强骨康疏方对RAW264.7细胞向OC分化的抑制作用及其机制初探
发布时间：2021-07-18 13:41
目的:探讨强骨康疏方总提取物对体外培养破骨细胞（Osteoclast,OC）分化、酶活性的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:制备强骨康疏方水提物,以OC前体细胞-小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7为研究对象,选取5-10代的RAW264.7细胞经适应性培养后,CCK-8法分析该方对细胞活力的影响;将细胞分为阴性对照组、模型对照组、强骨康疏方低、中、高剂量药物组,除阴性对照组外,其他实验组均加入终浓度为50ng/ml的核因子κB受体活化因子配体（Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL）为OC诱导剂,同时,药物组加入不同浓度的强骨康疏方提取物（50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml）进行干预。采用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色观察各组细胞TRAP阳性多核细胞的数量;比色法试剂盒测定各组TRAP酶活性数值;实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）检测各组细胞TRAP、基质金属蛋...
【文章来源】：湖北民族大学湖北省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度RANKL对RAW264.7细胞向OC分化的影响（未行TRAP染色）
：图 A 为阴性组，图 B 为诱导剂 RANKL（20ng/ml）浓度组，图 C 为诱导剂 RAN（50ng/ml）浓度组, 图 D 为诱导剂 RANKL（150ng/ml）浓度组。图 2-2：不同浓度 RANKL 对 RAW264.7 细胞向 OC 分化的影响（TRAP 染色）g2-2：Effects of different concentrations of RANKLon differentiation of RAW264.7 cellsOC.（TRAP staining）2 强骨康疏方提取物对 OC 分化过程的影响（TRAP 染色）TRAP 是 OC 特异性的标志酶，TRAP 染色是鉴定 OC 分化成熟的金标准果观察到三个或以上细胞核，同时 TRAP 呈现阳性（酒红色）的细胞便可为是破骨细胞。通过该实验观察不同浓度的 QGKS 对 RAW264.7 细胞向 分化的影响可以发现，阴性组没有 OC 的产生，对照组可观察到许多体积、呈酒红色、内含多个细胞核的破骨细胞，其他三组加入相应浓度的强骨方水煎液干预后，其破骨细胞数量明显减少，尤其是成熟的破骨细胞，同
注：相同时间下，药物组与阴性组相比较*P＜0.05。K-8 检测强骨康疏方提取物对 RAW264.7 细胞增殖的影响（ ± s，nect of QGKS decoction was measured by CCK-8 on the proliferation of Rcells ( ± s，n=3)疏方提取物对 OC 分化过程中 TRAP 酶活性的影响示，与阴性组相比，对照组酶活性显著升高（P＜0.05）。用0μg/ml、200μg/ml 的药物组干预后，与对照组比较，强骨康降低，以 100μg/ml 组更加显著（P＜0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]宣痹汤治疗类风湿关节炎湿热瘀阻证的临床研究[J]. 马梦洋,展俊平,孟庆良,孟婉婷,谷慧敏,王慧莲,左瑞庭,马俊福,苗喜云,范围. 中国处方药. 2019(03)
[2]类风湿关节炎患者躯体功能受限影响因素研究[J]. 孙垚,高蕾,潘丽,李亚芳,曾洁,金蕾,阚燕,史宝欣. 现代预防医学. 2019(05)
[3]手术治疗晚期类风湿性关节炎前足畸形近期疗效观察[J]. 胡东,赵宏谋,杨杰,李毅,梁晓军,王军虎. 实用骨科杂志. 2019(01)
[4]艾拉莫德对类风湿关节炎外周血破骨细胞分化及破骨细胞相关基因表达的影响[J]. 冯佳,龚书识,夏燕,田瑞,杨年安,赵小丹,蔡德慧,向阳,袁林. 中国骨质疏松杂志. 2019(01)
[5]复方大黄散对类风湿关节炎NF-κB受体活化因子配体、骨保护素的影响[J]. 康勤龙,荣晓凤. 现代中西医结合杂志. 2019(01)
[6]吡非尼酮联合糖皮质激素治疗类风湿关节炎合并肺间质纤维化的效果及对血清KL-6、ACPA的影响[J]. 杨金良,郑学军,赵亚君,王晓霞,王建芳,韩宝华. 广东医学. 2018(23)
[7]兰州市城关区类风湿关节炎的现况研究[J]. 慕婷婷,杜小正,亢永良,牛菊红,陈雪莲. 甘肃科学学报. 2018(06)
[8]原发性骨质疏松症的破骨细胞靶向治疗进展[J]. 张坛,钱宇. 中华骨与关节外科杂志. 2018(10)
[9]护骨胶囊对类风湿关节炎患者骨破坏的影响[J]. 朱俊. 河南医学高等专科学校学报. 2018(03)
[10]RANKL-RANK-OPG信号通路对类风湿关节炎骨破坏作用的研究进展[J]. 杨敏,洪梦琴,范星宇. 医学与哲学（B）. 2018(04)
博士论文
[1]强直性脊柱炎致病相关基因的筛选及RUNX1参与破骨细胞分化的可能机制[D]. 徐仲阳.山东大学 2018
[2]单体C反应蛋白调节破骨细胞分化的机制研究[D]. 贾哲坤.兰州大学 2018
