通痹七物方对痛风性关节炎NLRP3炎症小体、线粒体自噬蛋白的影响
发布时间：2021-11-24 16:15
目的探讨通痹七物方对痛风性关节炎（Gouty Arthritis,GA）大鼠的防治作用及对NOD样受体蛋白3（NOD-like receptor protein 3,NLRP3）炎症小体、线粒体自噬蛋白的影响。方法将36只大鼠随机分为空白对照组,模型组,秋水仙碱组,通痹七物方低、中、高剂量组,每组6只。空白对照组、模型组给予同体积生理盐水,秋水仙碱组给予秋水仙碱0.3 mg·kg-1水溶液,通痹七物方低、中、高剂量组分别给予通痹七物方浓缩配方颗粒800、1 600、3 200 mg·kg-1水溶液。上述各组连续灌胃给药7 d。第5天给药后,除空白对照组外,其余各组大鼠右膝关节腔注射0.1 mL单钠尿酸盐（Monosodium urate,MSU）结晶溶液,进行模型制备。以上各组在模型制备24 h、48 h后进行步态评分,实验结束观察病理组织形态,检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）的含量,检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、白细胞介素1β（IL-1β）、自噬微管相关蛋白轻链3B（Autophagy microtubul...
【文章来源】：中药新药与临床药理. 2020,31(07)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
各组痛风性关节炎大鼠滑膜NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达
痛风属于中医学“痹证”范畴，著名医家朱良春冠以“浊瘀痹”病名。本病多由脾虚湿盛、瘀热互结引起，脾虚为本，湿、瘀、热为标，病理上呈现湿瘀胶着反复的特点。基于上述病机特点，我院逐步完善拟定通痹七物方，本方由川牛膝、生薏苡仁、木瓜、虎杖、忍冬藤、土茯苓、桃仁组成。方中薏苡仁、木瓜健脾利湿；虎杖、忍冬藤清热通络，土茯苓解毒祛浊，川牛膝、桃仁活血化瘀，川牛膝兼有引药下行的作用。现代药理提示薏苡仁可调节嘌呤代谢、减少尿酸形成[18]；土茯苓、忍冬藤、川牛膝具有抗炎镇痛，抑制黄嘌呤氧化酶而降低尿酸的作用[19-20]。全方共奏健脾化湿、祛瘀清热之功，临床上观察该方具有降尿酸、止痛，减少复发等作用。本研究结果表明，模型组的步态评分明显高于空白对照组，且部分大鼠出现典型的三足步态，而通痹七物方治疗组步态评分都有不同程度的下降。同样，在血清TNF-α、IL-6含量比较中，通痹七物方治疗组也明显低于模型组。在组织病理形态方面，模型组滑膜细胞出现增生、间质高度水肿伴大量中性粒细胞浸润；而通痹七物方干预组可见少量中性粒细胞浸润，未见细胞坏死，间质水肿也较轻。这些实验结果表明，通痹七物方对痛风性关节炎有较好的治疗作用。单钠尿酸盐作为损伤相关分子模式的一种可以激活NLRP3炎症小体，为痛风性关节炎发生的重要病理基础[21]。NLRP3炎性体由NLRP3、ASC、半胱天冬酶活化募集结构域（CARD）和Caspase-1组成[22]。细菌、真菌、病毒、单钠尿酸盐晶体、外源性ATP、二氧化硅晶体、焦磷酸钙等可作为配体与NLRP3结合并活化NLRP3，导致NLRP3蛋白构象改变，并通过ATP发生聚合反应形成蛋白寡聚体[23]。在NLRP3效应结构域PYD,ASC和Caspase-1被招募，使NLRP3炎性体装配完成后，Caspase-1前体自动催化为活性形式，并剪切pro-IL-1β为IL-1β，分泌到细胞外产生各种免疫反应[24]。现代研究[25]表明，体内尿酸代谢失衡和血尿酸过饱和都可导致单钠尿酸盐晶体析出，并沉积于关节及软骨组织。单钠尿酸盐晶体作为痛风的内源性危险信号分子被免疫细胞吞噬后，可激活NLRP3炎性体信号转导通路，调控下游活性，从而最终介导痛风性关节炎炎症的发生[26]。本研究结果显示，模型组比空白对照组的NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达量明显升高，提示单钠尿酸盐诱导后，痛风性关节炎大鼠NLRP3炎症小体发生组装和活化，并使炎性因子IL-1β发挥生物学效应。而与模型组相比，秋水仙碱组、通痹七物方低剂量组、通痹七物方中剂量组、通痹七物方高剂量组NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达量有不同程度的减少，通痹七物方中剂量组变化明显，可能与作用靶点的量效相关。
