研究进展
4 酒精肝损伤概述
5 药用真菌多糖对酒精肝损伤的保护作用研究进展
6 研究目标、研究内容和研究技术路线
6.1 研究目标
6.2 研究内容
6.3 研究技术路线
第二章 寄生枣树的野生粗毛纤孔菌的鉴定
1 实验材料、试剂和仪器
1.1 实验材料
1.2 主要仪器与试剂
2 实验方法
2.1 野生菌株的分离
2.2 菌株的形态学鉴定
2.3 菌株的分子鉴定
2.4 粗毛纤孔菌遗传多样性分析
2.5 数据处理及分析
3 结果与分析
3.1 野生菌株的形态学鉴定
3.2 野生菌株的分子鉴定
3.3 粗毛纤孔菌遗传多样性分析
4 讨论与小结
4.1 讨论
4.2 小结
第三章 粗毛纤孔菌胞外多糖的分离纯化及其理化性质
1 实验材料、试剂和仪器
1.1 实验材料
1.2 主要仪器与试剂
2 实验方法
2.1 粗毛纤孔菌胞外粗多糖的制备
2.2 粗毛纤孔菌胞外粗多糖的分离纯化
2.3 IHEPS多糖含量测定
2.4 IHEPS蛋白含量测定
2.5 IHEPS紫外-可见吸收光谱测定
2.6 IHEPS红外吸收光谱测定
2.7 IHEPS单糖组成测定
2.8 数据处理及分析
3 结果与分析
3.1 粗毛纤孔菌胞外粗多糖分离纯化
3.2 IHEPS多糖及蛋白含量
3.3 IHEPS紫外-可见光吸收光谱
3.4 IHEPS红外吸收光谱
3.5 IHEPS单糖组成
4 讨论与小结
4.1 讨论
4.2 小结
第四章 IHEPS对小鼠酒精肝损伤的保护作用
1 实验材料、试剂和仪器
1.1 实验材料
1.2 主要仪器与试剂
2 实验方法
2.1 动物分组与处理
2.2 小鼠醉酒与醒酒时间测定
2.3 小鼠肝指数测定
2.4 小鼠血清AST和 ALT指标的测定
2.5 小鼠肝脏ADH、CAT、SOD和 MDA指标的测定
2.6 肝脏病理组织学分析
2.7 实时荧光定量PCR测定肝组织mRNA的转录水平
2.8 数据处理及分析
3 结果与分析
3.1 IHEPS对小鼠醉酒、醒酒时间的影响
3.2 IHEPS对小鼠肝指数的影响
3.3 IHEPS对小鼠血清AST、ALT活力的影响
3.4 IHEPS对小鼠肝ADH、CAT、SOD和 MDA活力的影响
3.5 IHEPS对小鼠肝脏组织形态学的影响
3.6 Nrf2 介导的抗氧化信号通路mRNA的转录水平
4 讨论与小结
4.1 讨论
4.2 小结
第五章 粗毛纤孔菌胞外多糖液体发酵工艺优化
1 实验材料、试剂和仪器
1.1 实验材料
1.2 主要仪器与试剂
2 实验方法
2.1 发酵液胞外多糖含量的测定
2.2 扁桃斑鸠菊粉末及其发酵基础培养基制备
2.3 粗毛纤孔菌液体菌种制备
2.4 扁桃斑鸠菊叶对粗毛纤孔菌胞外多糖产量的影响
2.5 单因素实验
2.6 正交优化实验
2.7 胞外多糖红外光谱分析
2.8 胞外多糖抗氧化活性分析
2.9 数据处理及分析
3 结果与分析
3.1 扁桃斑鸠菊叶对粗毛纤孔菌胞外多糖产量的影响
3.2 单因素实验结果
3.3 正交优化实验结果
3.4 添加扁桃斑鸠菊与未添加扁桃斑鸠菊发酵胞外多糖产量对比
3.5 胞外多糖红外光谱分析
3.6 胞外多糖抗氧化活性分析
4 讨论与小结
4.1 讨论
4.2 小结
第六章 总结与展望
1 总结
1.1 寄生枣树的野生粗毛纤孔菌的鉴定
1.2 粗毛纤孔菌胞外多糖的制备及其理化性质
