广西莪术中抗鼻咽癌活性成分开发及应用
发布时间：2021-06-09 17:08
目的:体外研究莪术醇对人鼻咽癌CNE-2细胞中IGF-1R/PI3K/Akt/GSK-3β通路及其下游分子的影响;探究莪术醇诱导的CNE-2细胞增殖抑制、周期阻滞、细胞凋亡效应及其潜在分子机制,为开发IGF-1R新型抑制剂,鉴定鼻咽癌分子靶向治疗的有效靶点奠定基础,并为提高莪术醇在肿瘤临床治疗应用中的有效性提供科学依据。方法:将对数生长期的CNE-2细胞接种于培养板中,施以浓度递增的莪术醇（12.5、25、50、100μg/mL）进行干预,同时设置阴性对照组;MTT法评估不同浓度的莪术醇处理CNE-2细胞24、48、72、96h后细胞增殖活力的变化;平板克隆形成实验评估不同浓度的莪术醇处理CNE-2细胞后克隆形成及增殖能力的差异;流式细胞术检测莪术醇作用48h后CNE-2细胞的周期进程及凋亡情况;Q-PCR、Western blotting分别检测莪术醇处理48h后CNE-2细胞中IGF-1R/PI3K/Akt/GSK-3β通路及其下游周期相关因子和凋亡相关因子的mRNA和蛋白表达水平。莪术醇（50μg/mL）与IGF-1（50ng/mL）分别处理及联合处理CNE-2细胞,同时设置阴性...
【文章来源】：桂林医学院广西壮族自治区
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
莪术醇诱导CNE-2细胞增殖抑制Figure1CurcumolinducedproliferationinhibitiononCNE-2cells
莪术醇（12.5、25、50、100μg/mL）处理细胞 15 天后，评估克隆增殖情况结果显示，莪术醇处理组的细胞克隆形成能力显著低于对照组，且在检测浓度范围内，CNE-2 细胞的克隆数量与莪术醇的浓度负相关（图 2A 和 B）表明莪术醇能抑制 CNE-2 细胞的克隆形成，即诱导细胞增殖抑制。形态学上同样可以看出，莪术醇诱导肿瘤细胞失去原有的细胞形态，胞体皱缩，核破裂，胞浆内颗粒增多（图 2C）。
2.2 莪术醇诱导 CNE-2 细胞周期阻滞2.2.1 莪术醇诱导 CNE-2 细胞发生 G0/G1 期阻滞细胞周期进程的变化是细胞生长、增殖和分化最基本的表现。我们采用 PI 单染色法，应用流式细胞术检测莪术醇对鼻咽癌 CNE-2 细胞周期进程的影响。结果显示，莪术醇处理 CNE-2 细胞 48h 后，随着莪术醇浓度的增加，G0/G1 期细胞比例增多，G2/M 期、S 期细胞比例减少（图 3A 和 B）。表明莪术醇以剂量依赖性的方式诱导 CNE-2 细胞发生 G0/G1 期阻滞，导致DNA 合成障碍，从而引起增殖抑制。
【参考文献】：
期刊论文
[1]人参皂苷Rg3对鼻咽癌Th1/Th2细胞因子表达情况及临床治疗效果分析[J]. 赵燕. 陕西中医. 2018(01)
[2]茶多酚对鼻咽癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及机制的研究[J]. 田梦秋,袁东杰,郑实兴,李庆玉,石书婧,徐志文. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2015(06)
[3]Nasopharyngeal carcinoma incidence and mortality in China in 2010[J]. Kuang-Rong Wei,Rong-Shou Zheng,Si-Wei Zhang,Zhi-Heng Liang,Zhi-Xiong Ou,Wan-Qing Chen. Chinese Journal of Cancer. 2014(08)
[4]茶多酚抑制鼻咽癌及辐射防护作用的研究进展[J]. 袁东杰,魏媛媛,徐志文. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2014(04)
[5]莪术醇抑制人肝癌细胞HepG2增殖的机制[J]. 黄岚珍,王娟,卢菲婷,杨飞城,陈旭,洪雪,蒋晓山. 中国中药杂志. 2013(11)
[6]苦参碱及其衍生物对人鼻咽癌细胞的耐药逆转作用[J]. 张俊,唐安洲. 中药材. 2012(12)
[7]茶多酚和粉防己碱联合抗肿瘤药物对鼻咽癌耐药细胞株HNE-1（200）增殖的抑制作用[J]. 王洪鹏,叶琳,王驰,陈鸿雁. 中国中医急症. 2010(01)
[8]苦参碱通过诱导NKG2D配体高表达增强NK细胞对ABCG2high耐药鼻咽癌细胞杀伤活性[J]. 黄宇贤,王杨,孙明,周雪云,邓兰,郭坤元. 南方医科大学学报. 2009(07)
