僵蚕药材与饮片的DNA分子鉴定及蛋白质分析
发布时间：2021-10-17 10:49
僵蚕是蚕蛾科昆虫家蚕（Bombyx mori Linnaeus）于45龄的幼虫感染或者人工接种白僵菌Beauveria bassiana（Bals.）Vuillant而致死的干燥体,具有息风止痉、祛风止痛和化痰散结等功效,临床被用于治疗肝风夹痰,惊痫抽搐,小儿急惊和破伤风等。由于僵蚕的使用量较大,市面上出现了一些伪品或掺伪品,例如将绿僵菌感染致死的家蚕、黑死蚕等冒充正品使用,对僵蚕质量造成了不良影响,也给消费者带来了不可忽视的安全隐患。本论文研究建立了一种快速、可靠的检测技术以进行僵蚕的真伪鉴别;此外,通过考察生僵蚕与麸炒僵蚕的蛋白质含量、SDS-PAGE蛋白质条带以及2-DE蛋白质斑点,揭示僵蚕炮制前后蛋白质的变化。本研究可为僵蚕药材及饮片的质量控制供科学依据和技术手段,有助于保障僵蚕临床用药的安全性和有效性;同时,可为动物药的专属性鉴定研究开辟一条新的途径,并为从生物大分子的化学变化角度深入研究麸炒僵蚕的炮制机理奠定基础。本论文研究内容主要包括:1.在Gen Bank数据库中搜索和下载家蚕、白僵菌及绿僵菌的全基因组序列,根据DNAMAN软件比对它们的基因差异,...
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
僵蚕的制备及其炮制过程
分类命名：Beauveria bassiana（BB），真菌界、子囊菌门、盘菌亚门、粪壳菌纲、肉座菌目、虫草菌科、白僵菌属。金龟子绿僵菌，购自中国农业微生物菌种保藏管理中心；地址：北京市中关村南大街 12 号；保藏日期：2016 年 2 月；保藏编号：BNCC226448；分类命名：Metarhizium anisopliae（MA），真菌界、子囊菌门、盘菌亚门、粪壳菌纲、肉座菌目、麦角菌科、绿僵菌属。家蚕对照药材（BM），购自中国药品生物制品检定所；地址：北京市大兴区生物医药产业基地华佗路29号院（东区）或31号院（西区）；批号：121457-200501；规格：1 g。10 批自制僵蚕药材 SR1~SR10（图 2.1a）、自制僵蚕生品 SP1~SP10以及自制僵蚕炮制品 SH1~SH10是根据《中国药典》（2015 版一部）的规定进行接种以及后续的加工；14 批自制僵蚕伪品（F1~F14），其中 F1~F10是将白僵菌更换为绿僵菌进行接种以及后续的加工（图 2.1b），F11~F14为黑死蚕（F11~F14）。
江 苏 大 学 硕 士 学 位 论 文U869769.1、NC_010652.2）以及绿僵菌（AY884128.1、NC_008068.1）的全组序列，并采用 DNAMAN 软件比对家蚕、白僵菌和绿僵菌的基因差异，继 Oligo 7 软件设计特异性引物（设计流程如图 2.2），引物由生工生物工程（）股份有限公司合成。
【参考文献】：
期刊论文
[1]僵蚕七种化学成分抗肿瘤活性的初步研究[J]. 程杏安,蒋旭红,刘展眉,黄素青,周静韵. 仲恺农业工程学院学报. 2015(04)
[2]DNA条形码技术在海洋贝类鉴定中的实践:以大亚湾生态监控区为例[J]. 李海涛,张保学,高阳,时小军,周鹏. 生物多样性. 2015(03)
[3]僵蚕的化学成分及药理活性研究[J]. 李晶峰,孙佳明,张辉. 吉林中医药. 2015(02)
[4]白僵蚕化学成分及应用研究进展[J]. 武汗青. 河南农业. 2015(03)
[5]僵蚕化学成分和药理活性的研究进展[J]. 徐冲,商思阳,刘梅,杨敏. 中国药房. 2014(39)
[6]基于差异蛋白质鉴别僵蚕及其新型伪品[J]. 邱乙,汪云伟,程元柳,吴纯洁,万德光,国锦琳. 吉林中医药. 2014(10)
[7]中药材蜈蚣及其混伪品DNA条形码鉴别研究[J]. 张红印,陈俊,贾静,刘冬,石林春,张辉,宋经元,姚辉. 中国中药杂志. 2014(12)
[8]名贵动物药材穿山甲的DNA条形码分子鉴定研究[J]. 贾静,张红印,陈俊,刘冬,姚辉,钱齐妮,张辉. 中国中药杂志. 2014(12)
[9]僵蚕氯仿部位的分离纯化及其抗惊厥活性[J]. 郭晓恒,吴用彦,宋登敏,严铸云,刘涛. 中国医药工业杂志. 2014(05)
