隐孔酸E抗甲型流感病毒活性及其作用机制初步探究

发布时间：2021-09-01 18:14

　　目的:流感病毒感染至今仍是世界性公共卫生难题,随着耐药毒株的不断出现,抗流感病毒药物的效果变得较为有限。因此,探寻新型药物、尤其是在不同于现有药物作用位点发挥作用的抗流感病毒药物变得尤为重要。前期有研究结果表明,隐孔菌（Cryptoporus volvatus）提取物能在体外和体内有效地抑制流感病毒的复制,但其中发挥主要作用的活性成分尚未证实。为阐明隐孔菌中具有抗流感病毒活性的有效成分,本课题对隐孔菌进行了系统的化学成分分析,并对隐孔菌90%乙醇提取物中八种较为主要的单体化合物进行活性筛选。此外,初步探究了隐孔酸E抑制甲型流感病毒在MDCK细胞中复制的作用机制,为后续开发隐孔菌用于治疗甲型流感病毒感染提供数据支持。方法:通过病毒滴度测定实验,计算隐孔菌中8种化合物抑制甲型流感病毒活性的IC50,筛选到具有较强抗流感病毒活性的化合物隐孔酸E（Cryptoporic acid E,CAE）进行研究。通过MTT法测定化合物对于流感病毒宿主细胞增殖活力的影响,选取抗流感病毒活性较好且不影响宿主细胞增殖活力的化合物浓度用于后续研究。通过测定在不同MOI时,隐孔酸E对流感病毒生长曲线的影响,进一步... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
引言
第一部分 确定隐孔菌乙醇提取物中具有抗流感病毒作用的活性成分
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 实验方法
    2 实验结果
        2.1 隐孔菌乙醇提取物中八种化合物抗流感病毒活性的测定
        2.2 CAE的化学结构及其纯度测定
        2.3 CAE对MDCK细胞增殖的抑制作用
        2.4 CAE对流感病毒(H1N1/pdm09毒株)复制曲线的抑制作用
    3 讨论
第二部分 隐孔酸E对A型流感病毒不同类别毒株的抑制作用
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 实验方法
    2 实验结果
        2.1 CAE对H1N1/pdm09毒株的抑制作用
        2.2 CAE对WSN (H1N1)毒株的抑制作用
        2.3 CAE对PR8 (H1N1)毒株的抑制作用
        2.4 CAE对A/Beijing/2007 (H3N2)毒株的抑制作用
    3 讨论
第三部分 隐孔酸E抑制A型流感病毒复制的作用机制
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 实验方法
    2 实验结果
        2.1 用CAE预处理MDCK细胞对其抗病毒作用的影响
        2.2 用CAE预处理H1N1/pdm09毒株对其毒力的影响
        2.3 CAE对流感病毒生命周期的不同阶段的抑制作用
        2.4 CAE对病毒vRNA合成的抑制作用
        2.5 CAE对病毒mRNA合成的抑制作用
        2.6 CAE对病毒cRNA合成的抑制作用
        2.7 CAE对病毒核糖核蛋白复合物(vRNP)活性的抑制作用
        2.8 CAE对流感病毒vRNP核转位的影响
    3 讨论
参考文献
综述 抗流感病毒天然产物研究进展
    参考文献
致谢
作者简介及发表文章


【参考文献】：
期刊论文
[1]云南民族民间医药研究的新进展[J]. 马伟光,陈春燕.  云南中医学院学报. 1993(01)

硕士论文
[1]隐孔菌对哮喘豚鼠气道收缩、嗜酸粒细胞释放和趋化的影响[D]. 赵晓燕.浙江大学 2003



本文编号：3377450