见表2。与空白对照组比较，模型组血清TNF-α、IL-6含量明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较，秋水仙碱组及通痹七物方低、中、高剂量组TNF-α、IL-6含量呈下降趋势，除通痹七物方低剂量组的IL-6含量外，其余差异均有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。2.4 通痹七物方对痛风性关节炎大鼠滑膜炎症小体蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]补肾利湿法中药复方对大鼠痛风性关节炎NALP6信号传导通路调控作用的研究[J]. 隋方宇,韩洁茹,周雪明,乔羽,关子赫,李文昊,杨贺晴,姜德友. 上海中医药杂志. 2019(02)
[2]线粒体自噬与疾病[J]. 王培,付宇,郑桓,习瑾昆. 河北医科大学学报. 2018(07)
[3]萆薢总皂苷对大鼠急性痛风性关节炎NALP3炎性体信号通路的影响[J]. 王璐,那莎,陈光亮. 中国药理学通报. 2017(03)
[4]基于“TLR4/NF-kB”信号通路研究“加味四妙丸”治疗急性痛风性关节炎大鼠的作用机制[J]. 袁晓,范永升,谢冠群,朱飞叶,冯晓红. 浙江中医药大学学报. 2017(01)
[5]朱良春经验方痛风颗粒治疗急性期痛风疗效观察[J]. 曾克勤,陈志伟,武剑,朱婉华. 中医药临床杂志. 2014(03)
[6]薏苡仁和茯苓提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用[J]. 于娟,王晓梅. 中国药物与临床. 2014(01)
[7]高尿酸血症和痛风治疗的中国专家共识[J]. 中华内分泌代谢杂志. 2013 (11)
[8]NLRP3炎症体与炎症性疾病[J]. 蒋建烨,田湉,张艳. 微生物学免疫学进展. 2012(01)
[9]自拟补肾泄浊汤治疗高尿酸血症及痛风40例[J]. 史本国,隋玉萍. 中医药临床杂志. 2010(03)
[10]痛风及高尿酸血症动物模型的研究现状和评价[J]. 金沈锐,秦旭华. 中国实验动物学报. 2005(01)
本文编号：3516328
【文章来源】：中药新药与临床药理. 2020,31(07)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
各组痛风性关节炎大鼠滑膜NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达
痛风属于中医学“痹证”范畴，著名医家朱良春冠以“浊瘀痹”病名。本病多由脾虚湿盛、瘀热互结引起，脾虚为本，湿、瘀、热为标，病理上呈现湿瘀胶着反复的特点。基于上述病机特点，我院逐步完善拟定通痹七物方，本方由川牛膝、生薏苡仁、木瓜、虎杖、忍冬藤、土茯苓、桃仁组成。方中薏苡仁、木瓜健脾利湿；虎杖、忍冬藤清热通络，土茯苓解毒祛浊，川牛膝、桃仁活血化瘀，川牛膝兼有引药下行的作用。现代药理提示薏苡仁可调节嘌呤代谢、减少尿酸形成[18]；土茯苓、忍冬藤、川牛膝具有抗炎镇痛，抑制黄嘌呤氧化酶而降低尿酸的作用[19-20]。全方共奏健脾化湿、祛瘀清热之功，临床上观察该方具有降尿酸、止痛，减少复发等作用。本研究结果表明，模型组的步态评分明显高于空白对照组，且部分大鼠出现典型的三足步态，而通痹七物方治疗组步态评分都有不同程度的下降。同样，在血清TNF-α、IL-6含量比较中，通痹七物方治疗组也明显低于模型组。在组织病理形态方面，模型组滑膜细胞出现增生、间质高度水肿伴大量中性粒细胞浸润；而通痹七物方干预组可见少量中性粒细胞浸润，未见细胞坏死，间质水肿也较轻。