虎杖主要单体成分对TGF-β/PDGF-BB诱导A549/WI-38细胞表型改变的干预作用
发布时间：2021-06-14 13:47
目的:优化转化生长因子-β（Transforming Growth Factor-β,TGF-β）诱导A549细胞表型转化的条件,评价虎杖主要单体成分（虎杖苷、白藜芦醇及大黄素）对TGF-β诱导A549细胞表型转化的干预作用。优化血小板衍化生长因子-BB（Platelet Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB）诱导 A549 细胞表型转化,评价虎杖主要成分对PDGF-BB诱导A549细胞表型转化的干预作用。优化TGF-β诱导WI-38细胞表型转化的条件,评价虎杖主要单体成分对TGF-β诱导WI-38细胞表型转化的干预作用。通过在细胞水平探讨具有抗肺纤维化活性药物与细胞表型转化之间的相关性,发现可靠的蛋白评价靶点,建立以间质细胞表型特征转化为依据的药物评价筛选模型,以期为肺纤维化疾病在细胞水平药物筛选和治疗提供新的思路和依据。方法:1.虎杖主要单体成分对A549细胞毒性研究:取对数生长期A549细胞,种植于96孔板,以不同浓度的虎杖苷、白藜芦醇、大黄素及芍药苷药液作用于A549细胞72 h,以MTT法检测细胞活力值,评价虎杖主要单体成分对A549细胞的细胞毒性...
【文章来源】：中央民族大学北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图I-1参与IPF细胞关系图
三、实验结果??１．Ａ５４９细胞生长曲线??如图２－１，?２Ｘ１０４？８Ｘ１０４／ｍＬＡ５４９细胞在分别经过１２ｈ？１０８ｈ的正常培养后，其增殖??随时间的增加而增加，在７２—８４?ｈ细胞出现缓滞，然后幵始迅速增加，７２?ｈ前细胞增殖与??时间成线性关系，因此，我们需要将研宄时长控制在７２?ｈ以内。根据线性分析，细胞种植??在４Ｘ１０４？６Ｘ１０４／ｍＬ密度下最好，因此在后续的实验中，我们将选取５Ｘ１０４／ｍＬ进行种植??培养。??２?２３??１８?２００００／ｃｍ３?Ｉ?２?．?Ｉ??：?／?４００００／ｃｍ３?／??８”：?§１５??０＾４?－?０３??０?４－?１－?、ｒ?．．．．－?－Ｔ－?「?Ｔ－－—ｒ－－－－－－．．．．．．．ｒ－．．．．ｒ；?０?＂?１?＇?：■?＾?；?１?＇?：?＇?；??〇?１２?２４?３６?４３?６０?７２?８４?９６?１０８?０?１２?２４?３６?４８?６０?７２?８４?９６?１０８??Ｔ／ｈ?Ｔ／ｈ??３?３?ｎ??２５?６００００／ｃｍ３?ｒ?２５?ｉ?８００００／ｃｍ３?，??〇?１?＾＾??ＯＳ?〇３??０???：?ｉ?：?Ｔ?；?ｒ?—?０?＾?一Ｔ?—??－??０?１２?２４?３６?４８?６０?７２?８４?９６?１０８?０?１２?２４?３６?４８?６０?７２?８４?９６?１０８??Ｔ／ｈ?Ｔ，ｈ??图２－１不同初浓度Ａ５４９细胞时间－增殖－效应关系??Ｆｉｇ．?２－１?Ｔｈｅ?Ｔｉｍｅ－ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｒｅ
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【参考文献】：
期刊论文
[1]虎杖苷对TGF-β1诱导的人类肺泡上皮A549细胞EMT的影响[J]. 杨珺超,徐璐,宋康,王媛,高润娣,陈瑞琳,曹羽. 中国中西医结合杂志. 2016(04)
