雷公藤甲素及其衍生物雷腾舒药物代谢研究
发布时间：2021-11-21 09:34
雷公藤甲素是一个环氧二萜内酯化合物,是中药雷公藤活性成分中最具代表性的化合物,具有强的抗炎、免疫抑制和多种抗肿瘤活性。然而,高毒性限制了它在临床上的直接应用。在对雷公藤甲素进行结构改造的时候,上海药物所李援朝课题组合成了雷腾舒。雷腾舒是雷公藤甲素的（5R）-羟基化衍生物,与雷公藤甲素相比,在大部分保留雷公藤甲素免疫抑制活性的基础上,毒性降低,溶解度提高,有了更好的成药性,临床拟用于类风湿性关节炎的治疗。为了评价雷腾舒药物代谢相关性质,并与雷公藤甲素进行对比,本课题将二者作为结构类似物进行平行研究。1.雷腾舒代谢物鉴定将雷腾舒和人、猴、犬、大鼠和小鼠肝细胞共同孵育,样品经过超高效液相色谱-5600+型四极杆-飞行时间串联质谱仪检测并鉴定代谢产物。结果显示,与失活肝细胞相比,在人、猴、犬、大鼠和小鼠肝细胞孵化样品中共检测到4个代谢产物,分别为氧化开环代谢产物（M1）、谷胱甘肽结合代谢产物（M2）和单氧化并谷胱甘肽结合代谢产物（M3-1和M3-2）。将雷腾舒和人或大鼠肝微粒体共同孵育,在人和大鼠肝微粒体中共鉴定得到7个代谢产物,分别为脱氢代谢产物（M4）,单加氧代谢产物（M5-1M...
【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院上海药物研究所)上海市
【文章页数】：115 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．２雷腾舒对照品溶液的ＵＰＬＣ／Ｑ－ＴＯＦＭＳ分析
２．３．３雷腾舒在大鼠和人肝微粒体中的代谢物??随后将雷腾舒和人或大鼠肝微粒体共同孵育，利用ＭｅｔａｂｏｌｉｔｅＰｉｌｏｔ软件对雷??腾舒的微粒体样品数据进行处理，获得相关的代谢物谱图（图２．５）。与阴性对照??组相比，除原形药物外，人肝微粒体中鉴定得到４种代谢产物，大鼠肝微粒体中??鉴定得到７种代谢产物，其中人肝微粒体中的四种代谢物在大鼠肝微粒体中都有??检测到，说明不存在人肝微粒体特异性的代谢物（表２．２）。??０．０??Ａ．?ＭＱ?４??滿：?－４．０ｅ－２ｊ?，??？?８．０ｅ４?Ｉ?］?（??Ｉ?？?ｉ?，??＞１?６．０ｅ４?＜?－Ｂ．Ｏｅ－２］?）｜??１?１??２．０９４?ｊ??－?Ｍ５－３?Ｍ５－４?Ｕ５－８?Ｍ４?＾?－?．１??Ｏ．ＯｅＯ?????—＾￣＇—？■?????＾—■■■－＂３＾＝１?１???????Ｔｉｍｅ?－１，６ｅ－１１?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿＇?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＞?丨?＿?＿?＿?＿?丨＇丨丨丨丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?Ｔｉｍｓ??５．００?６．００?７．００?８．００?９．００?１０．００?１１．００?５．００?６．００?７．００?８．００?９
３．３．３选择性??实验中，总检测时间为４ｍｉｎ每样品，苄胺雷公藤甲素和苄胺雷腾舒的保留??时间分别为１．６３?ｍｉｎ和１．６６?ｍｉｎ?（图３．２和图３．３）。在节胺雷公藤甲素和爷胺雷??腾舒出峰处，六个不同来源的大鼠空白血浆以及一个溶血血浆中均未检测到内源??性物质的干扰。待测物和内标均没有残留，定量上限（Ｕｐｐｅｒ?ｌｉｍｉｔ?ｏｆ?ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，??ＵＬＯＱ）之后的空白血衆样品未检测至！Ｊ二者的信号。??干扰实验显示，地塞米松（雷公藤甲素和雷腾舒检测的准确度和精密度分别??为９５．８?±?６．９％和９９．３?±?５．６％）、利托那韦（雷公藤甲素和雷腾舒检测的准确度??和精密度分别为９９．８?±?３．０％和１０２?±?７％）和ＡＢＴ?（雷公藤甲素和雷腾舒检测??的准确度和精密度分别为９８．３?±?２．８％和９４．９?±?１．９％）的存在不会影响雷公藤??甲素或者雷腾舒的定量检测。??３．３．４标准曲线和定量下限??雷公藤甲素在０．０３０－１００?ｎｇ／ｍＬ的浓度范围内线性良好。典型线性回归方程??为＞；＝０．４２９?ｘ?＋０．００２２３，?ｒ?＝?０．９９７６，其中代表苄胺雷公藤甲素与苄胺雷腾舒??峰面积的比值，ｘ代表血浆中的苄胺雷公藤甲素浓度。??雷腾舒在０．０３０－１００?ｎｇ／ｍＬ的浓度范围内线性良好。典型线性回归方程为：ｖ??＝?０．１５；ｃ?＋?０．００１６１，ｒ?＝?０．９９９２，其中：ｖ代表苄胺雷腾舒与苄胺雷公藤甲素峰面积??的比值，ｘ代表血浆中的苄胺雷腾舒浓度。??３．３．５准确度和精密度??为了评价方法的准确度和精密度
【参考文献】：
期刊论文