[10]超声波辅助提取桑叶蛋白加工工艺[J]. 王芳,乔璐,张庆庆,高瑜珑. 山西农业科学. 2014(02)
硕士论文
[1]应用基因芯片技术鉴别检测动物源性成分[D]. 石丰运.甘肃农业大学 2010
[2]基于形态学和分子生物学资料探讨中国沿海10种虾虎鱼类的系统发育关系[D]. 孙希福.中国海洋大学 2009
[3]僵蚕的生药学及药理活性研究[D]. 黄晓雪.吉林农业大学 2008
[4]僵蚕抗凝活性部位的定量研究[D]. 赵建国.湖南中医药大学 2005
本文编号：3441633
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
僵蚕的制备及其炮制过程
分类命名：Beauveria bassiana（BB），真菌界、子囊菌门、盘菌亚门、粪壳菌纲、肉座菌目、虫草菌科、白僵菌属。金龟子绿僵菌，购自中国农业微生物菌种保藏管理中心；地址：北京市中关村南大街 12 号；保藏日期：2016 年 2 月；保藏编号：BNCC226448；分类命名：Metarhizium anisopliae（MA），真菌界、子囊菌门、盘菌亚门、粪壳菌纲、肉座菌目、麦角菌科、绿僵菌属。家蚕对照药材（BM），购自中国药品生物制品检定所；地址：北京市大兴区生物医药产业基地华佗路29号院（东区）或31号院（西区）；批号：121457-200501；规格：1 g。10 批自制僵蚕药材 SR1~SR10（图 2.1a）、自制僵蚕生品 SP1~SP10以及自制僵蚕炮制品 SH1~SH10是根据《中国药典》（2015 版一部）的规定进行接种以及后续的加工；14 批自制僵蚕伪品（F1~F14），其中 F1~F10是将白僵菌更换为绿僵菌进行接种以及后续的加工（图 2.1b），F11~F14为黑死蚕（F11~F14）。
江 苏 大 学 硕 士 学 位 论 文U869769.1、NC_010652.2）以及绿僵菌（AY884128.1、NC_008068.1）的全组序列，并采用 DNAMAN 软件比对家蚕、白僵菌和绿僵菌的基因差异，继 Oligo 7 软件设计特异性引物（设计流程如图 2.2），引物由生工生物工程（）股份有限公司合成。
【参考文献】：
期刊论文
[1]僵蚕七种化学成分抗肿瘤活性的初步研究[J]. 程杏安,蒋旭红,刘展眉,黄素青,周静韵. 仲恺农业工程学院学报. 2015(04)
[2]DNA条形码技术在海洋贝类鉴定中的实践:以大亚湾生态监控区为例[J]. 李海涛,张保学,高阳,时小军,周鹏. 生物多样性. 2015(03)
[3]僵蚕的化学成分及药理活性研究[J]. 李晶峰,孙佳明,张辉. 吉林中医药. 2015(02)
[4]白僵蚕化学成分及应用研究进展[J]. 武汗青. 河南农业. 2015(03)
[5]僵蚕化学成分和药理活性的研究进展[J]. 徐冲,商思阳,刘梅,杨敏. 中国药房. 2014(39)
[6]基于差异蛋白质鉴别僵蚕及其新型伪品[J]. 邱乙,汪云伟,程元柳,吴纯洁,万德光,国锦琳. 吉林中医药. 2014(10)
[7]中药材蜈蚣及其混伪品DNA条形码鉴别研究[J]. 张红印,陈俊,贾静,刘冬,石林春,张辉,宋经元,姚辉. 中国中药杂志. 2014(12)
[8]名贵动物药材穿山甲的DNA条形码分子鉴定研究[J]. 贾静,张红印,陈俊,刘冬,姚辉,钱齐妮,张辉. 中国中药杂志. 2014(12)
[9]僵蚕氯仿部位的分离纯化及其抗惊厥活性[J]. 郭晓恒,吴用彦,宋登敏,严铸云,刘涛. 中国医药工业杂志. 2014(05)
[10]超声波辅助提取桑叶蛋白加工工艺[J]. 王芳,乔璐,张庆庆,高瑜珑. 山西农业科学. 2014(02)
硕士论文
[1]应用基因芯片技术鉴别检测动物源性成分[D]. 石丰运.甘肃农业大学 2010
[2]基于形态学和分子生物学资料探讨中国沿海10种虾虎鱼类的系统发育关系[D]. 孙希福.中国海洋大学 2009
[3]僵蚕的生药学及药理活性研究[D]. 黄晓雪.吉林农业大学 2008
[4]僵蚕抗凝活性部位的定量研究[D]. 赵建国.湖南中医药大学 2005
本文编号：3441633
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