差异蛋白质组研究延胡索活性单体的抗血小板聚集作用机制
发布时间：2021-07-07 17:40
血小板过度活化是血栓形成的重要原因之一,而大多数心脑血管疾病如动脉粥样硬化、冠心病等都与血栓形成密切相关。因此抗血小板药的开发与应用是心脑血管疾病预防和治疗的重要手段之一。延胡索是传统的活血化瘀中药,针对其治疗血栓相关疾病的研究越来越受到人们重视。其中脱氢紫堇碱、四氢小檗碱、延胡索甲素、四氢黄连碱和海罂粟碱是延胡索抗血小板聚集的主要活性成分,然而其作用机制尚不明确。另一方面,由于血小板无细胞核并且其所包含的mRNA不被翻译,使得血小板的蛋白质组分析尤其具有实用意义,并可通过分析药物对血小板蛋白质组表达的影响来探究其作用机理。鉴于此,本论文应用所建立的基于双向电泳体系（2-DE）结合质谱（MS）鉴定的血小板差异蛋白质组研究方法探究延胡索活性成分的抗血小板聚集作用机制。论文主要包括四个部分。论文第一部分为文献综述,主要阐述了蛋白质组学在细胞信号通路研究中的应用,包括在肿瘤及肝脏疾病、机体代谢和病原微生物致病机制等方面研究中的应用。然后对延胡索及其活性成分抗血小板聚集研究现状进行了简要综述。论文第二部分为差异蛋白质组分析研究延胡索活性成分抗血小板聚集的作用机制。首先,采用体外抗兔血小板聚集实...
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图2.14个延胡索抗血小板活性单体的化学结构式
ADP 和 AA 诱导的血小板聚集，但对各诱导剂的敏感性不同，其中对 ADP 诱导的血小板聚集抑制作用最强，在低浓度和中浓度药物作用时的抑制率分别为 42.52%和 56.25%，终浓度为 165.38μM 药物能够强烈抑制 ADP 诱导血小板聚集，其抑制率达到 73.48%。此外，由图 2.2B 可知，四氢小檗碱同样剂量性依赖性地抑制 AA，ADP 和 THR 诱导的血小板聚集，其中对 THR 诱导的血小板聚集具有强烈抑制作用，即使较低浓度的药物也能抑制 THR 诱导血小板聚集，终浓度为 165.38μM 药物能够强烈抑制 ADP 诱导血小板聚集，其抑制率达到 92.36%。早期研究及实验室前期研究都证明四氢黄连碱和延胡索甲素具有抗血小板聚集作用，而本实验研究发现四氢黄连碱和延胡索甲素作用后血小板的聚集率与空白溶剂对照组的聚集率相当，而且即使是较高浓度药物及更换不同溶剂也未能使四氢黄连碱和延胡索甲素发挥作用，可能原因有：药物加入血小板测试杯后由于溶剂条件的变化析出来，使最终药物浓度偏小以致低于抗血小板阈值；溶剂的抑制作用太大从而需要加入大量 Ca2+或诱导剂致使血小板发生不可逆聚集；药物可能发挥微弱的作用（低于阈值未被血小板聚集仪检测到）等。
32图 2.3 延胡索活性单体对血小板蛋白表达图谱的影响。A：脱氢紫堇碱；B：四氢小檗碱；C：四氢黄连碱；D：延胡索甲素。差异表达蛋白如图中箭头所示Fig 2.3: Effects of the monomers on platelet protein expression patterns.A: dehydrocorydaline; B: canadine; C: tetrahydrocoptisine D: corydaline.Differentially expressed proteins are indicated by the arrows
【参考文献】：
期刊论文
[1]延胡索化学成分、药理活性及毒副作用研究进展[J]. 何晓凤,张晶,张梅. 上海中医药杂志. 2017(11)
[2]蛋白质组学在细胞信号通路研究中的应用[J]. 谭程宁,黄靖涵,李春红,夏之宁,杨丰庆. 中国药科大学学报. 2017(04)
[3]猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡巨噬细胞天然免疫信号通路相关分子变化分析[J]. 李华玮,陈鑫鑫,赵孟孟,周恩民,乔松林,张改平. 畜牧兽医学报. 2017(07)
[4]基于蛋白质组学的附子、干姜和花椒的性味研究[J]. 王秋红,杨欣,李雪磊,杨炳友,王艳宏,匡海学. 世界中医药. 2015(12)
[5]血小板膜蛋白受体信号转导通路的研究进展[J]. 陆四,孟照辉. 医学综述. 2014(21)
[6]抗血小板聚集药物作用机制的研究进展[J]. 李敏. 首都医药. 2013(18)
[7]线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）在宿主天然免疫信号通路中的调节作用[J]. 杨星星,王凯,陈晓娟,邢雅玲,陈忠斌. 生物化学与生物物理进展. 2013(05)
[8]延胡索的化学成分研究(英文)[J]. 石俊敏,韩伟立,叶文才,陈锡桥,王一涛,张庆文. 天然产物研究与开发. 2011(04)
[9]延胡索化学成分及药理作用研究进展[J]. 鲁春梅,张春森,姜立勇. 中国现代药物应用. 2011(15)
