文蛤寡肽的免疫调节作用研究
发布时间：2021-06-24 06:46
海洋作为天然的宝库蕴藏着丰富的资源,近年来海洋生物资源的开发也成为了一大热点。研究发现海洋生物提取物具有抗癌、抗氧化、降血脂、免疫调节等功效。文蛤作为海洋四大养殖贝类之一,具有很高的食用性和药用价值。本实验室前期提取的氨基酸序列为Gln-Leu-Asn-Trp-Asp的文蛤寡肽（M.meretrix oligopeptides,MMO）在免疫调节方面的研究鲜有报道。因此,本研究以RAW264.7细胞为体外细胞模型、环磷酰胺（Cyclophosphamide,Cy）免疫抑制小鼠为体内动物模型,探讨MMO的免疫调节作用。体外实验设立空白对照组、阳性组（脂多糖,lipopolysaccharides,LPS）和MMO低、中、高剂量组,采用MTT比色法检测对RAW264.7巨噬细胞的活性,倒置显微镜、HE染色和透射电镜观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞周期变化,中性红吞噬实验检测细胞吞噬能力,免疫荧光标记法观察iNOS的表达情况,硝酸根还原酶法和ELISA法检测细胞培养上清液中NO、IL-6和IL-1β的含量,Western Blot法检测细胞中MAPKs信号通路相关蛋白表达情况,探讨MMO...
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度MMO对RAW264.7细胞增殖的影响
注：(a)空白对照组；(b)低剂量组（MMO：10 μg/mL）；(c)中剂量组（MMO：50 μg/mL）；(d)高剂量组（MMO：250 μg/mL）；(e)LPS 组（LPS：1μg/mL）图 3-2 RAW264.7 细胞周期的变化Fig 3-2 RAW264.7 cell cycle changes表 3-1 RAW264.7 细胞周期各期结果（ x±s，n=3）Table 3-1 RAW264.7 cell cycle results（ x±s，n=3）组别 浓度/（μg/mL） G0/G1 期 S 期 G2/M 期空白对照组 0 43.28±0.20 50.75±0.33 5.97±0.37低剂量组 10 39.52±0.15 51.01±0.28 9.47±0.26中剂量组 50 43.01±0.22 49.75±0.16 7.24±0.12高剂量组 250 44.82±0.32 46.04±0.19* 9.14±0.18*LPS 组 1 43.62±0.11 46.69±0.17* 9.7±0.22*注：*.与空白对照组相比，差异有显著性（P<0.05）。3.2.3 RAW264.7 细胞形态的变化
18注：A.空白对照组；B.低剂量组（MMO：10 μg/mL）；C.中剂量组（MMO：50 μg/mL）；D.高剂量组（MMO：250 μg/mL）；E.LPS 组（LPS：1 μg/mL）；圆圈标注：双核仁；箭头标注：伪足。图 3-3 RAW264.7 细胞形态(×200，×1000)Fig 3-3 The morphology of RAW264.7 cells (×200，×1000)各组 RAW264.7 细胞 HE 染色后所得的细胞内部形态如图 3-3 中 A2-E2 所示，空白
【参考文献】：
期刊论文
[1]金线莲多糖对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、细胞周期及分泌IL-2、IFN-γ的影响[J]. 郑小香,李萍,潘晓丽,李健,秦韬,黄一帆,马玉芳. 中国食品学报. 2017(06)
[2]文蛤多肽的制备及对非酒精性脂肪肝细胞模型的修复作用[J]. 赵莎莎,赵玉勤,张亚茹,杨最素,黄芳芳,丁国芳. 中国食品学报. 2017(06)
[3]文蛤寡肽对高脂饮食诱导小鼠肾损伤的修护作用[J]. 王佳佳,叶蕾,杨最素,余方苗,丁国芳. 食品科学. 2018(15)
[4]新孢子虫感染小鼠巨噬细胞IFN-γ、TNF-α和IL-6分泌的变化[J]. 翟涛,宫鹏涛,张西臣,李建华. 中国病原生物学杂志. 2017(04)
[5]低聚葡萄籽原花青素联合顺铂对A549细胞增殖及细胞周期的影响[J]. 王海,连燕娜,高丽萍. 食品科学. 2017(07)
[6]微生物来源抗肿瘤药物的研究进展[J]. 魏艳红,尧晨光,奚彩丽,胡康洪. 中国生物制品学杂志. 2017(03)
[7]针灸联合文蛤膏治疗癌性疼痛临床研究[J]. 周杰,任婷婷,齐泽华. 中医学报. 2017(03)
[8]海洋生物ACE抑制肽研究进展[J]. 操德群,何艳丽,余虹,徐晓婷,徐年军. 核农学报. 2017(05)
[9]海洋生物活性物质降血脂作用研究进展[J]. 赵慧,肖正,陈紫红,林满红,刘斌,曾峰. 农产品加工. 2017(01)
[10]壳聚糖对俄罗斯鲟幼鱼生长性能及免疫功能的影响[J]. 肖艳翼,夏永涛,刘腾飞,胡利静,杨移斌,胡鲲,杨先乐. 水生生物学报. 2017(01)