1.3 IHEPS对小鼠酒精肝损伤的保护作用
1.4 粗毛纤孔菌胞外多糖液体发酵工艺优化
2 本研究特色和创新之处
3 展望
参考文献
攻读学位期间的学术论文与研究成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]改良HE染色在病理诊断中的实践研究[J]. 程修强. 中国处方药. 2018(12)
[2]粗毛纤孔菌对寒凝血瘀证大鼠血液流变学的影响及谱效关系分析[J]. 李庆杰,包海鹰,图力古尔,李玉. 吉林大学学报(医学版). 2018(01)
[3]不同激素配比对南非叶茎愈伤组织诱导的影响[J]. 黄伟,黎秀琼,刘娇,魏青,吴金山. 热带生物学报. 2017(04)
[4]冬虫夏草与蛹虫草中虫草素和总糖含量测定[J]. 孟繁磊,宋志峰,刘笑笑,牛红红,蔡红梅,魏春雁. 食品研究与开发. 2017(21)
[5]“桑黄”的本草补充考证[J]. 包海鹰,杨烁,李庆杰,图力古尔,李玉. 菌物研究. 2017(04)
[6]枯草芽孢杆菌对灵芝发酵液糖类成分降解规律研究[J]. 王斌,张腾霄,刘利军,张春华,李新晶. 食品工业. 2017(09)
[7]3种乳酸菌发酵提高黄浆水抗氧化能力的研究[J]. 孙晓琦,周德庆,王珊珊,马玉洁,朱兰兰,赵峰. 食品研究与开发. 2017(18)
[8]灵芝-银杏双向液体发酵条件优化及抗氧化的研究[J]. 辛燕花,梁彬,王颖霞,刘阳,白晓静. 菌物学报. 2017(10)
[9]响应面法优化超声波辅助提取鸡枞菌多糖及其抗氧化活性研究[J]. 张恒,郑俏然,李敏. 食品与发酵科技. 2017(02)
[10]冰冻切片苏木精-伊红染色进行性快速染色法研究[J]. 王朝军,董莉,谷培云,张萍,柴春青,令狐丹丹,李莉,李卫东,张腾宙,吴悦. 中国药物与临床. 2017(03)
博士论文
[1]中国野生毛木耳遗传多样性研究[D]. 杜萍.北京林业大学 2011
[2]竹节人参皂苷对乙醇性肝损伤的保护机理研究[D]. 李有贵.浙江大学 2011
硕士论文
[1]扁桃斑鸠菊总黄酮提取及其体外抗肿瘤活性研究[D]. 叶雅沁.福建农林大学 2018
[2]基于SSR分子标记的兴安杜鹃群体遗传结构研究[D]. 满莉.东北师范大学 2016
[3]狗肝菜多糖P1D，P2D和P4D的结构分析及其保肝活性初步研究[D]. 许丹华.广东药科大学 2016
[4]荞麦属植物落粒性相关基因研究[D]. 李雪.贵州师范大学 2015
[5]羊肚菌与铁皮石斛原球茎的双向发酵[D]. 徐丹丹.大连工业大学 2015
[6]铜色牛肝菌多糖提取、分离纯化及抗氧化性研究[D]. 王心诗.昆明理工大学 2015
[7]电针对急性酒精性肝损伤小鼠肝血流灌注及氧化应激反应的影响研究[D]. 唐丽梅.中国中医科学院 2014
[8]鸡枞菌多糖对小鼠急性酒精肝损伤保护作用的研究[D]. 赵云霞.南京师范大学 2014
[9]骨胳肌缺血性损伤的磁共振弥散张量成像研究[D]. 王小天.东北大学 2013
[10]狗肝菜多糖分离纯化及保肝作用研究[D]. 赵沁元.广东药学院 2013
本文编号：3176464
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
1 课题研究背景及意义