这些实验结果表明，通痹七物方对痛风性关节炎有较好的治疗作用。单钠尿酸盐作为损伤相关分子模式的一种可以激活NLRP3炎症小体，为痛风性关节炎发生的重要病理基础[21]。NLRP3炎性体由NLRP3、ASC、半胱天冬酶活化募集结构域（CARD）和Caspase-1组成[22]。细菌、真菌、病毒、单钠尿酸盐晶体、外源性ATP、二氧化硅晶体、焦磷酸钙等可作为配体与NLRP3结合并活化NLRP3，导致NLRP3蛋白构象改变，并通过ATP发生聚合反应形成蛋白寡聚体[23]。在NLRP3效应结构域PYD,ASC和Caspase-1被招募，使NLRP3炎性体装配完成后，Caspase-1前体自动催化为活性形式，并剪切pro-IL-1β为IL-1β，分泌到细胞外产生各种免疫反应[24]。现代研究[25]表明，体内尿酸代谢失衡和血尿酸过饱和都可导致单钠尿酸盐晶体析出，并沉积于关节及软骨组织。单钠尿酸盐晶体作为痛风的内源性危险信号分子被免疫细胞吞噬后，可激活NLRP3炎性体信号转导通路，调控下游活性，从而最终介导痛风性关节炎炎症的发生[26]。本研究结果显示，模型组比空白对照组的NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达量明显升高，提示单钠尿酸盐诱导后，痛风性关节炎大鼠NLRP3炎症小体发生组装和活化，并使炎性因子IL-1β发挥生物学效应。而与模型组相比，秋水仙碱组、通痹七物方低剂量组、通痹七物方中剂量组、通痹七物方高剂量组NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达量有不同程度的减少，通痹七物方中剂量组变化明显，可能与作用靶点的量效相关。
见表2。与空白对照组比较，模型组血清TNF-α、IL-6含量明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较，秋水仙碱组及通痹七物方低、中、高剂量组TNF-α、IL-6含量呈下降趋势，除通痹七物方低剂量组的IL-6含量外，其余差异均有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。2.4 通痹七物方对痛风性关节炎大鼠滑膜炎症小体蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]补肾利湿法中药复方对大鼠痛风性关节炎NALP6信号传导通路调控作用的研究[J]. 隋方宇,韩洁茹,周雪明,乔羽,关子赫,李文昊,杨贺晴,姜德友. 上海中医药杂志. 2019(02)
[2]线粒体自噬与疾病[J]. 王培,付宇,郑桓,习瑾昆. 河北医科大学学报. 2018(07)
[3]萆薢总皂苷对大鼠急性痛风性关节炎NALP3炎性体信号通路的影响[J]. 王璐,那莎,陈光亮. 中国药理学通报. 2017(03)
[4]基于“TLR4/NF-kB”信号通路研究“加味四妙丸”治疗急性痛风性关节炎大鼠的作用机制[J]. 袁晓,范永升,谢冠群,朱飞叶,冯晓红. 浙江中医药大学学报. 2017(01)
[5]朱良春经验方痛风颗粒治疗急性期痛风疗效观察[J]. 曾克勤,陈志伟,武剑,朱婉华. 中医药临床杂志. 2014(03)
[6]薏苡仁和茯苓提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用[J]. 于娟,王晓梅. 中国药物与临床. 2014(01)
[7]高尿酸血症和痛风治疗的中国专家共识[J]. 中华内分泌代谢杂志. 2013 (11)
[8]NLRP3炎症体与炎症性疾病[J]. 蒋建烨,田湉,张艳. 微生物学免疫学进展. 2012(01)
[9]自拟补肾泄浊汤治疗高尿酸血症及痛风40例[J]. 史本国,隋玉萍. 中医药临床杂志. 2010(03)
[10]痛风及高尿酸血症动物模型的研究现状和评价[J]. 金沈锐,秦旭华. 中国实验动物学报. 2005(01)
本文编号：3516328
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