夏枯草果实的成分分析及其抗炎抗氧化活性研究
发布时间：2021-10-30 19:50
目的:夏枯草为唇形科植物夏枯草（Prunella vulgaris L.）的干燥果穗,味苦、辛,性寒,归肝胆经,具有散结消肿、清肝明目的功效,现代研究表明其具有降糖、降压、抗菌消炎、免疫抑制、清除自由基及抗氧化、抗肿瘤、抑制病毒生长等多种药理活性,对多种疾病均有良好的临床治疗效果。目前,对夏枯草的研究主要是对果穗及其黄酮、酚酸类为主的小分子物质进行药理研究,对夏枯草果实部位以及果实挥发油等大分子物质的研究甚少,造成夏枯草资源严重浪费。本文以夏枯草果实为原料,对其小极性部位挥发油与极性部位甲醇提取物的成分表征进行较系统的研究,并就其抗炎抗氧化活性进行初步探讨,为进一步认识夏枯草奠定基础,为新药研发与中药材全方位开发利用拓宽思路。方法:1.利用GC-MS与HPLC法分析30批果实成分,采用“中药色谱指纹图谱计算机相似性评价系统”软件进行模式分析及相似度计算,对共有特征峰成分进行检识,使用主成分分析比较不同产地夏枯草果实之间的差异。2.药物干预脂多糖(LPS,0.1μg?mL-1)建立细胞炎症模型,利用噻唑蓝（MTT）比色法考察不同浓度的药物对RAW264.7细胞增殖的...
【文章来源】：湖南中医药大学湖南省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语表
引言
第一章 夏枯草果实挥发油GC-MS指纹图谱
1 试验材料与仪器
1.1 药材
1.2 试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 挥发油的提取
2.1.1 药材前处理
2.1.2 提取方法
2.2 甲酯化前处理
2.3 GC-MS分析条件
2.4 GC-MS数据采集
2.5 方法学
2.5.1 稳定性试验
2.5.2 重复性试验
2.5.3 精密度试验
3 结果与分析
3.1 唇形科12种不同植物果实挥发油成分分析
3.2 夏枯草果实挥发油GC-MS指纹图谱分析
3.2.1 样品分析
3.2.2 共有峰的认定
3.2.3 相似度评价
3.2.4 主成分分析
3.2.5 正交偏最小二乘-判别分析
3.2.6 差异标记物的筛选以及鉴定
4 小结与讨论
第二章 夏枯草果实甲醇提取物的HPLC指纹图谱与活性成分含量测定
1 试验材料与仪器
1.1 药材
1.2 试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 对照品溶液的制备
2.2 供试溶液的制备
2.3 色谱条件
2.4 方法学考察
2.4.1 精密度试验
2.4.2 重复性试验
2.4.3 稳定性试验
2.4.4 线性范围
2.4.5 加样回收试验
2.5 多元统计分析
3 结果与分析
3.1 HPLC指纹图谱分析
3.1.1 共有峰的确定与指认
3.1.2 相似度评价
3.1.3 主成分分析
3.1.4 正交偏最小二乘-判别分析
3.1.5 差异标记物的筛选以及鉴定
3.2 夏枯草果实甲醇提取物活性成分HPLC含量测定
4 小结与讨论
第三章 夏枯草果实的抗氧化、抗炎作用
1 试验仪器与材料
1.1 原料
1.2 试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 抗氧化能力测定
2.1.1 ABTS法
2.1.2 DPPH法
2.1.3 FRAP法
2.2 抗炎活性测定
2.2.1 细胞培养
2.2.2 LPS刺激浓度选择
2.2.3 细胞毒实验
2.2.4 炎症因子IL-6、TNF-α、NO含量检测
2.3 统计学分析
3 结果与分析
3.1 抗氧化能力测定结果
3.1.1 不同浓度PSV、PSM对 ABTS·~+自由基清除能力
3.1.2 不同浓度PSV、PSM对 DPPH自由基清除能力
3.1.3 FRAP法测定不同浓度PSV、PSM抗氧化能力
3.2 抗炎作用
3.2.1 LPS刺激浓度的选择