[9]胰岛素样生长因子-1受体蛋白在鼻咽癌细胞中的表达及其临床意义[J]. 尹述成,周绪红,彭涛,李俊,江孝清. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2008(19)
[10]氧化苦参碱对鼻咽癌耐药细胞株HNE-1（200）耐药逆转机制的研究[J]. 王驰,陈鸿雁,叶琳,沈娜,张潜英,余晓燕. 中国药房. 2008(24)
硕士论文
[1]莱菔硫烷通过miRNA-124-3p靶向STAT3抑制鼻咽癌的增殖[D]. 杨兴龙.南方医科大学 2014
本文编号：3220979
【文章来源】：桂林医学院广西壮族自治区
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
莪术醇诱导CNE-2细胞增殖抑制Figure1CurcumolinducedproliferationinhibitiononCNE-2cells
莪术醇（12.5、25、50、100μg/mL）处理细胞 15 天后，评估克隆增殖情况结果显示，莪术醇处理组的细胞克隆形成能力显著低于对照组，且在检测浓度范围内，CNE-2 细胞的克隆数量与莪术醇的浓度负相关（图 2A 和 B）表明莪术醇能抑制 CNE-2 细胞的克隆形成，即诱导细胞增殖抑制。形态学上同样可以看出，莪术醇诱导肿瘤细胞失去原有的细胞形态，胞体皱缩，核破裂，胞浆内颗粒增多（图 2C）。
2.2 莪术醇诱导 CNE-2 细胞周期阻滞2.2.1 莪术醇诱导 CNE-2 细胞发生 G0/G1 期阻滞细胞周期进程的变化是细胞生长、增殖和分化最基本的表现。我们采用 PI 单染色法，应用流式细胞术检测莪术醇对鼻咽癌 CNE-2 细胞周期进程的影响。结果显示，莪术醇处理 CNE-2 细胞 48h 后，随着莪术醇浓度的增加，G0/G1 期细胞比例增多，G2/M 期、S 期细胞比例减少（图 3A 和 B）。表明莪术醇以剂量依赖性的方式诱导 CNE-2 细胞发生 G0/G1 期阻滞，导致DNA 合成障碍，从而引起增殖抑制。
【参考文献】：
期刊论文
[1]人参皂苷Rg3对鼻咽癌Th1/Th2细胞因子表达情况及临床治疗效果分析[J]. 赵燕. 陕西中医. 2018(01)
[2]茶多酚对鼻咽癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及机制的研究[J]. 田梦秋,袁东杰,郑实兴,李庆玉,石书婧,徐志文. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2015(06)
[3]Nasopharyngeal carcinoma incidence and mortality in China in 2010[J]. Kuang-Rong Wei,Rong-Shou Zheng,Si-Wei Zhang,Zhi-Heng Liang,Zhi-Xiong Ou,Wan-Qing Chen. Chinese Journal of Cancer. 2014(08)
[4]茶多酚抑制鼻咽癌及辐射防护作用的研究进展[J]. 袁东杰,魏媛媛,徐志文. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2014(04)
[5]莪术醇抑制人肝癌细胞HepG2增殖的机制[J]. 黄岚珍,王娟,卢菲婷,杨飞城,陈旭,洪雪,蒋晓山. 中国中药杂志. 2013(11)
[6]苦参碱及其衍生物对人鼻咽癌细胞的耐药逆转作用[J]. 张俊,唐安洲. 中药材. 2012(12)
[7]茶多酚和粉防己碱联合抗肿瘤药物对鼻咽癌耐药细胞株HNE-1（200）增殖的抑制作用[J]. 王洪鹏,叶琳,王驰,陈鸿雁. 中国中医急症. 2010(01)
[8]苦参碱通过诱导NKG2D配体高表达增强NK细胞对ABCG2high耐药鼻咽癌细胞杀伤活性[J]. 黄宇贤,王杨,孙明,周雪云,邓兰,郭坤元. 南方医科大学学报. 2009(07)
[9]胰岛素样生长因子-1受体蛋白在鼻咽癌细胞中的表达及其临床意义[J]. 尹述成,周绪红,彭涛,李俊,江孝清. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2008(19)
[10]氧化苦参碱对鼻咽癌耐药细胞株HNE-1（200）耐药逆转机制的研究[J]. 王驰,陈鸿雁,叶琳,沈娜,张潜英,余晓燕. 中国药房. 2008(24)
硕士论文
[1]莱菔硫烷通过miRNA-124-3p靶向STAT3抑制鼻咽癌的增殖[D]. 杨兴龙.南方医科大学 2014
本文编号：3220979
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