[1](5R)-5-hydroxytriptolide inhibits the inflammatory cascade reaction in astrocytes[J]. Yan-Qiu Cui,Yan Zheng,Gui-Lian Tan,Dong-Mei Zhang,Jun-Ya Wang,Xiao-Min Wang. Neural Regeneration Research. 2019(05)
[2]雷公藤内酯醇对雄性大鼠的生殖毒性及其机制研究[J]. 黄郑隽,阙慧卿,彭华毅,林绥,郭舜民,钱丽萍. 中国中药杂志. 2015(23)
[3]建立人肝微粒体-小鼠3T3成纤维细胞模型评价5-羟基雷公藤内酯醇代谢产物的细胞毒性[J]. 李华,徐佳,刘海燕. 上海医药. 2014(19)
[4]治疗类风湿性关节炎常用药物的研究进展[J]. 池里群,周彬,高文远,刘振. 中国中药杂志. 2014(15)
[5]体外“鸡尾酒法”研究5-羟基雷公藤内酯醇对人肝微粒体CYP450酶亚型的抑制[J]. 刘海燕,张乐多,向志雄,苗红. 中国临床药理学与治疗学. 2013(11)
[6]5-羟基雷公藤内酯醇不是P-糖蛋白底物或抑制剂[J]. 徐佳,向志雄,刘海燕. 上海医药. 2013(13)
[7]雷公藤内酯醇与不同种属血浆蛋白结合率的研究[J]. 刘萍霞,王娟,庄笑梅,张玉杰,张振清,阮金秀. 军事医学. 2012(07)
[8]微生物转化法从雷公藤甲素合成雷腾舒[J]. 赵舜波,黄海华,陈笑艳,李秀立,钟大放. 中国新药杂志. 2012(03)
[9]5R-5-羟基雷公藤内酯醇的晶型制备与表征[J]. 刘瑞丽,杨亚玺,陈东英. 药学学报. 2011(11)
[10]Triptolide prolonged allogeneic islet graft survival in chemically induced and spontaneously diabetic mice without impairment of islet function[J]. Ming-Jun Xin,Shi-Hua Cui,Shuang Liu,Hai-Chen Sun,Fei Li,Jia-Bang Sun and Bin Luo Author Affiliations:Department of General Surgery,Xuanwu Hospital, Capital Medical University,Beijing 100053,China;Department of Hepatobiliary Surgery,Qingdao Municiple Hospital,Qingdao 266011,China;Department of Surgery,Shougang Hospital,Clinical School of Peking University,Beijing 100144,China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2010(03)
本文编号：3509250
【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院上海药物研究所)上海市
【文章页数】：115 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．２雷腾舒对照品溶液的ＵＰＬＣ／Ｑ－ＴＯＦＭＳ分析
２．３．３雷腾舒在大鼠和人肝微粒体中的代谢物??随后将雷腾舒和人或大鼠肝微粒体共同孵育，利用ＭｅｔａｂｏｌｉｔｅＰｉｌｏｔ软件对雷??腾舒的微粒体样品数据进行处理，获得相关的代谢物谱图（图２．５）。与阴性对照??组相比，除原形药物外，人肝微粒体中鉴定得到４种代谢产物，大鼠肝微粒体中??鉴定得到７种代谢产物，其中人肝微粒体中的四种代谢物在大鼠肝微粒体中都有??检测到，说明不存在人肝微粒体特异性的代谢物（表２．２）。??０．０??Ａ．?ＭＱ?４??滿：?－４．０ｅ－２ｊ?，??？?８．０ｅ４?Ｉ?］?（??Ｉ?？?ｉ?，??＞１?６．０ｅ４?＜?－Ｂ．Ｏｅ－２］?）｜??１?１??２．０９４?ｊ??－?Ｍ５－３?Ｍ５－４?Ｕ５－８?Ｍ４?＾?－?．１??Ｏ．ＯｅＯ?????—＾￣＇—？■?????＾—■■■－＂３＾＝１?１???????Ｔｉｍｅ?－１，６ｅ－１１?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿＇?＿?丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?＿?＿?＞?丨?＿?＿?＿?＿?丨＇丨丨丨丨?＿?＿?＿?＿?丨?＿?Ｔｉｍｓ??５．００?６．００?７．００?８．００?９．００?１０．００?１１．００?５．００?６．００?７．００?８．００?９
