丹参酮ⅡA配伍DAPT对肾纤维化过程中Notch1/Jagged1信号通路的干预作用
发布时间：2021-07-02 18:27
目的:研究丹参酮ⅡA与DAPT配伍对UUO大鼠肾组织与白蛋白诱导人肾小管上皮细胞（HK-2）中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子-β（TGF-β）等蛋白以及Notch1/Jagged1信号途径的干预作用,证实丹参酮ⅡA配伍DAPT防治肾纤维化的疗效机制,为中西药物组分配伍走向临床提供理论基础和实验依据。方法:1.40只雄性SD大鼠采用单纯随机抽样分组方法分为5组,即正常组、模型组、丹参酮ⅡA组、γ-分泌酶抑制剂（DAPT）组、丹参酮ⅡA配伍DAPT组（简称丹参酮ⅡA+DAPT组）。造模后给予相应药物干预14 d。检测大鼠肾小管功能指标:尿微量白蛋白（UMA）、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）的含量,观察肾组织病理。免疫组织化学方法（IHC）检测α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原（ColⅠ）的变化。实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测Notch 1 mRNA、Jagged 1 mRNA的表达情况。免疫印迹法（WB）检测Notch 1、Jagged 1、α-SMA、TGF-β、CTGF的蛋白表达。2.HK-2细胞传代培养同步化后同样分为以上五组,除正常组外均给予过量人血清...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组大鼠肾组织HE染色图（400×）
图 1 各组大鼠肾组织 HE 染色图（400×）注：黑色箭头所指为肾小管，红色箭头所指为炎症细胞A：正常组大鼠肾小球肾小管结构与大小正常，紧密排列，无炎性细胞浸润；B：模型组肾小管代偿性扩张、萎缩，排列稀疏，肾小管间质增宽，大量炎性细胞弥漫性浸润，纤维化明显；C：丹参酮ⅡA 组大鼠肾小管呈囊状；D：DAPT 组可见大量炎性细胞浸润于肾间质；E：丹参酮ⅡA+DAPT 组大鼠仅有少量肾小管局部扩张，肾间质炎性细胞浸润不明显
表 2 各组大鼠肾组织的 HE 和 Masson 评分( x±s，n=8)组别 HE 评分 Masson 评分正常组 0.12±0.02 0.14±0.01模型组 2.68±0.11a2.71±0.19a丹参酮ⅡA 组 1.71±0.06abc1.71±0.04abcDAPT 组 1.77±0.06abc1.70±0.05abc丹参酮ⅡA+DAPT 组 1.19±0.18ab1.39±0.13ab注：a 表示与正常组比较，P<0.05；b 表示与模型组比较，P<0.05；c 表示与丹参酮ⅡA+DAPT 组比较，P<0.05。3.1.3 各组大鼠肾组织免疫组织化学检测结果（1） 各组大鼠肾组织 α-SMA 蛋白表达结果：如表 3 所示：与正常组比较，模型组大鼠肾组织 α-SMA 平均光密度值显著升高(P<0.05)；各药物干预组肾组织 α-SMA 平均光密度值均显著低于模型组 (P<0.05)；各药物干预组组间比较，丹参酮ⅡA+DAPT 组肾组织 α-SMA 平均光密度值低于丹参酮ⅡA 与 DAPT 组(P<0.05)。说明丹参酮ⅡA 与 DAPT 配伍对 UUO 大鼠肾组织 α-SMA蛋白的下调效果优于各单一用药组。α-SMA 免疫组化结果见图 3。
【参考文献】：
期刊论文
[1]丹参酮ⅡA配伍DAPT对UUO大鼠肾间质纤维化的影响[J]. 徐静雅,李均,付旭. 遵义医学院学报. 2018(05)
[2]浅谈Wnt/β-catenin与肾间质纤维化的关系[J]. 黄伟,沈金峰,谢娟,罗富里,晏子友. 江西医药. 2018(01)
[3]丹酚酸A、C分子药对配伍对HK-2细胞CCL2、CXCL10的调节及抗氧化作用[J]. 陈雨思,李均,邹朝霞. 重庆医学. 2017(12)
[4]肾纤维化相关生长因子研究新进展[J]. 赵雪谦,刘云启,杨敏. 临床肾脏病杂志. 2017(03)
[5]中医药治疗慢性肾脏病的研究进展[J]. 朱云洁. 中医临床研究. 2018(07)
[6]Wnt/β-catenin信号通路对肾小管上皮间充质转分化的调控[J]. 牛潼,刘琦然,李玲. 中华实用儿科临床杂志. 2016 (12)
