14-3-3η介导黄芪甲苷抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制研究

发布时间：2021-08-28 05:03

　　目的:黄芪甲苷（As-IV）是黄芪中的一种小分子的活性三萜皂苷成分,目前,已经证明对许多心血管疾病有保护作用。本实验主要目的是研究As-IV在抗心肌缺氧/复氧损伤中的作用机制,以阐明As-IV对抗心肌缺氧/复氧损伤的保护作用主要是否通过14-3-3η蛋白介导。方法:在本实验中,大鼠H9c2心肌细胞作为实验载体,通过体外心肌细胞缺氧/复氧（A/R）损伤模型模拟体内心肌缺血再灌注（I/R）损伤模型。实验随机分成7组,每组重复4次:（1）正常组（control组）;（2）A/R组;（3）25μM AS-IV+A/R组;（4）50μM AS-IV+A/R组;（5）100μM AS-IV+A/R组;（6）50μM As-IV+AD14-3-3ηRNAi+A/R组;（7）50μM As-IV+ADscrRNAi+A/R组。MTS法检测细胞存活率;分光光度法检测LDH活性;蛋白免疫印迹法（western blotting）检测14-3-3η蛋白的表达;JC-1检测细胞线粒体膜电位（Δψm）;DCFH-DA法检测心肌细胞内ROS水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。结果:1.与A... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
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第1章 引言
第2章 材料与方法
    2.1 实验细胞
    2.2 主要材料和试剂
    2.3 主要仪器和设备
    2.4 实验方法
        2.4.1 培养H9c2心肌细胞
        2.4.2 心肌缺氧/复氧（A/R）损伤模型的构建
        2.4.3 MTS法检测H9c2心肌细胞存活率
        2.4.4 分光光度法检测乳酸脱氢酶（LDH）的活性
        2.4.5 蛋白免疫印迹法 (Western blotting)检测 1433η 蛋白的表达
        2.4.6 DCFH-DA法检测H9c2心肌细胞内ROS的含量
        2.4.7 JC-1 检测H9c2心肌细胞线粒体膜电位(△Ψm)
        2.4.8 Annexin V-FITC/PI双染法检测H9c2心肌细胞凋亡
        2.4.9 数据处理
第3章 实验结果
    3.1 AS-IV等中药单体预处理对 1433η 蛋白表达的影响
    3.2 AS-IV最佳浓度的确定
        3.2.1 不同剂量的AS-IV组预处理对细胞存活率的影响
        3.2.2 不同剂量的AS-IV组预处理对LDH活性的影响
    3.3 AS-IV预处理对细胞存活率和LDH活性的影响
    3.4 AS-IV预处理对 1433η 蛋白表达的影响
    3.5 AS-IV预处理对ROS生成的影响
    3.6 AS-IV预处理对细胞线粒体膜电位（△Ψm）的影响
    3.7 AS-IV预处理对细胞凋亡的影响
第4章 讨论
第5章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
致谢
参考文献
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]Astragaloside IV prevents lipopolysaccharide-induced injury in H9C2 cardiomyocytes[J]. WANG Shi-Guang,XU Yan,XIE Hao,WANG Wei,CHEN Xiao-Hu.  Chinese Journal of Natural Medicines. 2015(02)
[2]14-3-3参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径研究（英文）[J]. 潘伟男,李峰,毛小环,秦旭平,邓水秀,封芬,陈锋,李兰芳,廖端芳,陈临溪.  生物化学与生物物理进展. 2011(12)
[3]Astragaloside IV Regulates Expression of ATP-sensitive Potassium Channel Subunits after Ischemia-reperfusion in Rat Ventricular Cardiomyocytes[J]. 韩向晖,刘萍,章怡祎,张娜,陈富荣,蔡珏峰.  Journal of Traditional Chinese Medicine. 2011(04)

硕士论文
[1]黄芪甲苷抗心肌细胞缺氧复氧损伤的保护机制研究[D]. 许旻.南昌大学 2013



本文编号：3367851