红花油体表达的Oleosin-hEGF在皮肤创伤修复中的药效学研究

发布时间：2021-10-13 12:08

　　人表皮生长因子（human Epidermal growth factor,hEGF）被广泛应用于皮肤创伤修复。然而,其稳定性差、透皮吸收效果不佳等缺点严重限制了其在临床中的应用。因此该课题针对hEGF的临床应用限制,将hEGF基因与油体蛋白基因oleosin相融合,构建了pOTB-oleosin-hEGF表达载体,且在红花种子中表达oleosin-hEGF融合蛋白。Oleosin-hEGF融合蛋白的表达可以克服天然hEGF的不足,使其能够在体外稳定储存,为后续更好的开发利用hEGF奠定了基础。T3代转基因红花种子播种后,待长出4-6片新鲜嫩叶,采摘新鲜叶片0.2g,对其基因组进行PCR检测;待红花种子成熟后,从种子中提取目的蛋白。利用SDS-PAGE和Western blot来鉴定转基因红花种子中是否能成功表达出目的蛋白oleosin-hEGF,通过Quantity One软件对各株系表达的oleosin-hEGF蛋白进行半定量分析。随后制备小鼠在体透皮吸收实验模型,通过病理切片和蛋白免疫杂交实验来评估oleosin-hEGF融合蛋白的透皮吸收效果。利用MTT法检测oleosin-h... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
前言
第一篇 文献综述
    第一章 表皮生长因子(EGF)的研究进展
        1.1 EGF简介
        1.2 EGF的基因构成
        1.3 EGF的产生
        1.4 EGF的作用机制
        1.5 EGF生物学功能
        1.6 EGF在临床中的作用
    第二章 油体反应器的研究进展
        2.1 油体概述
        2.2 油体生物反应器的特点
        2.3 油体反应器的研究进展
第二篇 研究内容
    第一章 转hEGF红花的筛选及鉴定
        引言
        1.1 实验材料和试剂
        1.2 实验方法
        1.3 结果与分析
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 oleosin-hEGF对 NIH/3T3 细胞的促增殖活性分析
        引言
        2.1 材料与试剂
        2.2 实验方法
        2.3 结果与分析
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第三章 红花油体表达的oleosin-hEGF透皮吸收考察
        引言
        3.1 材料与试剂
        3.2 实验方法
        3.3 结果与分析
        3.4 讨论
        3.5 小结
    第四章 红花油体表达的oleosin-hEGF促大鼠皮肤创伤修复的药效学研究
        引言
        4.1 材料与试剂
        4.2 实验方法
        4.3 结果与分析
        4.4 讨论
        4.5 小结
    第五章 Oleosin-hEGF对皮肤创伤修复过程中内源性TGF-β_1、bFGF、VEGF的影响
        引言
        5.1 材料与试剂
        5.2 实验方法
        5.3 结果与分析
        5.4 讨论
        5.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Therapeutic resistance in cancer: microRNA regulation of EGFR signaling networks[J]. German G.Gomez,Jill Wykosky,Ciro Zanca,Frank B.Furnari,Webster K.Cavenee.  Cancer Biology & Medicine. 2013(04)
[2]以油体作为生物反应器的研究进展[J]. 赵传志,卢金东,苏磊,毕玉平,王兴军.  生物技术通报. 2008(02)
[3]VEGF、bFGF和TGF-β1在大鼠马兜铃酸肾损伤中的表达[J]. 黄雯,陈薇.  首都医科大学学报. 2006(05)
[4]中性粒细胞在组织修复中的作用[J]. 陈晓红,程天民.  中国药理学通报. 2001(04)



本文编号：3434632