３．３．３选择性??实验中，总检测时间为４ｍｉｎ每样品，苄胺雷公藤甲素和苄胺雷腾舒的保留??时间分别为１．６３?ｍｉｎ和１．６６?ｍｉｎ?（图３．２和图３．３）。在节胺雷公藤甲素和爷胺雷??腾舒出峰处，六个不同来源的大鼠空白血浆以及一个溶血血浆中均未检测到内源??性物质的干扰。待测物和内标均没有残留，定量上限（Ｕｐｐｅｒ?ｌｉｍｉｔ?ｏｆ?ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，??ＵＬＯＱ）之后的空白血衆样品未检测至！Ｊ二者的信号。??干扰实验显示，地塞米松（雷公藤甲素和雷腾舒检测的准确度和精密度分别??为９５．８?±?６．９％和９９．３?±?５．６％）、利托那韦（雷公藤甲素和雷腾舒检测的准确度??和精密度分别为９９．８?±?３．０％和１０２?±?７％）和ＡＢＴ?（雷公藤甲素和雷腾舒检测??的准确度和精密度分别为９８．３?±?２．８％和９４．９?±?１．９％）的存在不会影响雷公藤??甲素或者雷腾舒的定量检测。??３．３．４标准曲线和定量下限??雷公藤甲素在０．０３０－１００?ｎｇ／ｍＬ的浓度范围内线性良好。典型线性回归方程??为＞；＝０．４２９?ｘ?＋０．００２２３，?ｒ?＝?０．９９７６，其中代表苄胺雷公藤甲素与苄胺雷腾舒??峰面积的比值，ｘ代表血浆中的苄胺雷公藤甲素浓度。??雷腾舒在０．０３０－１００?ｎｇ／ｍＬ的浓度范围内线性良好。典型线性回归方程为：ｖ??＝?０．１５；ｃ?＋?０．００１６１，ｒ?＝?０．９９９２，其中：ｖ代表苄胺雷腾舒与苄胺雷公藤甲素峰面积??的比值，ｘ代表血浆中的苄胺雷腾舒浓度。??３．３．５准确度和精密度??为了评价方法的准确度和精密度
【参考文献】：
期刊论文
[1](5R)-5-hydroxytriptolide inhibits the inflammatory cascade reaction in astrocytes[J]. Yan-Qiu Cui,Yan Zheng,Gui-Lian Tan,Dong-Mei Zhang,Jun-Ya Wang,Xiao-Min Wang. Neural Regeneration Research. 2019(05)
[2]雷公藤内酯醇对雄性大鼠的生殖毒性及其机制研究[J]. 黄郑隽,阙慧卿,彭华毅,林绥,郭舜民,钱丽萍. 中国中药杂志. 2015(23)
[3]建立人肝微粒体-小鼠3T3成纤维细胞模型评价5-羟基雷公藤内酯醇代谢产物的细胞毒性[J]. 李华,徐佳,刘海燕. 上海医药. 2014(19)
[4]治疗类风湿性关节炎常用药物的研究进展[J]. 池里群,周彬,高文远,刘振. 中国中药杂志. 2014(15)
[5]体外“鸡尾酒法”研究5-羟基雷公藤内酯醇对人肝微粒体CYP450酶亚型的抑制[J]. 刘海燕,张乐多,向志雄,苗红. 中国临床药理学与治疗学. 2013(11)
[6]5-羟基雷公藤内酯醇不是P-糖蛋白底物或抑制剂[J]. 徐佳,向志雄,刘海燕. 上海医药. 2013(13)
[7]雷公藤内酯醇与不同种属血浆蛋白结合率的研究[J]. 刘萍霞,王娟,庄笑梅,张玉杰,张振清,阮金秀. 军事医学. 2012(07)
[8]微生物转化法从雷公藤甲素合成雷腾舒[J]. 赵舜波,黄海华,陈笑艳,李秀立,钟大放. 中国新药杂志. 2012(03)
[9]5R-5-羟基雷公藤内酯醇的晶型制备与表征[J]. 刘瑞丽,杨亚玺,陈东英. 药学学报. 2011(11)
[10]Triptolide prolonged allogeneic islet graft survival in chemically induced and spontaneously diabetic mice without impairment of islet function[J]. Ming-Jun Xin,Shi-Hua Cui,Shuang Liu,Hai-Chen Sun,Fei Li,Jia-Bang Sun and Bin Luo Author Affiliations:Department of General Surgery,Xuanwu Hospital, Capital Medical University,Beijing 100053,China;Department of Hepatobiliary Surgery,Qingdao Municiple Hospital,Qingdao 266011,China;Department of Surgery,Shougang Hospital,Clinical School of Peking University,Beijing 100144,China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2010(03)
本文编号：3509250
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