6-姜辣素调控巨噬细胞防治肺癌的作用机制研究

发布时间：2021-11-08 23:34

　　近年来,肺癌发病率和死亡率呈逐年上升趋势,已成为严重威胁人类生命健康的癌症第一杀手,急需新的防治措施来改善。药物免疫疗法是本世纪肿瘤治疗领域的重大突破,与直接靶向肿瘤细胞的传统化疗药物相比,其突出的特点是通过重储患者免疫能力消除肿瘤,有低毒高效治疗肿瘤的优势。目前,癌症免疫疗法的手段有激活先天性和继发性免疫。先天免疫是第一道防线,主要负责提呈抗原,也有部分直接清除病原体作用。继发性免疫能够特异性识别抗原,产生强烈的免疫反应,是清除病原体的主要途径,但如果缺乏一线免疫的辅助,其免疫反应难以持久。巨噬细胞作为肿瘤微环境中最丰富的一线免疫细胞,在不同环境下可以极化为两种表型:抗肿瘤M1巨噬细胞和促肿瘤M2巨噬细胞。在肿瘤微环境中,肿瘤浸润性巨噬细胞（TIMs）通常表现为M2型,有刺激肿瘤新生血管形成、诱导免疫细胞凋亡和T细胞向抑制性调节细胞转化作用,有利于肿瘤免疫逃逸、生长和转移。有研究证明,靶向TIMs不仅可以逆转肿瘤免疫抑制微环境独立发挥肿瘤免疫治疗作用,也能增强其他免疫疗法的肿瘤治疗效果,但其免疫治疗强度和特点尚不清楚。中医药是免疫调节剂的重要药物来源,生姜作为药食同源的中药,具有温胃... 