2 粗毛纤孔菌概述
3 粗毛纤孔菌多糖药理活性研究进展
4 酒精肝损伤概述
5 药用真菌多糖对酒精肝损伤的保护作用研究进展
6 研究目标、研究内容和研究技术路线
6.1 研究目标
6.2 研究内容
6.3 研究技术路线
第二章 寄生枣树的野生粗毛纤孔菌的鉴定
1 实验材料、试剂和仪器
1.1 实验材料
1.2 主要仪器与试剂
2 实验方法
2.1 野生菌株的分离
2.2 菌株的形态学鉴定
2.3 菌株的分子鉴定
2.4 粗毛纤孔菌遗传多样性分析
2.5 数据处理及分析
3 结果与分析
3.1 野生菌株的形态学鉴定
3.2 野生菌株的分子鉴定
3.3 粗毛纤孔菌遗传多样性分析
4 讨论与小结
4.1 讨论
4.2 小结
第三章 粗毛纤孔菌胞外多糖的分离纯化及其理化性质
1 实验材料、试剂和仪器
1.1 实验材料
1.2 主要仪器与试剂
2 实验方法
2.1 粗毛纤孔菌胞外粗多糖的制备
2.2 粗毛纤孔菌胞外粗多糖的分离纯化
2.3 IHEPS多糖含量测定
2.4 IHEPS蛋白含量测定
2.5 IHEPS紫外-可见吸收光谱测定
2.6 IHEPS红外吸收光谱测定
2.7 IHEPS单糖组成测定
2.8 数据处理及分析
3 结果与分析
3.1 粗毛纤孔菌胞外粗多糖分离纯化
3.2 IHEPS多糖及蛋白含量
3.3 IHEPS紫外-可见光吸收光谱
3.4 IHEPS红外吸收光谱
3.5 IHEPS单糖组成
4 讨论与小结
4.1 讨论
4.2 小结
第四章 IHEPS对小鼠酒精肝损伤的保护作用
1 实验材料、试剂和仪器
1.1 实验材料
1.2 主要仪器与试剂
2 实验方法
2.1 动物分组与处理
2.2 小鼠醉酒与醒酒时间测定
2.3 小鼠肝指数测定
2.4 小鼠血清AST和 ALT指标的测定
2.5 小鼠肝脏ADH、CAT、SOD和 MDA指标的测定
2.6 肝脏病理组织学分析
2.7 实时荧光定量PCR测定肝组织mRNA的转录水平
2.8 数据处理及分析
3 结果与分析
3.1 IHEPS对小鼠醉酒、醒酒时间的影响
3.2 IHEPS对小鼠肝指数的影响
3.3 IHEPS对小鼠血清AST、ALT活力的影响
3.4 IHEPS对小鼠肝ADH、CAT、SOD和 MDA活力的影响
3.5 IHEPS对小鼠肝脏组织形态学的影响
3.6 Nrf2 介导的抗氧化信号通路mRNA的转录水平
4 讨论与小结
4.1 讨论
4.2 小结
第五章 粗毛纤孔菌胞外多糖液体发酵工艺优化
1 实验材料、试剂和仪器
1.1 实验材料
1.2 主要仪器与试剂
2 实验方法
2.1 发酵液胞外多糖含量的测定
2.2 扁桃斑鸠菊粉末及其发酵基础培养基制备
2.3 粗毛纤孔菌液体菌种制备
2.4 扁桃斑鸠菊叶对粗毛纤孔菌胞外多糖产量的影响
2.5 单因素实验
2.6 正交优化实验
2.7 胞外多糖红外光谱分析
2.8 胞外多糖抗氧化活性分析
2.9 数据处理及分析
3 结果与分析
3.1 扁桃斑鸠菊叶对粗毛纤孔菌胞外多糖产量的影响
3.2 单因素实验结果
3.3 正交优化实验结果
3.4 添加扁桃斑鸠菊与未添加扁桃斑鸠菊发酵胞外多糖产量对比
3.5 胞外多糖红外光谱分析
3.6 胞外多糖抗氧化活性分析
4 讨论与小结
4.1 讨论
4.2 小结
第六章 总结与展望
1 总结
1.1 寄生枣树的野生粗毛纤孔菌的鉴定