[7]Wnt信号通路与肾小管上皮细胞-间充质转化的关系[J]. 杨欢,张琼. 中国中西医结合肾病杂志. 2016(05)
[8]体检人群尿微量白蛋白肌酐比的临床意义[J]. 郭琴,罗薇,银代淑,贾成瑶. 四川大学学报(医学版). 2016(01)
[9]人血清白蛋白诱导人肾小管上皮细胞对Egr-1表达的影响[J]. 吴丹彤,李均,姚兰. 中国医学创新. 2015(34)
[10]虫草素调控eIF2α/TGF-β/Smad信号通路改善肾间质纤维化的机制[J]. 顾刘宝,卞茸文,涂玥,胡浩,万毅刚,孙伟. 中国中药杂志. 2014(21)
硕士论文
[1]CTGF反义寡核苷酸对肾小管上皮细胞转分化的作用[D]. 沙文刚.四川大学 2004
本文编号：3260992
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组大鼠肾组织HE染色图（400×）
图 1 各组大鼠肾组织 HE 染色图（400×）注：黑色箭头所指为肾小管，红色箭头所指为炎症细胞A：正常组大鼠肾小球肾小管结构与大小正常，紧密排列，无炎性细胞浸润；B：模型组肾小管代偿性扩张、萎缩，排列稀疏，肾小管间质增宽，大量炎性细胞弥漫性浸润，纤维化明显；C：丹参酮ⅡA 组大鼠肾小管呈囊状；D：DAPT 组可见大量炎性细胞浸润于肾间质；E：丹参酮ⅡA+DAPT 组大鼠仅有少量肾小管局部扩张，肾间质炎性细胞浸润不明显
表 2 各组大鼠肾组织的 HE 和 Masson 评分( x±s，n=8)组别 HE 评分 Masson 评分正常组 0.12±0.02 0.14±0.01模型组 2.68±0.11a2.71±0.19a丹参酮ⅡA 组 1.71±0.06abc1.71±0.04abcDAPT 组 1.77±0.06abc1.70±0.05abc丹参酮ⅡA+DAPT 组 1.19±0.18ab1.39±0.13ab注：a 表示与正常组比较，P<0.05；b 表示与模型组比较，P<0.05；c 表示与丹参酮ⅡA+DAPT 组比较，P<0.05。3.1.3 各组大鼠肾组织免疫组织化学检测结果（1） 各组大鼠肾组织 α-SMA 蛋白表达结果：如表 3 所示：与正常组比较，模型组大鼠肾组织 α-SMA 平均光密度值显著升高(P<0.05)；各药物干预组肾组织 α-SMA 平均光密度值均显著低于模型组 (P<0.05)；各药物干预组组间比较，丹参酮ⅡA+DAPT 组肾组织 α-SMA 平均光密度值低于丹参酮ⅡA 与 DAPT 组(P<0.05)。说明丹参酮ⅡA 与 DAPT 配伍对 UUO 大鼠肾组织 α-SMA蛋白的下调效果优于各单一用药组。α-SMA 免疫组化结果见图 3。
【参考文献】：
期刊论文
[1]丹参酮ⅡA配伍DAPT对UUO大鼠肾间质纤维化的影响[J]. 徐静雅,李均,付旭. 遵义医学院学报. 2018(05)
[2]浅谈Wnt/β-catenin与肾间质纤维化的关系[J]. 黄伟,沈金峰,谢娟,罗富里,晏子友. 江西医药. 2018(01)
[3]丹酚酸A、C分子药对配伍对HK-2细胞CCL2、CXCL10的调节及抗氧化作用[J]. 陈雨思,李均,邹朝霞. 重庆医学. 2017(12)
[4]肾纤维化相关生长因子研究新进展[J]. 赵雪谦,刘云启,杨敏. 临床肾脏病杂志. 2017(03)
[5]中医药治疗慢性肾脏病的研究进展[J]. 朱云洁. 中医临床研究. 2018(07)
[6]Wnt/β-catenin信号通路对肾小管上皮间充质转分化的调控[J]. 牛潼,刘琦然,李玲. 中华实用儿科临床杂志. 2016 (12)
[7]Wnt信号通路与肾小管上皮细胞-间充质转化的关系[J]. 杨欢,张琼. 中国中西医结合肾病杂志. 2016(05)
[8]体检人群尿微量白蛋白肌酐比的临床意义[J]. 郭琴,罗薇,银代淑,贾成瑶. 四川大学学报(医学版). 2016(01)
[9]人血清白蛋白诱导人肾小管上皮细胞对Egr-1表达的影响[J]. 吴丹彤,李均,姚兰. 中国医学创新. 2015(34)
[10]虫草素调控eIF2α/TGF-β/Smad信号通路改善肾间质纤维化的机制[J]. 顾刘宝,卞茸文,涂玥,胡浩,万毅刚,孙伟. 中国中药杂志. 2014(21)
硕士论文
[1]CTGF反义寡核苷酸对肾小管上皮细胞转分化的作用[D]. 沙文刚.四川大学 2004
本文编号：3260992
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