【文章来源】：河南大学河南省

【文章页数】：92 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
ABBREVIATION
第一章 绪论
    1.1 肺癌的现状和研究进展
    1.2 癌症免疫疗法
    1.3 中医药调节免疫抗肿瘤作用研究
第二章 6-姜辣素调控巨噬细胞表型的体外研究
    2.1 前言
    2.2 实验材料
        2.2.1 实验药品与试剂
        2.2.2 实验试剂配制
        2.2.3 实验细胞
        2.2.4 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 腹腔巨噬细胞的分离和纯化
        2.3.2 腹腔巨噬细胞极化
        2.3.3 MTT法检测6-姜辣素对极化的腹腔巨噬细胞增殖能力的影响
        2.3.4 激光全息检测6-姜辣素对极化的腹腔巨噬细胞形态、体积的影响
        2.3.5 中性红和细菌吞噬检测6-姜辣素对极化的腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响
        2.3.6 免疫荧光检测6-姜辣素对极化的腹腔巨噬细胞表型的影响
        2.3.7 数据分析
    2.4 实验结果
        2.4.1 6-姜辣素对极化的腹腔巨噬细胞增殖能力的影响
        2.4.2 6-姜辣素对极化的腹腔巨噬细胞形态、体积的影响
        2.4.3 6-姜辣素对极化的腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响
        2.4.4 6-姜辣素对极化的腹腔巨噬细胞表型的影响
    2.5 实验小结
第三章 6-姜辣素调控巨噬细胞表型防治肺癌的体内研究
    3.1 前言
    3.2 实验材料
        3.2.1 实验药品与试剂
        3.2.2 实验试剂配制
        3.2.3 实验细胞和动物
        3.2.4 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 6-姜辣素对乌拉坦诱导肺癌模型小鼠的影响
        3.3.2 6-姜辣素对Lewis肺癌同种异体移植模型小鼠的影响
        3.3.3 数据分析
    3.4 实验结果
        3.4.1 6-姜辣素对乌拉坦诱导肺癌小鼠的影响
        3.4.2 6-姜辣素对Lewis肺癌同种异体移植模型小鼠的影响
    3.5 实验小结
第四章 6-姜辣素调控巨噬细胞表型防治肺癌的机制研究
    4.1 前言
    4.2 实验材料
        4.2.1 实验药品与试剂
        4.2.2 实验试剂配制
        4.2.3 实验细胞和动物
        4.2.4 实验仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 AO染色和免疫荧光检测6-姜辣素对极化腹腔巨噬细胞自噬的影响
        4.3.2 DCFH-DA检测6-姜辣素对极化腹腔巨噬细胞活性氧ROS的影响
        4.3.3 Mito-Tracker Green检测6-姜辣素对极化腹腔巨噬细胞线粒体功能的影响
        4.3.4 Lyso-Tracker Red检测6-姜辣素对极化腹腔巨噬细胞溶酶体功能的影响
        4.3.5 Western blot检测6-姜辣素对肺癌小鼠肺组织自噬的影响
        4.3.6 免疫荧光检测6-姜辣素对肺癌小鼠清道夫受体和内质网应激的影响
        4.3.7 免疫荧光检测氯屈膦酸钠脂质体(LEC)、精氨酸酶抑制剂(nor-NOHA)和集落刺激因子1 受体(CSF-1R)抑制剂(Pexidartinib)对腹腔及肺组织巨噬细胞表型的影响
        4.3.8 ELISA试剂盒检测腹腔巨噬细胞和肺泡灌洗液上清中相关细胞因子的表达..
        4.3.9 免疫组化和Western blot检测氯屈膦酸钠脂质体(LEC)、精氨酸酶抑制剂(nor-NOHA)、集落刺激因子1 受体(CSF-1R)抑制剂(Pexidartinib)对肿瘤内巨噬细胞、淋巴细胞表型的影响
        4.3.10 网络药理学预测解释6-姜辣素调节巨噬细胞极化的分子机制
        4.3.11 数据分析
    4.4 实验结果
        4.4.1 6-姜辣素对极化腹腔巨噬细胞自噬的影响
        4.4.2 6-姜辣素对极化腹腔巨噬细胞活性氧ROS的影响
        4.4.3 6-姜辣素对极化腹腔巨噬细胞线粒体的影响
        4.4.4 6-姜辣素对极化腹腔巨噬细胞溶酶体的影响
        4.4.5 6-姜辣素对肺癌小鼠肺组织自噬的影响
        4.4.6 6-姜辣素对肺癌小鼠清道夫受体和内质网应激的影响
        4.4.7 腹腔巨噬细胞和肺泡灌洗液上清中相关细胞因子的表达
        4.4.8 氯屈膦酸钠脂质体(LEC)、精氨酸酶抑制剂(nor-NOHA)和集落刺激因子1受体(CSF-1R)抑制剂(Pexidartinib)对腹腔及肺组织巨噬细胞表型的影响
        4.4.9 氯屈膦酸钠脂质体(LEC)、精氨酸酶抑制剂(nor-NOHA)和集落刺激因子1受体(CSF-1R)抑制剂(Pexidartinib)对肿瘤内巨噬细胞、淋巴细胞表型的影响
        4.4.10 6-姜辣素调节巨噬细胞极化的分子机制
    4.5 实验小结
第五章 讨论
第六章 结论
第七章 创新性总结
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]肺瘤平膏对Lewis肺癌小鼠树突状细胞及巨噬细胞的实验研究[J]. 赵元辰,刘瑞,祁鑫,裴迎霞,张芸,花宝金,郑红刚.  北京中医药. 2018(12)
[2]《本草纲目》论姜举要[J]. 曾楚华,袁德培,杨付明,刘哨兵.  时珍国医国药. 2017(09)
[3]艾迪注射液抗肿瘤作用及其对Th1/Th2免疫调节机制探讨[J]. 王明雪,殷杰,张立刚,黄桂林.  广州中医药大学学报. 2017(02)
[4]百里醌调控M2型巨噬细胞表型极化的机制研究[J]. 徐元,谭希,王原来,谢思楠,章丹丹.  中成药. 2016(02)
[5]不同产地生姜主要活性成分的比较分析[J]. 刘琳琪,刘玉环,赵晨曦,王小梅,王丽平,彭霞辉.  天然产物研究与开发. 2015(06)
[6]扶正解毒方对前胃癌荷瘤小鼠术后复发模型肿瘤相关巨噬细胞及相关细胞因子的干预研究[J]. 贾程辉,李枋霏,何莉莎,李杰.  中国中医基础医学杂志. 2014(06)
[7]Role of innate immunity in the development of hepatocellular carcinoma[J]. Rajagopal N Aravalli.  World Journal of Gastroenterology. 2013(43)
[8]肺岩宁方对肺癌小鼠CD4+CD25+调节性T细胞比例及Foxp3表达的影响[J]. 郭净,王菊勇,郑展,王青,董昌盛.  中西医结合学报. 2012(05)



本文编号：3484228