3.2.2 MTT法测定PSV对 LPS诱导的RAW264.7 细胞活性影响
3.2.3 PSV、PSM对 LPS诱导RAW264.7 细胞分泌TNF-α、IL-6及NO的影响
4 小结与讨论
总结
参考文献
综述
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]紫苏药理作用及其化学物质基础研究进展[J]. 何育佩,郝二伟,谢金玲,韦玮,秦健峰,侯小涛,邓家刚. 中草药. 2018(16)
[2]中药挥发油传统功效与现代研究进展[J]. 王雅琪,杨园珍,伍振峰,熊耀坤,杨明. 中草药. 2018(02)
[3]天然产物活性成分提取分离研究进展[J]. 章怀云,刘俊,毛绍名,孙汉洲. 经济林研究. 2017(03)
[4]中药挥发油提取技术研究概况[J]. 李欧,金尧,蔡小燕,王艺淞. 中兽医医药杂志. 2017(02)
[5]野生与栽培夏枯草HPLC指纹图谱研究及模式识别分析[J]. 皮胜玲,胡玉珍,彭曦,李亚梅,林丽美,夏伯候,吴萍. 中国药学杂志. 2017(05)
[6]当归挥发油对高血脂小鼠动脉粥样硬化的保护作用[J]. 吴国泰,刘五州,牛亭惠,杜丽东,王瑞琼,任远,郭玫. 中药材. 2016(09)
[7]生物测定法用于中药质量评价的探索研究——以夏枯草抗氧化活性与总酚酸含量相关性的研究为例[J]. 冯伟红,李春,信伟梅,林丽美,夏伯候,荣立新,杨立新,易红,张永欣,陈两绵,王智民. 中国中药杂志. 2016(14)
[8]中药指纹图谱技术在中国药典2015年版一部中的应用[J]. 祝明,陈碧莲,石上梅. 中国现代应用药学. 2016(05)
[9]超临界CO2萃取法与水蒸气蒸馏法提取垂丝海棠叶挥发油成分及其抗氧化活性的比较[J]. 卫强,李前荣,尹浩,纪小影,徐飞. 中成药. 2015(11)
[10]滁菊挥发油的成分分析及其在卷烟中的应用[J]. 徐秀娟,王甜,何保江,李国栋,秦广雍,屈展,胡军,卓浩廉. 天然产物研究与开发. 2015(09)
硕士论文
[1]GC-MS法对石菖蒲挥发油的质量分析及β-细辛醚、α-细辛醚的药动学研究[D]. 李晶.黑龙江中医药大学 2014
[2]甜杏仁油挥发性成分的分析及其在油脂品质分析中的应用[D]. 康晶晶.中南林业科技大学 2013
[3]八角茴香油化学成分、香气性能及活性研究[D]. 郭向阳.浙江工业大学 2013
[4]中药挥发油绿色提取技术的研究[D]. 曹明宇.河北科技大学 2011
本文编号：3467325
【文章来源】：湖南中医药大学湖南省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语表
引言
第一章 夏枯草果实挥发油GC-MS指纹图谱
1 试验材料与仪器
1.1 药材
1.2 试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 挥发油的提取
2.1.1 药材前处理
2.1.2 提取方法
2.2 甲酯化前处理
2.3 GC-MS分析条件
2.4 GC-MS数据采集
2.5 方法学
2.5.1 稳定性试验
2.5.2 重复性试验
2.5.3 精密度试验
3 结果与分析
3.1 唇形科12种不同植物果实挥发油成分分析
3.2 夏枯草果实挥发油GC-MS指纹图谱分析
3.2.1 样品分析
3.2.2 共有峰的认定
3.2.3 相似度评价
3.2.4 主成分分析
3.2.5 正交偏最小二乘-判别分析
3.2.6 差异标记物的筛选以及鉴定
4 小结与讨论
第二章 夏枯草果实甲醇提取物的HPLC指纹图谱与活性成分含量测定
1 试验材料与仪器
1.1 药材
1.2 试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 对照品溶液的制备
2.2 供试溶液的制备
2.3 色谱条件
2.4 方法学考察
2.4.1 精密度试验
2.4.2 重复性试验
