土木香提取物对胰腺癌细胞的抑制作用及机制研究

发布时间：2021-05-26 08:48

　　目的我们的前期研究通过对土木香有效成分的分离提取,得到了具有抗肿瘤活性的混合物:土木香提取物（inula helenium L.ethyl acetate extract,EEIHL）。本研究将探讨EEIHL抗胰腺肿瘤的作用,并对其可能的作用机制进行研究,为抗胰腺癌候选药物的筛选和研究提供可靠依据和开发方向。方法采用CCK8法检测EEIHL对胰腺癌细胞的增殖作用的影响,并通过克隆形成实验检测EEIHL对细胞增殖的变化;采用PI染色法检测EEIHL作用后细胞周期的分布情况以及细胞凋亡率;采用DAPI染核法观察EEIHL作用后细胞核形态的变化;采用JC-1染色法检测给药后细胞线粒体膜电位的变化;采用BioVision试剂盒检测Caspase-3的活性变化;采用划痕实验观察EEIHL对胰腺癌细胞迁移作用的影响;荧光定量PCR法检测E-Cadherin mRNA、Snail mRNA的表达;采用Western blot法检测相关蛋白的表达。结果EEIHL能抑制胰腺癌细胞的增殖,EEIHL对胰腺癌细胞Capan-2和CFPAC-1在48h 的 IC50 分别为 4.68±0.17 μg/ml 和... 

【文章来源】：浙江中医药大学浙江省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
一、材料与方法
    (一) 实验材料
        1. 实验细胞
        2. 实验药品
        3. 主要实验仪器与设备
        4. 实验试剂
    (二) 实验方法
        1. 细胞培养
        2. CCK8实验
        3. 集落形成实验
        4. 流式细胞术测定细胞周期
        5. 流式细胞术测定细胞凋亡
        6. DAPI荧光染色实验
        7. JC-1染色测定线粒体膜电位变化
        8. Caspase-3活性检测
        9. 划痕实验
        10. Real-time PCR
        11. Western blot
        12. 数据分析
二、实验结果
    (一) EEIHL抑制胰腺癌细胞Capan-2和CFPAC-1的增殖
    (二) EEIHL引起胰腺癌细胞CFPAC-1周期阻滞
    (三) EEIHL诱导胰腺癌细胞Capan-2和CFPAC-1发生凋亡
    (四) EEIHL降低胰腺癌细胞Capan-2和CFPAC-1线粒体膜电位
    (五) EEIHL激活胰腺癌细胞CFPAC-1的Caspase-3活性
    (六) EEIHL抑制胰腺癌细胞CFPAC-1迁移
    (七) EEIHL可能通过抑制EMT相关蛋白抑制胰腺癌细胞CFPAC-1转移
    (八) EEIHL对胰腺癌细胞Capan-2和CFPAC-1凋亡蛋白的影响
三、分析和讨论
结论
参考文献
附图
致谢
文献综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]土木香化学成分及药理研究概况[J]. 张乐,方羽,陆国红.  中成药. 2015(06)
[2]中国胰腺癌发病趋势分析和预测[J]. 马臣,姜永晓,刘曙正,全培良,孙喜斌,郑荣寿,张思维,陈万青.  中华流行病学杂志. 2013 (02)
[3]土木香化学成分的研究[J]. 赵永明,张嫚丽,霍长虹,顾玉诚,史清文.  天然产物研究与开发. 2009(04)
[4]土木香的化学成分及药理作用研究进展[J]. 李雪莲,朴惠善.  中国现代中药. 2007(06)
[5]土木香中抑制肿瘤细胞增殖的成分[J].   国外医学(中医中药分册). 2003(03)



本文编号：3206087