博士论文
[1]文蛤抗肿瘤多肽的分离纯化及其作用机理的研究[D]. 张玉艳.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2010
硕士论文
[1]TLR诱导NF-κB活化上调NLRP3表达的机制研究[D]. 乔羽.山东大学 2012
[2]文蛤提取液清除自由基对抗运动性疲劳的实验研究[D]. 祝素平.辽宁师范大学 2010
[3]文蛤活性多肽对肝癌细胞SMMC-7721效应的差异蛋白质组研究[D]. 贺量.厦门大学 2007
本文编号：3246592
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度MMO对RAW264.7细胞增殖的影响
注：(a)空白对照组；(b)低剂量组（MMO：10 μg/mL）；(c)中剂量组（MMO：50 μg/mL）；(d)高剂量组（MMO：250 μg/mL）；(e)LPS 组（LPS：1μg/mL）图 3-2 RAW264.7 细胞周期的变化Fig 3-2 RAW264.7 cell cycle changes表 3-1 RAW264.7 细胞周期各期结果（ x±s，n=3）Table 3-1 RAW264.7 cell cycle results（ x±s，n=3）组别 浓度/（μg/mL） G0/G1 期 S 期 G2/M 期空白对照组 0 43.28±0.20 50.75±0.33 5.97±0.37低剂量组 10 39.52±0.15 51.01±0.28 9.47±0.26中剂量组 50 43.01±0.22 49.75±0.16 7.24±0.12高剂量组 250 44.82±0.32 46.04±0.19* 9.14±0.18*LPS 组 1 43.62±0.11 46.69±0.17* 9.7±0.22*注：*.与空白对照组相比，差异有显著性（P<0.05）。3.2.3 RAW264.7 细胞形态的变化
18注：A.空白对照组；B.低剂量组（MMO：10 μg/mL）；C.中剂量组（MMO：50 μg/mL）；D.高剂量组（MMO：250 μg/mL）；E.LPS 组（LPS：1 μg/mL）；圆圈标注：双核仁；箭头标注：伪足。图 3-3 RAW264.7 细胞形态(×200，×1000)Fig 3-3 The morphology of RAW264.7 cells (×200，×1000)各组 RAW264.7 细胞 HE 染色后所得的细胞内部形态如图 3-3 中 A2-E2 所示，空白
【参考文献】：
期刊论文
[1]金线莲多糖对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、细胞周期及分泌IL-2、IFN-γ的影响[J]. 郑小香,李萍,潘晓丽,李健,秦韬,黄一帆,马玉芳. 中国食品学报. 2017(06)
[2]文蛤多肽的制备及对非酒精性脂肪肝细胞模型的修复作用[J]. 赵莎莎,赵玉勤,张亚茹,杨最素,黄芳芳,丁国芳. 中国食品学报. 2017(06)
[3]文蛤寡肽对高脂饮食诱导小鼠肾损伤的修护作用[J]. 王佳佳,叶蕾,杨最素,余方苗,丁国芳. 食品科学. 2018(15)
[4]新孢子虫感染小鼠巨噬细胞IFN-γ、TNF-α和IL-6分泌的变化[J]. 翟涛,宫鹏涛,张西臣,李建华. 中国病原生物学杂志. 2017(04)
[5]低聚葡萄籽原花青素联合顺铂对A549细胞增殖及细胞周期的影响[J]. 王海,连燕娜,高丽萍. 食品科学. 2017(07)
[6]微生物来源抗肿瘤药物的研究进展[J]. 魏艳红,尧晨光,奚彩丽,胡康洪. 中国生物制品学杂志. 2017(03)
[7]针灸联合文蛤膏治疗癌性疼痛临床研究[J]. 周杰,任婷婷,齐泽华. 中医学报. 2017(03)
[8]海洋生物ACE抑制肽研究进展[J]. 操德群,何艳丽,余虹,徐晓婷,徐年军. 核农学报. 2017(05)
[9]海洋生物活性物质降血脂作用研究进展[J]. 赵慧,肖正,陈紫红,林满红,刘斌,曾峰. 农产品加工. 2017(01)
[10]壳聚糖对俄罗斯鲟幼鱼生长性能及免疫功能的影响[J]. 肖艳翼,夏永涛,刘腾飞,胡利静,杨移斌,胡鲲,杨先乐. 水生生物学报. 2017(01)
博士论文
[1]文蛤抗肿瘤多肽的分离纯化及其作用机理的研究[D]. 张玉艳.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2010
硕士论文
[1]TLR诱导NF-κB活化上调NLRP3表达的机制研究[D]. 乔羽.山东大学 2012
[2]文蛤提取液清除自由基对抗运动性疲劳的实验研究[D]. 祝素平.辽宁师范大学 2010
[3]文蛤活性多肽对肝癌细胞SMMC-7721效应的差异蛋白质组研究[D]. 贺量.厦门大学 2007
本文编号：3246592
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