[10]几种热激蛋白在细胞凋亡信号通路中的调控作用[J]. 武斌,李宗芸,杨素春,张迪. 中国生物化学与分子生物学报. 2011(01)
硕士论文
[1]延胡索化学成分研究及其中草药特色体系化学特征表达[D]. 周琼.北京协和医学院 2012
[2]丹七方抗大鼠血小板聚集的蛋白质组学及药动学研究[D]. 姚燕.沈阳药科大学 2008
[3]温阳活血中药复方调控冠心病血小板内受体—配体、信号转导的作用机理研究[D]. 刘宁.辽宁中医药大学 2008
本文编号：3270071
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图2.14个延胡索抗血小板活性单体的化学结构式
ADP 和 AA 诱导的血小板聚集，但对各诱导剂的敏感性不同，其中对 ADP 诱导的血小板聚集抑制作用最强，在低浓度和中浓度药物作用时的抑制率分别为 42.52%和 56.25%，终浓度为 165.38μM 药物能够强烈抑制 ADP 诱导血小板聚集，其抑制率达到 73.48%。此外，由图 2.2B 可知，四氢小檗碱同样剂量性依赖性地抑制 AA，ADP 和 THR 诱导的血小板聚集，其中对 THR 诱导的血小板聚集具有强烈抑制作用，即使较低浓度的药物也能抑制 THR 诱导血小板聚集，终浓度为 165.38μM 药物能够强烈抑制 ADP 诱导血小板聚集，其抑制率达到 92.36%。早期研究及实验室前期研究都证明四氢黄连碱和延胡索甲素具有抗血小板聚集作用，而本实验研究发现四氢黄连碱和延胡索甲素作用后血小板的聚集率与空白溶剂对照组的聚集率相当，而且即使是较高浓度药物及更换不同溶剂也未能使四氢黄连碱和延胡索甲素发挥作用，可能原因有：药物加入血小板测试杯后由于溶剂条件的变化析出来，使最终药物浓度偏小以致低于抗血小板阈值；溶剂的抑制作用太大从而需要加入大量 Ca2+或诱导剂致使血小板发生不可逆聚集；药物可能发挥微弱的作用（低于阈值未被血小板聚集仪检测到）等。
32图 2.3 延胡索活性单体对血小板蛋白表达图谱的影响。A：脱氢紫堇碱；B：四氢小檗碱；C：四氢黄连碱；D：延胡索甲素。差异表达蛋白如图中箭头所示Fig 2.3: Effects of the monomers on platelet protein expression patterns.A: dehydrocorydaline; B: canadine; C: tetrahydrocoptisine D: corydaline.Differentially expressed proteins are indicated by the arrows
【参考文献】：
期刊论文
[1]延胡索化学成分、药理活性及毒副作用研究进展[J]. 何晓凤,张晶,张梅. 上海中医药杂志. 2017(11)
[2]蛋白质组学在细胞信号通路研究中的应用[J]. 谭程宁,黄靖涵,李春红,夏之宁,杨丰庆. 中国药科大学学报. 2017(04)
[3]猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡巨噬细胞天然免疫信号通路相关分子变化分析[J]. 李华玮,陈鑫鑫,赵孟孟,周恩民,乔松林,张改平. 畜牧兽医学报. 2017(07)
[4]基于蛋白质组学的附子、干姜和花椒的性味研究[J]. 王秋红,杨欣,李雪磊,杨炳友,王艳宏,匡海学. 世界中医药. 2015(12)
[5]血小板膜蛋白受体信号转导通路的研究进展[J]. 陆四,孟照辉. 医学综述. 2014(21)
[6]抗血小板聚集药物作用机制的研究进展[J]. 李敏. 首都医药. 2013(18)
[7]线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）在宿主天然免疫信号通路中的调节作用[J]. 杨星星,王凯,陈晓娟,邢雅玲,陈忠斌. 生物化学与生物物理进展. 2013(05)
[8]延胡索的化学成分研究(英文)[J]. 石俊敏,韩伟立,叶文才,陈锡桥,王一涛,张庆文. 天然产物研究与开发. 2011(04)
[9]延胡索化学成分及药理作用研究进展[J]. 鲁春梅,张春森,姜立勇. 中国现代药物应用. 2011(15)
[10]几种热激蛋白在细胞凋亡信号通路中的调控作用[J]. 武斌,李宗芸,杨素春,张迪. 中国生物化学与分子生物学报. 2011(01)
硕士论文
[1]延胡索化学成分研究及其中草药特色体系化学特征表达[D]. 周琼.北京协和医学院 2012
[2]丹七方抗大鼠血小板聚集的蛋白质组学及药动学研究[D]. 姚燕.沈阳药科大学 2008
[3]温阳活血中药复方调控冠心病血小板内受体—配体、信号转导的作用机理研究[D]. 刘宁.辽宁中医药大学 2008
本文编号：3270071
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