紫草素对宫颈癌Caski细胞的作用及HPV E6/E7基因表达的影响
发布时间：2021-07-12 04:12
背景:宫颈癌作为妇女最常见恶性肿瘤之一,严重威胁女性的身心健康。研发合理有效的治疗药物具有重要意义。高危型人乳头瘤病毒的感染已被证实是最主要的病因,其致癌机理与病毒癌基因E6/E7过表达干扰细胞周期、抑制细胞凋亡从而导致细胞恶性增殖相关。E6/E7基因的复制、转录、翻译是抗HPV病毒及其相关宫颈癌的重要分子靶点。紫草素作为中药紫草的主要活性成分,已发现其可抑制宫颈癌Hela（HPV18型）增殖,并诱导其凋亡,其机制与影响caspase、ERK、P13K、ATK、mTOR、ROS/p38途径有关。关于其对E6/E7 mRNA和蛋白表达的影响以及对感染HPV16型宫颈癌细胞的作用目前未见报道。目的:研究紫草素对感染HPV16型宫颈癌Caski细胞的增殖、凋亡以及对E6/E7基因表达的影响。方法:体外培养宫颈癌Caski细胞并进行HPV基因检测,采用MTT法检测不同浓度紫草素（1.25160）μmol/L作用于宫颈癌Caski细胞后细胞的存活率,流式细胞术观察细胞凋亡率改变;DAPI染色观察细胞凋亡形态学改变;采用qRT-PCR法检测E6/E7 mRNA表达的变化,采用...
【文章来源】：湖北医药学院湖北省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
宫颈癌Caski细胞分型检测结果比较(a.宫颈癌Caski细胞HPV分型结果b.HPV分型结果对照表)
.1 宫颈癌 Caski 细胞分型检测结果比较(a.宫颈癌 Caski 细胞 HPV 分型结果 果对照表) 紫草素对宫颈癌 Caski 细胞增殖的影响预实验紫草素浓度选择根据是已有文献报道紫草素抑制宫颈癌 Hela IC5018.9±1.1 μmol/L[26]，确定紫草素浓度为 1.25、2.5、5、10、2160 μmol/L，将其作用于宫颈癌 Caski 细胞 12 h、24 h、36 h 后，M到 12 h、36 h 时仅 20~40 μmol/L 才出现细胞存活率的改变（图 2.2 Ph 时紫草素药物浓度区间在 1.25~5 μmol/L 时细胞存活率无变化；ol/L 时存在随着药物浓度增加出现细胞存活率下降的梯度变化，差异意义（图 2.2 P<0.05）；在 40~160 μmol/L 时细胞存活率差异无统计确定药物作用最佳时间为 24 h，最佳浓度为 5、10、20、40 μmol/L，组的数量，后续实验选取紫草素浓度为 5、10、20、40、80 μmol/L
2.3 紫草素对宫颈癌 Caski 细胞凋亡的作用以 0、5、10、20、40、80 μmol/L 的紫草素培养宫颈癌 Caski 细胞 24 h 后，用 Annexin V/PI 法观察细胞凋亡变化，左下象限显示活细胞，右下象限及右上象限分别显示早期及晚期凋亡细胞，左上象限显示死亡细胞。结果显示未加药组活细胞数高达 96.1%，凋亡及死细胞数目仅占 3.9%。反映出细胞在此时处于良好生长状态。随着紫草素浓度的加大，活细胞数开始逐渐减少，凋亡和死细胞数目逐渐增加（从 3.9%增加至 9.1%、28.9%、41.7%、88.1%、97.17%）（图 2.3 ，图 2.4）（P<0.01），与 MTT 所表现出的细胞存活率结果基本一致。
【参考文献】：
期刊论文
[1]紫草地龙汤联合MTX治疗输卵管妊娠临床观察[J]. 牛芳,高华,马凤岚,钱俊. 上海中医药大学学报. 2017(06)
[2]重用紫草治疗高水平血β-hCG异位妊娠疗效观察[J]. 杜爱平. 药品评价. 2017(05)
[3]中医药治疗恶性肿瘤的特色优势与思考[J]. 王晓群,贾英杰. 时珍国医国药. 2016(12)
[4]紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞雌激素信号通路表达的影响[J]. 黄彩梅,夏亦冬,胡国华. 世界中医药. 2016(09)
[5]紫草素对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体的表达和增殖及凋亡的影响[J]. 陈玉忠,韩福生,许磊,张智瑞,潘琼,刘浩,金功圣. 山西医科大学学报. 2016(08)
[6]自制紫草烧伤生肌膏治疗宫颈糜烂合并HPV感染疗效观察[J]. 林爽,吴晓媛,吕红玉,蒋晓璇,李含荣,姜明,宁照琛. 中国妇幼健康研究. 2016(S2)
[7]紫草素下调Runx2转录活性对乳腺癌细胞体外运动能力的影响[J]. 王芳,吕红,贾娟娣,韩伟,付剑江. 中国医药导报. 2016(18)
[8]紫草素抑制STAT3信号通路对人绒毛膜癌JEG-3细胞迁移和侵袭能力的影响[J]. 王慧智,李会影,徐清雨,马志. 中国现代中药. 2016(04)