[2]虎杖药理作用研究进展[J]. 夏婷婷,杨珺超,刘清源,宋康. 浙江中西医结合杂志. 2016(03)
[3]多种生长因子复合物释放系统促人胚肺成纤维细胞增殖的作用[J]. 施丽泳,陈晓阳,黄琳琳,黄勤淼,曾奕明. 中华结核和呼吸杂志. 2015 (03)
[4]大黄素对肺纤维化大鼠的保护作用及部分机制研究[J]. 刘理静,钱红,张平. 中国药理学通报. 2015(02)
[5]虎杖的呼吸系统药理作用及其分子机制[J]. 尹雯,朱丹. 中国药物评价. 2013(02)
[6]白藜芦醇对大鼠肺纤维化逆转作用的研究[J]. 李婉霜,张平,何平平,肖新洲. 临床医学工程. 2012(02)
[7]白藜芦醇苷对大鼠肺间质纤维化的防治作用[J]. 张艳,陈莉延,梁标. 中国中药杂志. 2011(24)
[8]白藜芦醇对博莱霉素致大鼠肺纤维化和NF-κBmRNA的影响[J]. 王在岩,张平,何平平,于小华. 临床肺科杂志. 2011(09)
[9]Fibronectin: Functional character and role in alcoholic liver disease[J]. Razia S Aziz-Seible,Carol A Casey. World Journal of Gastroenterology. 2011(20)
[10]大黄素对肺纤维化大鼠TGF-β1及smad3/7信号通路的影响[J]. 李玉花,许先荣,潘庆,陈明显,周颖,李国平,周苹,许琳. 中华中医药学刊. 2010(02)
硕士论文
[1]虎杖苷对TGF-β1诱导的人类肺泡上皮细胞A549细胞EMT的作用研究[D]. 徐璐.浙江中医药大学 2014
本文编号：3229954
【文章来源】：中央民族大学北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图I-1参与IPF细胞关系图
三、实验结果??１．Ａ５４９细胞生长曲线??如图２－１，?２Ｘ１０４？８Ｘ１０４／ｍＬＡ５４９细胞在分别经过１２ｈ？１０８ｈ的正常培养后，其增殖??随时间的增加而增加，在７２—８４?ｈ细胞出现缓滞，然后幵始迅速增加，７２?ｈ前细胞增殖与??时间成线性关系，因此，我们需要将研宄时长控制在７２?ｈ以内。根据线性分析，细胞种植??在４Ｘ１０４？６Ｘ１０４／ｍＬ密度下最好，因此在后续的实验中，我们将选取５Ｘ１０４／ｍＬ进行种植??培养。??２?２３??１８?２００００／ｃｍ３?Ｉ?２?．?Ｉ??：?／?４００００／ｃｍ３?／??８”：?§１５??０＾４?－?０３??０?４－?１－?、ｒ?．．．．－?－Ｔ－?「?Ｔ－－—ｒ－－－－－－．．．．．．．ｒ－．．．．ｒ；?０?＂?１?＇?：■?＾?；?１?＇?：?＇?；??〇?１２?２４?３６?４３?６０?７２?８４?９６?１０８?０?１２?２４?３６?４８?６０?７２?８４?９６?１０８??Ｔ／ｈ?Ｔ／ｈ??３?３?ｎ??２５?６００００／ｃｍ３?ｒ?２５?ｉ?８００００／ｃｍ３?，??〇?１?＾＾??ＯＳ?〇３??０???：?ｉ?：?Ｔ?；?ｒ?—?０?＾?一Ｔ?—??－??０?１２?２４?３６?４８?６０?７２?８４?９６?１０８?０?１２?２４?３６?４８?６０?７２?８４?９６?１０８??Ｔ／ｈ?Ｔ，ｈ??图２－１不同初浓度Ａ５４９细胞时间－增殖－效应关系??Ｆｉｇ．?２－１?Ｔｈｅ?Ｔｉｍｅ－ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｒｅ
铡?邹悸?肌⒋蠡扑睾蜕忠┸斩裕粒担矗瓜赴?拘裕崳?２．１虎杖苷对Ａ５４９细胞活力影响结果??如图２－２所示，Ａ５４９细胞经不同浓度虎杖苷作用７２?ｈ后，在３１．２５？５００?ｐＭ浓度范围??内，虎杖苷对Ａ５４９细胞有一定抑制作用；经统计分析，各组与对照组比较有显著性差异??（Ｐ＜０．０５），但均未见细胞死亡。在３１．２５？６２．５?ｐＭ的浓度范围给药，虎杖苷对Ａ５４９细胞??无抑制作用（Ｐ＞?０．０５）。??表格２－１不同浓度虎杖苷对Ａ５４９的抑制率（Ｍｅａｎ士ｓ，ｎ＝３）??Ｔａｂｌｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｐｏｌｙｄａｔｉｎ?ｏｎ?Ａ５４９?ｃｅｌｌｓ?（Ｍｅａｎ?士?ＳＥ，?ｎ＝３）??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｐｏｌｙｄａｔｉｎ??＂?Ａ４５０?Ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｒａｔｅ?（％）???（ＭＭ）?????Ｃｏｎｔｒｏｌ?１．３１３５?±０．００１４??３１．２５?１．２９００±０．０５２３?９８．２１?±０．００??６２．５０?１．２２６１?±０．０１４４?９５．０５±３．８８??１２５?１．１９１８±０．０２５６?９７．２０±１．００＊??２５０?１．１３９６±０．０３４３?９５．６２±１．８５＊＊??５００?１．０９７０±０．０４０３?９６．２６±２．５２?＊＊＊??＊Ｐ＜０．０５
【参考文献】：
期刊论文
[1]虎杖苷对TGF-β1诱导的人类肺泡上皮A549细胞EMT的影响[J]. 杨珺超,徐璐,宋康,王媛,高润娣,陈瑞琳,曹羽. 中国中西医结合杂志. 2016(04)
[2]虎杖药理作用研究进展[J]. 夏婷婷,杨珺超,刘清源,宋康. 浙江中西医结合杂志. 2016(03)
[3]多种生长因子复合物释放系统促人胚肺成纤维细胞增殖的作用[J]. 施丽泳,陈晓阳,黄琳琳,黄勤淼,曾奕明. 中华结核和呼吸杂志. 2015 (03)
[4]大黄素对肺纤维化大鼠的保护作用及部分机制研究[J]. 刘理静,钱红,张平. 中国药理学通报. 2015(02)
[5]虎杖的呼吸系统药理作用及其分子机制[J]. 尹雯,朱丹. 中国药物评价. 2013(02)
[6]白藜芦醇对大鼠肺纤维化逆转作用的研究[J]. 李婉霜,张平,何平平,肖新洲. 临床医学工程. 2012(02)
[7]白藜芦醇苷对大鼠肺间质纤维化的防治作用[J]. 张艳,陈莉延,梁标. 中国中药杂志. 2011(24)
[8]白藜芦醇对博莱霉素致大鼠肺纤维化和NF-κBmRNA的影响[J]. 王在岩,张平,何平平,于小华. 临床肺科杂志. 2011(09)
[9]Fibronectin: Functional character and role in alcoholic liver disease[J]. Razia S Aziz-Seible,Carol A Casey. World Journal of Gastroenterology. 2011(20)
[10]大黄素对肺纤维化大鼠TGF-β1及smad3/7信号通路的影响[J]. 李玉花,许先荣,潘庆,陈明显,周颖,李国平,周苹,许琳. 中华中医药学刊. 2010(02)
硕士论文
[1]虎杖苷对TGF-β1诱导的人类肺泡上皮细胞A549细胞EMT的作用研究[D]. 徐璐.浙江中医药大学 2014
本文编号：3229954
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