刺山柑免疫抑制成分分离纯化与功能验证
发布时间：2021-11-21 08:07
自身免疫性疾病（autoimmune diseases,AID）是由多种原因使机体对自身抗原产生免疫应答,造成多系统损害,是一种慢性炎症疾病,对人类的健康造成很大危害。刺山柑（Capparis spinosa L.）作为一种传统中草药常用来治疗类风湿性关节炎、痛风等免疫性疾病。树突状细胞（dendritic cell,DC）作为机体内专职的抗原递呈细胞,其成熟状态及分泌细胞因子的类型决定了免疫反应的性质。本研究以刺山柑果实为实验材料,用有机溶剂对刺山柑果实醇提物进行分级分离,再通过阳离子交换树脂与葡聚糖凝胶树脂柱层析进一步纯化,得到刺山柑果实总生物碱粗提物（C.spinosa fruit alkaloids,CSFA）及CSES（C.spinosa fruit ethanol extracts,by Sephadex-LH20）两个组分,检测CSFA及CSES对DC成熟的影响:单独或与细菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）联合使用对DC表达表面分子及细胞因子分泌的影响;与荧光标记的右旋糖苷（FITC-dextran）及DC共孵育后检测DC吞噬抗原的能力;荧光倒置显微...
【文章来源】：新疆大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
刺山柑果实分离纯化
21***P<0.001 compared to Control.###P<0.001 compared to LPS.图 1-2 石油醚部位对 DC 活性及成熟的影响A：DC 活性；B：DC 表面共刺激分子 CD40 的表达水平（n=3）。Fig.1-2 Effects of petroleum ether fraction on DC viability and maturationA, The viability of DC; B, The expression levels of costimulatory molecule CD40 on DC (n=2.1.2 乙酸乙酯萃取部位对 DC 活性及表面分子表达的影响接下来，我们用吹干后的乙酸乙酯层检测其对 DC 活性及表面分子表达的。结果如图 1-3 所示，LPS 及 0.4 mg/mL、0.6 mg/mL 单独使用时显著增加C 表面分子 CD40 的表达，同时乙酸乙酯部位与 LPS 联合使用时对 DC 表面 CD40 的表达无显著影响，因此后续实验我们不选择乙酸乙酯部位进行。
22*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 compared to Control.图 1-3 乙酸乙酯部位对 DC 活性及成熟的影响A：DC 活性；B：DC 表面共刺激分子 CD40 的表达水平（n=3）。Fig.1-3 Effects of ethyl acetate fraction on DC viability and maturationA, The viability of DC; B, The expression levels of costimulatory molecule CD40 on DC (n=2.1.3 萃取后的水部位对 DC 活性及表面分子表达的影响我们检测了萃取后剩余的水层对 DC 活性及表面分子表达是否有影响，用水将水部位冻干粉溶解后，分别单独或与 LPS 联合处理 DC，12 h 后收集细胞光抗体染色后用流式细胞仪分析。结果显示（图 1-4），1 mg/mL、2 mg/ 3mg/mL 水部位对 DC 的活性均无显著影响。与对照组相比，LPS 处理组C 表面分子 CD40 显著上调，不同浓度水部位单独使用时对 DC 表面分子 CD达无显著影响，但是与 LPS 联合使用时均显著抑制了 LPS 诱导的表面分
【参考文献】：
期刊论文
[1]自身免疫性疾病新型自身抗体研究进展[J]. 周鑫昀,陈惠,沈立松. 检验医学. 2017(06)
[2]顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析刺山柑果不同生长时期挥发性成分[J]. 张轩晨,杨伟俊,何江,杨晓君,程波. 食品与发酵科技. 2017(03)
[3]丹参酮ⅡA对树突状细胞表型的影响及对功能的调控[J]. 夏金华,夏建川,谢丽燕,廖传英. 中国免疫学杂志. 2017(03)
[4]萜类化合物的合成生物学研究进展[J]. 孙丽超,李淑英,王凤忠,辛凤姣. 生物技术通报. 2017(01)
[5]罗布麻叶总黄酮对大鼠动脉粥样硬化干预作用[J]. 张洋,冷晓微,李亚娟,刘凯,闫梦彤,任立群. 中国公共卫生. 2016(12)
[6]复方一枝蒿微丸抗炎、免疫及抗菌作用研究[J]. 陈蕾,姜雯,潘晓梅,刘婕妤,邢建国. 新疆医科大学学报. 2016(02)
[7]人参皂苷Rg3对树突状细胞成熟及功能改变的影响[J]. 刘永华,谭树颖,高瑞兰,江锦红,王朋,尹利明,郑智茵,方炳木. 中华全科医学. 2016(02)
[8]胡柚皮黄酮对非酒精性脂肪性肝炎小鼠Th17/Treg平衡的调节作用[J]. 李剑霜,陈芝芸,蒋剑平,何蓓晖. 中国中药杂志. 2015(13)