硕士论文
[1]强骨康疏方治疗绝经后骨质疏松症的临床观察[D]. 谭珂.湖北民族学院 2018
[2]MMP-3/TIMP-1与Th17/Treg在类风湿关节炎患者血清中的表达及临床意义[D]. 崔静.山西医科大学 2018
[3]补肾活血法对去卵巢大鼠骨组织中TGF-β1、Smad2、Smad4信号传导通路的研究[D]. 赵小丹.湖北民族学院 2014
[4]补肾化瘀法对去卵巢骨质疏松症模型大鼠骨生化代谢影响的机制探讨[D]. 刘冬梅.湖北民族学院 2012
[5]路志正调理脾胃治疗风湿病学术思想传承及临床应用研究[D]. 姜泉.中国中医科学院 2012
本文编号：3289687
【文章来源】：湖北民族大学湖北省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度RANKL对RAW264.7细胞向OC分化的影响（未行TRAP染色）
：图 A 为阴性组，图 B 为诱导剂 RANKL（20ng/ml）浓度组，图 C 为诱导剂 RAN（50ng/ml）浓度组, 图 D 为诱导剂 RANKL（150ng/ml）浓度组。图 2-2：不同浓度 RANKL 对 RAW264.7 细胞向 OC 分化的影响（TRAP 染色）g2-2：Effects of different concentrations of RANKLon differentiation of RAW264.7 cellsOC.（TRAP staining）2 强骨康疏方提取物对 OC 分化过程的影响（TRAP 染色）TRAP 是 OC 特异性的标志酶，TRAP 染色是鉴定 OC 分化成熟的金标准果观察到三个或以上细胞核，同时 TRAP 呈现阳性（酒红色）的细胞便可为是破骨细胞。通过该实验观察不同浓度的 QGKS 对 RAW264.7 细胞向 分化的影响可以发现，阴性组没有 OC 的产生，对照组可观察到许多体积、呈酒红色、内含多个细胞核的破骨细胞，其他三组加入相应浓度的强骨方水煎液干预后，其破骨细胞数量明显减少，尤其是成熟的破骨细胞，同
注：相同时间下，药物组与阴性组相比较*P＜0.05。K-8 检测强骨康疏方提取物对 RAW264.7 细胞增殖的影响（ ± s，nect of QGKS decoction was measured by CCK-8 on the proliferation of Rcells ( ± s，n=3)疏方提取物对 OC 分化过程中 TRAP 酶活性的影响示，与阴性组相比，对照组酶活性显著升高（P＜0.05）。用0μg/ml、200μg/ml 的药物组干预后，与对照组比较，强骨康降低，以 100μg/ml 组更加显著（P＜0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]宣痹汤治疗类风湿关节炎湿热瘀阻证的临床研究[J]. 马梦洋,展俊平,孟庆良,孟婉婷,谷慧敏,王慧莲,左瑞庭,马俊福,苗喜云,范围. 中国处方药. 2019(03)
[2]类风湿关节炎患者躯体功能受限影响因素研究[J]. 孙垚,高蕾,潘丽,李亚芳,曾洁,金蕾,阚燕,史宝欣. 现代预防医学. 2019(05)
[3]手术治疗晚期类风湿性关节炎前足畸形近期疗效观察[J]. 胡东,赵宏谋,杨杰,李毅,梁晓军,王军虎. 实用骨科杂志. 2019(01)
[4]艾拉莫德对类风湿关节炎外周血破骨细胞分化及破骨细胞相关基因表达的影响[J]. 冯佳,龚书识,夏燕,田瑞,杨年安,赵小丹,蔡德慧,向阳,袁林. 中国骨质疏松杂志. 2019(01)
[5]复方大黄散对类风湿关节炎NF-κB受体活化因子配体、骨保护素的影响[J]. 康勤龙,荣晓凤. 现代中西医结合杂志. 2019(01)
[6]吡非尼酮联合糖皮质激素治疗类风湿关节炎合并肺间质纤维化的效果及对血清KL-6、ACPA的影响[J]. 杨金良,郑学军,赵亚君,王晓霞,王建芳,韩宝华. 广东医学. 2018(23)
[7]兰州市城关区类风湿关节炎的现况研究[J]. 慕婷婷,杜小正,亢永良,牛菊红,陈雪莲. 甘肃科学学报. 2018(06)
[8]原发性骨质疏松症的破骨细胞靶向治疗进展[J]. 张坛,钱宇. 中华骨与关节外科杂志. 2018(10)
[9]护骨胶囊对类风湿关节炎患者骨破坏的影响[J]. 朱俊. 河南医学高等专科学校学报. 2018(03)
[10]RANKL-RANK-OPG信号通路对类风湿关节炎骨破坏作用的研究进展[J]. 杨敏,洪梦琴,范星宇. 医学与哲学（B）. 2018(04)
博士论文
[1]强直性脊柱炎致病相关基因的筛选及RUNX1参与破骨细胞分化的可能机制[D]. 徐仲阳.山东大学 2018
[2]单体C反应蛋白调节破骨细胞分化的机制研究[D]. 贾哲坤.兰州大学 2018
硕士论文
[1]强骨康疏方治疗绝经后骨质疏松症的临床观察[D]. 谭珂.湖北民族学院 2018
[2]MMP-3/TIMP-1与Th17/Treg在类风湿关节炎患者血清中的表达及临床意义[D]. 崔静.山西医科大学 2018
[3]补肾活血法对去卵巢大鼠骨组织中TGF-β1、Smad2、Smad4信号传导通路的研究[D]. 赵小丹.湖北民族学院 2014
[4]补肾化瘀法对去卵巢骨质疏松症模型大鼠骨生化代谢影响的机制探讨[D]. 刘冬梅.湖北民族学院 2012
[5]路志正调理脾胃治疗风湿病学术思想传承及临床应用研究[D]. 姜泉.中国中医科学院 2012
本文编号：3289687
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