2.4.3 稳定性试验
2.4.4 线性范围
2.4.5 加样回收试验
2.5 多元统计分析
3 结果与分析
3.1 HPLC指纹图谱分析
3.1.1 共有峰的确定与指认
3.1.2 相似度评价
3.1.3 主成分分析
3.1.4 正交偏最小二乘-判别分析
3.1.5 差异标记物的筛选以及鉴定
3.2 夏枯草果实甲醇提取物活性成分HPLC含量测定
4 小结与讨论
第三章 夏枯草果实的抗氧化、抗炎作用
1 试验仪器与材料
1.1 原料
1.2 试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 抗氧化能力测定
2.1.1 ABTS法
2.1.2 DPPH法
2.1.3 FRAP法
2.2 抗炎活性测定
2.2.1 细胞培养
2.2.2 LPS刺激浓度选择
2.2.3 细胞毒实验
2.2.4 炎症因子IL-6、TNF-α、NO含量检测
2.3 统计学分析
3 结果与分析
3.1 抗氧化能力测定结果
3.1.1 不同浓度PSV、PSM对 ABTS·~+自由基清除能力
3.1.2 不同浓度PSV、PSM对 DPPH自由基清除能力
3.1.3 FRAP法测定不同浓度PSV、PSM抗氧化能力
3.2 抗炎作用
3.2.1 LPS刺激浓度的选择
3.2.2 MTT法测定PSV对 LPS诱导的RAW264.7 细胞活性影响
3.2.3 PSV、PSM对 LPS诱导RAW264.7 细胞分泌TNF-α、IL-6及NO的影响
4 小结与讨论
总结
参考文献
综述
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]紫苏药理作用及其化学物质基础研究进展[J]. 何育佩,郝二伟,谢金玲,韦玮,秦健峰,侯小涛,邓家刚. 中草药. 2018(16)
[2]中药挥发油传统功效与现代研究进展[J]. 王雅琪,杨园珍,伍振峰,熊耀坤,杨明. 中草药. 2018(02)
[3]天然产物活性成分提取分离研究进展[J]. 章怀云,刘俊,毛绍名,孙汉洲. 经济林研究. 2017(03)
[4]中药挥发油提取技术研究概况[J]. 李欧,金尧,蔡小燕,王艺淞. 中兽医医药杂志. 2017(02)
[5]野生与栽培夏枯草HPLC指纹图谱研究及模式识别分析[J]. 皮胜玲,胡玉珍,彭曦,李亚梅,林丽美,夏伯候,吴萍. 中国药学杂志. 2017(05)
[6]当归挥发油对高血脂小鼠动脉粥样硬化的保护作用[J]. 吴国泰,刘五州,牛亭惠,杜丽东,王瑞琼,任远,郭玫. 中药材. 2016(09)
[7]生物测定法用于中药质量评价的探索研究——以夏枯草抗氧化活性与总酚酸含量相关性的研究为例[J]. 冯伟红,李春,信伟梅,林丽美,夏伯候,荣立新,杨立新,易红,张永欣,陈两绵,王智民. 中国中药杂志. 2016(14)
[8]中药指纹图谱技术在中国药典2015年版一部中的应用[J]. 祝明,陈碧莲,石上梅. 中国现代应用药学. 2016(05)
[9]超临界CO2萃取法与水蒸气蒸馏法提取垂丝海棠叶挥发油成分及其抗氧化活性的比较[J]. 卫强,李前荣,尹浩,纪小影,徐飞. 中成药. 2015(11)
[10]滁菊挥发油的成分分析及其在卷烟中的应用[J]. 徐秀娟,王甜,何保江,李国栋,秦广雍,屈展,胡军,卓浩廉. 天然产物研究与开发. 2015(09)
硕士论文
[1]GC-MS法对石菖蒲挥发油的质量分析及β-细辛醚、α-细辛醚的药动学研究[D]. 李晶.黑龙江中医药大学 2014
[2]甜杏仁油挥发性成分的分析及其在油脂品质分析中的应用[D]. 康晶晶.中南林业科技大学 2013
[3]八角茴香油化学成分、香气性能及活性研究[D]. 郭向阳.浙江工业大学 2013
[4]中药挥发油绿色提取技术的研究[D]. 曹明宇.河北科技大学 2011
本文编号：3467325
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