龙枝配伍促H 22 荷瘤小鼠肿瘤细胞及人肝癌Bel-7402细胞凋亡作用的研究

发布时间：2021-08-20 19:32

　　目的探究尖叶假龙胆与半枝莲配伍对人肝癌细胞Bel-7402及H22荷瘤小鼠肿瘤细胞的促凋亡作用。方法体外实验:体外培养人肝癌细胞Bel-7402,制备尖叶假龙胆、半枝莲及各配伍组含药血清。实验分为空白组、尖提组、半提组、1:1组、2:1组、1:2组及阳性药组:采用MTT法检测各组细胞OD值并计算细胞增殖抑制率;应用流式细胞技术检测各组细胞凋亡率及细胞周期分布。体内实验:建立H22荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、尖提组、半提组、1:1组、2:1组、1:2组、阳性药组及空白对照组:观察各组小鼠一般生存状态,测量瘤重并计算抑瘤率;各组瘤组织包埋切片处理后进行HE染色、TUNEL染色观察肿瘤细胞凋亡情况;通过免疫组化检测肿瘤组织内Bax、Bcl-2,caspase-3表达水平。结果1.体外实验1.1MTT法检测结果显示,与空白组比较,各给药组均能抑制Bel-7402细胞增殖,各中药组中2:1组抑制率最高。1.2流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示,与空白组比较,各给药组均能诱导Bel-7402细胞凋亡,各中药组中2:1组细胞凋亡率最高。1.3流式细胞仪检测细胞周期分布结果显示,与空白组比较,各给药组... 

【文章来源】：黑龙江中医药大学黑龙江省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

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缩略语表
中文摘要
ABSTRACT
引言
文献综述
    1. 现代医学对原发性肝癌的研究进展
        1.1 现代医学对肝癌的认识
        1.2 现代医学对肝癌病因及发病机制的研究
        1.3 现代医学对肝癌的治疗现状
    2. 中医对原发性肝癌的研究进展
        2.1 中医对肝癌的认识
        2.2 病因病机
        2.3 辨证论治
        2.4 中药抗肝癌作用机制的研究进展
    3. 尖叶假龙胆的研究进展
        3.1 尖叶假龙胆的药材研究
        3.2 尖叶假龙胆的化学成分研究
        3.3 尖叶假龙胆抗肝癌作用研究
    4. 半枝莲的研究进展
        4.1 半枝莲的药材研究
        4.2 半枝莲的化学成分研究
        4.3 半枝莲抗肝癌作用研究
实验研究
    体外细胞实验研究
        1. 实验材料
            1.1 仪器设备
            1.2 主要试剂
            1.3 实验动物
            1.4 实验细胞
        2. 实验方法
            2.1 药物制备
            2.2 含药血清制备
            2.3 细胞培养
            2.4 实验分组
            2.5 MTT法检测细胞增殖情况
            2.6 流式细胞仪检测细胞凋亡和周期分布
            2.7 统计学处理
        3. 实验结果
            3.1 MTT法检测结果
            3.2 流式细胞仪检测细胞凋亡结果
            3.3 流式细胞仪检测细胞周期结果
    动物实验研究
        1. 实验材料
            1.1 仪器设备
            1.2 主要试剂
            1.3 实验动物
            1.4 实验细胞
        2. 实验方法
            2.1 H_(22)细胞的培养
            2.2 药物制备
            2.3 荷瘤小鼠模型建立
            2.4 实验分组
            2.5 观察荷瘤小鼠一般生存状态
            2.6 肿瘤抑制率的测定
            2.7 HE染色观察肿瘤组织
            2.8 TUNEL法观察肿瘤细胞凋亡情况
            2.9 免疫组化检测肿瘤组织Bax、 Bcl-2、活化的caspase-3水平
            2.10 统计学处理
        3. 实验结果
            3.1 荷瘤小鼠一般生存状态
            3.2 肿瘤抑制率测定结果
            3.3 HE染色肿瘤组织结果
            3.4 TUNEL染色观察肿瘤组织凋亡情况结果
            3.5 免疫组化检测肿瘤组织Bax、Bcl-2、caspase-3水平结果
讨论
    1. 实验目的和意义
    2. 中药血清药理学
    3. 药物及模型的选择
    4. 指标的选择及结果评价
        4.1 体外细胞实验
        4.2 体内动物实验
结论
参考文献
致谢
发表论文情况
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]中药治疗肝癌机制的研究进展[J]. 贺珊,廖长秀.  中成药. 2017(01)
[2]半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响[J]. 李冀,张睿苏,高彦宇,张铁林,马育轩,芦冲.  中医药信息. 2016(03)
[3]半枝莲醇提物含药血清对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡和周期的影响[J]. 芦冲,张睿苏,高彦宇,马育轩,赵志宏,王琳,李杰明,李冀.  中医药学报. 2016(02)
[4]齐墩果酸诱导人肝癌Bel-7402细胞G2/M期阻滞及凋亡的机制研究[J]. 刘玲,赵建龙,王建刚.  中国中药杂志. 2015(24)
[5]齐墩果酸抗原发性肝癌作用机制的研究[J]. 王悦,吕邵娃,孙爽,李永吉.  哈尔滨商业大学学报(自然科学版). 2014(06)
[6]中国2010年恶性肿瘤发病与死亡[J]. 陈万青,张思维,曾红梅,郑荣寿,邹小农,赵平,吴良有,李光琳,赫捷.  中国肿瘤. 2014(01)
[7]半枝莲对大鼠原发性肝癌组织中ADAM10表达的影响[J]. 康志强,李平,段刚峰.  肿瘤. 2013(10)
[8]熊果酸抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长及凋亡的实验研究[J]. 崔兵兵,程丽芳,侯立静,杨青,刘瑾,牟艳玲,闫雪生,李克明.  中国实验方剂学杂志. 2013(18)
[9]补肾健脾方及其拆方对移植性原发性肝癌小鼠肿瘤生长的影响及差异研究[J]. 钟薏,罗春蕾,张安君,赵喜,周荣耀,刘慧.  中国中西医结合杂志. 2011(02)
[10]补肾健脾中药联合5-FU对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡影响的血清药理学研究[J]. 闵亮.  辽宁中医药大学学报. 2010(08)

博士论文
[1]参桃软肝胶囊抗肝癌作用及其机理初探[D]. 贾建伟.广州中医药大学 2013
[2]中药抗瘤胶囊抗人肝癌细胞的血清药理学研究[D]. 闫智勇.成都中医药大学 2001

硕士论文
[1]尖叶假龙胆化学成分及含量测定研究[D]. 魏茜.北京中医药大学 2014
[2]半枝莲抗肿瘤活性成分的研究[D]. 黄敏.湖北中医学院 2006



本文编号：3354100