[9]紫草素对人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖和凋亡的影响[J]. 王汝兴,鲁艳杰,周健,许倩. 中药药理与临床. 2016(02)
[10]紫草化学成分与药理活性研究进展[J]. 詹志来,胡峻,刘谈,康利平,南铁贵,郭兰萍. 中国中药杂志. 2015(21)
硕士论文
[1]新疆紫草水溶性成分开发利用的化学基础研究[D]. 贺金华.新疆医科大学 2005
本文编号：3279175
【文章来源】：湖北医药学院湖北省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
宫颈癌Caski细胞分型检测结果比较(a.宫颈癌Caski细胞HPV分型结果b.HPV分型结果对照表)
.1 宫颈癌 Caski 细胞分型检测结果比较(a.宫颈癌 Caski 细胞 HPV 分型结果 果对照表) 紫草素对宫颈癌 Caski 细胞增殖的影响预实验紫草素浓度选择根据是已有文献报道紫草素抑制宫颈癌 Hela IC5018.9±1.1 μmol/L[26]，确定紫草素浓度为 1.25、2.5、5、10、2160 μmol/L，将其作用于宫颈癌 Caski 细胞 12 h、24 h、36 h 后，M到 12 h、36 h 时仅 20~40 μmol/L 才出现细胞存活率的改变（图 2.2 Ph 时紫草素药物浓度区间在 1.25~5 μmol/L 时细胞存活率无变化；ol/L 时存在随着药物浓度增加出现细胞存活率下降的梯度变化，差异意义（图 2.2 P<0.05）；在 40~160 μmol/L 时细胞存活率差异无统计确定药物作用最佳时间为 24 h，最佳浓度为 5、10、20、40 μmol/L，组的数量，后续实验选取紫草素浓度为 5、10、20、40、80 μmol/L
2.3 紫草素对宫颈癌 Caski 细胞凋亡的作用以 0、5、10、20、40、80 μmol/L 的紫草素培养宫颈癌 Caski 细胞 24 h 后，用 Annexin V/PI 法观察细胞凋亡变化，左下象限显示活细胞，右下象限及右上象限分别显示早期及晚期凋亡细胞，左上象限显示死亡细胞。结果显示未加药组活细胞数高达 96.1%，凋亡及死细胞数目仅占 3.9%。反映出细胞在此时处于良好生长状态。随着紫草素浓度的加大，活细胞数开始逐渐减少，凋亡和死细胞数目逐渐增加（从 3.9%增加至 9.1%、28.9%、41.7%、88.1%、97.17%）（图 2.3 ，图 2.4）（P<0.01），与 MTT 所表现出的细胞存活率结果基本一致。
【参考文献】：
期刊论文
[1]紫草地龙汤联合MTX治疗输卵管妊娠临床观察[J]. 牛芳,高华,马凤岚,钱俊. 上海中医药大学学报. 2017(06)
[2]重用紫草治疗高水平血β-hCG异位妊娠疗效观察[J]. 杜爱平. 药品评价. 2017(05)
[3]中医药治疗恶性肿瘤的特色优势与思考[J]. 王晓群,贾英杰. 时珍国医国药. 2016(12)
[4]紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞雌激素信号通路表达的影响[J]. 黄彩梅,夏亦冬,胡国华. 世界中医药. 2016(09)
[5]紫草素对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体的表达和增殖及凋亡的影响[J]. 陈玉忠,韩福生,许磊,张智瑞,潘琼,刘浩,金功圣. 山西医科大学学报. 2016(08)
[6]自制紫草烧伤生肌膏治疗宫颈糜烂合并HPV感染疗效观察[J]. 林爽,吴晓媛,吕红玉,蒋晓璇,李含荣,姜明,宁照琛. 中国妇幼健康研究. 2016(S2)
[7]紫草素下调Runx2转录活性对乳腺癌细胞体外运动能力的影响[J]. 王芳,吕红,贾娟娣,韩伟,付剑江. 中国医药导报. 2016(18)
[8]紫草素抑制STAT3信号通路对人绒毛膜癌JEG-3细胞迁移和侵袭能力的影响[J]. 王慧智,李会影,徐清雨,马志. 中国现代中药. 2016(04)
[9]紫草素对人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖和凋亡的影响[J]. 王汝兴,鲁艳杰,周健,许倩. 中药药理与临床. 2016(02)
[10]紫草化学成分与药理活性研究进展[J]. 詹志来,胡峻,刘谈,康利平,南铁贵,郭兰萍. 中国中药杂志. 2015(21)
硕士论文
[1]新疆紫草水溶性成分开发利用的化学基础研究[D]. 贺金华.新疆医科大学 2005
本文编号：3279175
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3279175.html
