基于Wnt/β-catenin通路探讨β-细辛醚诱导肺癌细胞凋亡的机制研究

发布时间：2021-05-18 22:31

　　目的:肺癌是世界范围内死亡率和发病率均居首位的恶性肿瘤。化疗已达到其疗效平台,而靶向药物仅对某些基因突变型有效及产生原发性和获得性耐药均限制了它的使用。.近年来,石菖蒲提取物β-细辛醚在抗癌方面的研究引起广泛关注,并在各种恶性肿瘤中表现出良好的抗癌作用,但其作用机制未明。本研究旨在研究β-细辛醚对肺癌细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响,并基于Wnt/β-catenin信号通路探讨其可能的机制,为β-细辛醚为代表的中药单体对肺癌等恶性肿瘤的治疗作用提供新的观点和理论基础。方法:1.四种肺癌细胞株（A549、NCI-H1299、NCI-H1650和HCC827）培养基中加入不同浓度β-细辛醚共培养（0μM、200μM、400μM和800μ M）,应用MTT法检测不同时间点（24h、48h、72h和96h）细胞的增殖活性。2.应用Transwell小室检测不同浓度β-细辛醚（0 μ M、100 μ M、200 μ M和400 μ M）对肺癌细胞株迁移、侵袭能力的影响;并检测β-细辛醚对肺癌细胞株粘附能力的影响。3.应用流式细胞术Annexin V/PI染色法检测不同浓度β-细辛醚（0μM、1... 

【文章来源】：广州中医药大学广东省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
引言
第1章 文献研究
    1.1 肺癌的中医药治疗进展
        1.1.1 中医药治疗肺癌的临床研究
        1.1.2 中医药治疗肺癌的基础研究
    1.2 经典Wnt信号通路与肺癌
        1.2.1 经典Wnt信号通路的简介
        1.2.2 NSCLC中的经典Wnt通路
    1.3 细胞凋亡
        1.3.1 内源性通路(线粒体途径)
        1.3.2 外源性通路(死亡受体途径)
        1.3.3 内质网途径
    1.4 Wnt/β-catenin信号通路对细胞增殖的调控
    1.5 Wnt/β-catenin信号通路对细胞凋亡的调控
    1.6 β-细辛醚抗肿瘤研究进展
    1.7 石菖蒲在肿瘤治疗方面的临床应用
第2章 β-细辛醚通过Wnt/β-catenin通路诱导肺癌细胞凋亡
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验细胞
        2.1.2 药物及常用试剂的配制
        2.1.3 实验试剂与耗材
        2.1.4 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞复苏
        2.2.2 细胞培养
        2.2.3 细胞传代
        2.2.4 细胞冻存
        2.2.5 细胞计数
        2.2.6 MTT法检测细胞增殖
        2.2.7 Transwell实验检测细胞迁移和细胞侵袭
        2.2.8 流式细胞术Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡
        2.2.9 JC-1染色测定线粒体膜电位的变化
        2.2.10 双荧光素酶报告系统检测β-catenin信号通路活性
        2.2.11 线粒体蛋白分离实验
        2.2.12 RT-PCR检测相关mRNA表达
        2.2.13 Western Blot检查相关蛋白的表达
        2.2.14 统计学分析
    2.3 研究结果
        2.3.1 β-细辛醚对肺癌细胞株增殖抑制率的影响
        2.3.2 β-细辛醚对肺癌细胞株迁移、侵袭、粘附能力的影响
        2.3.3 β-细辛醚对肺癌细胞株凋亡的影响
        2.3.4 β-细辛醚促进A549细胞凋亡相关机制的研究
        2.3.5 β-细辛醚对A549细胞Wnt/β-catenin通路的影响
        2.3.6 激活Wnt/β -catenin通路逆转β-细辛醚诱导的抗肿瘤效应
    2.4 讨论
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
附件



本文编号：3194595