1.2 粗毛纤孔菌胞外多糖的制备及其理化性质
1.3 IHEPS对小鼠酒精肝损伤的保护作用
1.4 粗毛纤孔菌胞外多糖液体发酵工艺优化
2 本研究特色和创新之处
3 展望
参考文献
攻读学位期间的学术论文与研究成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]改良HE染色在病理诊断中的实践研究[J]. 程修强. 中国处方药. 2018(12)
[2]粗毛纤孔菌对寒凝血瘀证大鼠血液流变学的影响及谱效关系分析[J]. 李庆杰,包海鹰,图力古尔,李玉. 吉林大学学报(医学版). 2018(01)
[3]不同激素配比对南非叶茎愈伤组织诱导的影响[J]. 黄伟,黎秀琼,刘娇,魏青,吴金山. 热带生物学报. 2017(04)
[4]冬虫夏草与蛹虫草中虫草素和总糖含量测定[J]. 孟繁磊,宋志峰,刘笑笑,牛红红,蔡红梅,魏春雁. 食品研究与开发. 2017(21)
[5]“桑黄”的本草补充考证[J]. 包海鹰,杨烁,李庆杰,图力古尔,李玉. 菌物研究. 2017(04)
[6]枯草芽孢杆菌对灵芝发酵液糖类成分降解规律研究[J]. 王斌,张腾霄,刘利军,张春华,李新晶. 食品工业. 2017(09)
[7]3种乳酸菌发酵提高黄浆水抗氧化能力的研究[J]. 孙晓琦,周德庆,王珊珊,马玉洁,朱兰兰,赵峰. 食品研究与开发. 2017(18)
[8]灵芝-银杏双向液体发酵条件优化及抗氧化的研究[J]. 辛燕花,梁彬,王颖霞,刘阳,白晓静. 菌物学报. 2017(10)
[9]响应面法优化超声波辅助提取鸡枞菌多糖及其抗氧化活性研究[J]. 张恒,郑俏然,李敏. 食品与发酵科技. 2017(02)
[10]冰冻切片苏木精-伊红染色进行性快速染色法研究[J]. 王朝军,董莉,谷培云,张萍,柴春青,令狐丹丹,李莉,李卫东,张腾宙,吴悦. 中国药物与临床. 2017(03)
博士论文
[1]中国野生毛木耳遗传多样性研究[D]. 杜萍.北京林业大学 2011
[2]竹节人参皂苷对乙醇性肝损伤的保护机理研究[D]. 李有贵.浙江大学 2011
硕士论文
[1]扁桃斑鸠菊总黄酮提取及其体外抗肿瘤活性研究[D]. 叶雅沁.福建农林大学 2018
[2]基于SSR分子标记的兴安杜鹃群体遗传结构研究[D]. 满莉.东北师范大学 2016
[3]狗肝菜多糖P1D，P2D和P4D的结构分析及其保肝活性初步研究[D]. 许丹华.广东药科大学 2016
[4]荞麦属植物落粒性相关基因研究[D]. 李雪.贵州师范大学 2015
[5]羊肚菌与铁皮石斛原球茎的双向发酵[D]. 徐丹丹.大连工业大学 2015
[6]铜色牛肝菌多糖提取、分离纯化及抗氧化性研究[D]. 王心诗.昆明理工大学 2015
[7]电针对急性酒精性肝损伤小鼠肝血流灌注及氧化应激反应的影响研究[D]. 唐丽梅.中国中医科学院 2014
[8]鸡枞菌多糖对小鼠急性酒精肝损伤保护作用的研究[D]. 赵云霞.南京师范大学 2014
[9]骨胳肌缺血性损伤的磁共振弥散张量成像研究[D]. 王小天.东北大学 2013
[10]狗肝菜多糖分离纯化及保肝作用研究[D]. 赵沁元.广东药学院 2013
本文编号：3176464
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