[9]树突状细胞在自身免疫性疾病中的作用[J]. 宋佳,尹月,王丹,邱春红. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(05)
[10]天然活性异硫氰酸酯类化合物的研究进展[J]. 梁浩,李瑞敏,袁其朋. 北京化工大学学报(自然科学版). 2015(02)
硕士论文
[1]GDF-15对树突状细胞成熟和功能的影响[D]. 周治中.第四军医大学 2013
[2]汉桃叶有机酸类成分研究及软膏剂开发[D]. 胡书平.中央民族大学 2012
本文编号：3509107
【文章来源】：新疆大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
刺山柑果实分离纯化
21***P<0.001 compared to Control.###P<0.001 compared to LPS.图 1-2 石油醚部位对 DC 活性及成熟的影响A：DC 活性；B：DC 表面共刺激分子 CD40 的表达水平（n=3）。Fig.1-2 Effects of petroleum ether fraction on DC viability and maturationA, The viability of DC; B, The expression levels of costimulatory molecule CD40 on DC (n=2.1.2 乙酸乙酯萃取部位对 DC 活性及表面分子表达的影响接下来，我们用吹干后的乙酸乙酯层检测其对 DC 活性及表面分子表达的。结果如图 1-3 所示，LPS 及 0.4 mg/mL、0.6 mg/mL 单独使用时显著增加C 表面分子 CD40 的表达，同时乙酸乙酯部位与 LPS 联合使用时对 DC 表面 CD40 的表达无显著影响，因此后续实验我们不选择乙酸乙酯部位进行。
22*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 compared to Control.图 1-3 乙酸乙酯部位对 DC 活性及成熟的影响A：DC 活性；B：DC 表面共刺激分子 CD40 的表达水平（n=3）。Fig.1-3 Effects of ethyl acetate fraction on DC viability and maturationA, The viability of DC; B, The expression levels of costimulatory molecule CD40 on DC (n=2.1.3 萃取后的水部位对 DC 活性及表面分子表达的影响我们检测了萃取后剩余的水层对 DC 活性及表面分子表达是否有影响，用水将水部位冻干粉溶解后，分别单独或与 LPS 联合处理 DC，12 h 后收集细胞光抗体染色后用流式细胞仪分析。结果显示（图 1-4），1 mg/mL、2 mg/ 3mg/mL 水部位对 DC 的活性均无显著影响。与对照组相比，LPS 处理组C 表面分子 CD40 显著上调，不同浓度水部位单独使用时对 DC 表面分子 CD达无显著影响，但是与 LPS 联合使用时均显著抑制了 LPS 诱导的表面分
【参考文献】：
期刊论文
[1]自身免疫性疾病新型自身抗体研究进展[J]. 周鑫昀,陈惠,沈立松. 检验医学. 2017(06)
[2]顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析刺山柑果不同生长时期挥发性成分[J]. 张轩晨,杨伟俊,何江,杨晓君,程波. 食品与发酵科技. 2017(03)
[3]丹参酮ⅡA对树突状细胞表型的影响及对功能的调控[J]. 夏金华,夏建川,谢丽燕,廖传英. 中国免疫学杂志. 2017(03)
[4]萜类化合物的合成生物学研究进展[J]. 孙丽超,李淑英,王凤忠,辛凤姣. 生物技术通报. 2017(01)
[5]罗布麻叶总黄酮对大鼠动脉粥样硬化干预作用[J]. 张洋,冷晓微,李亚娟,刘凯,闫梦彤,任立群. 中国公共卫生. 2016(12)
[6]复方一枝蒿微丸抗炎、免疫及抗菌作用研究[J]. 陈蕾,姜雯,潘晓梅,刘婕妤,邢建国. 新疆医科大学学报. 2016(02)
[7]人参皂苷Rg3对树突状细胞成熟及功能改变的影响[J]. 刘永华,谭树颖,高瑞兰,江锦红,王朋,尹利明,郑智茵,方炳木. 中华全科医学. 2016(02)
[8]胡柚皮黄酮对非酒精性脂肪性肝炎小鼠Th17/Treg平衡的调节作用[J]. 李剑霜,陈芝芸,蒋剑平,何蓓晖. 中国中药杂志. 2015(13)
[9]树突状细胞在自身免疫性疾病中的作用[J]. 宋佳,尹月,王丹,邱春红. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(05)
[10]天然活性异硫氰酸酯类化合物的研究进展[J]. 梁浩,李瑞敏,袁其朋. 北京化工大学学报(自然科学版). 2015(02)
硕士论文
[1]GDF-15对树突状细胞成熟和功能的影响[D]. 周治中.第四军医大学 2013
[2]汉桃叶有机酸类成分研究及软膏剂开发[D]. 胡书平.中央民族大学 2012
本文编号：3509107
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