miRNA-199a-5p对血管内皮细胞功能的影响及黄芪多糖干预的机制研究
发布时间：2021-11-26 19:29
目的探讨miRNA-199a-5p对血管内皮细胞发生功能损伤的影响以及黄芪多糖的干预作用,为进一步阐明心血管疾病相关血管内皮损伤的病理生理机制提供科学依据,为中医药防治内皮损伤相关心血管疾病提供新的治疗策略和治疗靶点。方法瞬时转染技术构建miRNA-199a-5p差异表达的血管内皮损伤细胞模型并用黄芪多糖进行相关干预;ELISA检测细胞培养上清中内皮功能指标内皮素-1（ET-1）、血管性假性血友病因子（vWF）、血栓调节蛋白（TM）含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮（NO）浓度;RT-PCR检测各组细胞GRP78、ATF6和CHOP基因的表达;Western Blot检测各组细胞GRP78、ATF6和CHOP蛋白的表达。结果内皮功能指标检测结果表明,miRNA-199a-5p inhibitor组NO分泌减少,ET、vWF、TM分泌增多,与正常对照组、黄芪多糖组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;内质网应激ATF6通路GRP78、ATF6、CHOP基因表达量在miRNA-199a-5p inhibitor组上调,与正常对照组、黄芪多糖组比较,差异有统计学意义（P<0.05）...
【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
内质网应激3条经典通路图
图 2 miRanda 靶标软件预测示意图黄芪，为补药之长，是益气活血代表方补阳还五汤的君药，临床上对心血管疾病血瘀证有较好的疗效。作为黄芪的主要有效成分，黄芪多糖（APS）近年来的药理研究被发现其有心血管获益，可降血糖，调节血脂、血压，防治动脉粥样硬化，并对血管内皮细胞有较好的保护作用[25-27]。黄芪多糖可显著抑制内皮损伤时与血瘀形成密切相关的粘附分子 P-选择素、血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）等因子的表达，提示其具有活血作用，可改善心血管病血瘀状态[28]；本课题组研究也证实，黄芪多糖增强高血压血瘀证模型细胞活性,促进血瘀异常细胞形态修复，可维持细胞正常形态结构[29]。可见，黄芪多糖对血管内皮损伤有良好的修复作用，然而其具体作用机制尚未得到公认。近年来，关于黄芪多糖缓解机体内质网应激反应方面有不少报道表明 APS 可抑制内质网应激标志基因 GRP78、CHOP、IRE1 等的表达，在抑制心肌细胞损伤、凋亡，减轻糖尿病大鼠内质网应激反应，增加胰岛素敏感性等方面发挥重[30-31]
图 3：a 各组 NO 分泌量；b 各组 ET-1 分泌量；c 各组 TM 分泌量；d 各组 vWF 分泌量注:*,P<0.05;**,P<0.01(与正常组比较).#,P<0.05;##,P<0.01(与 Inhibitor 组比较).果分析：内皮功能指标检测结果显示，miRNA-199a-5p mimic 组与 inhibitor 较，mimic 组 NO 分泌量明显增高(P<0.01)，ET、TM、vWF 分泌量显著下降(P<0.01而与正常组以及 mimic 对照组相比，miRNA-199a-5p mimic 组各内皮功能因子量未出见显著差异(P>0.05)。与正常组比较，miRNA-199a-5p inhibitor 组 NO 量减少(P<0.01)，ET、TM、vWF 产生增加(P<0.01)；而 miRNA-199a-5p inhibit照组与正常组相比，各内皮因子分泌量未见显著差异(P>0.05)，与正常组相近芪多糖组与 miRNA-199a-5p inhibitor 组比较，NO 分泌量显著提升(P<0.05)，EM、vWF 分泌量降低(P<0.01)。实验结论miRNA-199a-5p mimic组与正常组相比，内皮因子未见显著差异，提示该miRN
【参考文献】：
期刊论文
[1]雪莲通脉丸对冠心病气虚血瘀证小鼠血管内皮细胞功能相关指标ET-1、NO、ACE的影响[J]. 秦汉,胡志希,李琳,吕佳,杨杨,张易. 湖南中医药大学学报. 2016(02)
[2]桃仁提取物抗血瘀证大鼠血栓形成的机制[J]. 以敏,徐君毅,郝二伟,邓家刚. 中国实验方剂学杂志. 2016(01)
[3]低氧时miR-199a-5p通过调节UPR反应发挥神经保护作用的研究[J]. 李鹏,周思敏,郑善军. 中国病理生理杂志. 2015(10)
[4]高血压病血瘀证血管内皮损伤的内质网应激细胞凋亡机制研究[J]. 孙喜稳,陈利国,王华强,屈援,颜亮,唐海兰. 中华中医药杂志. 2015(09)
[5]黄芪多糖对毒胡萝卜素诱导大鼠心肌细胞内质网应激的影响[J]. 袁成代,陈永波. 临床和实验医学杂志. 2015(16)
[6]高血压发病相关miRNAs的研究进展[J]. 宁冰冰,陈瑜,张腾. 中西医结合心脑血管病杂志. 2015(06)
[7]高血压病血瘀证相关miRNA的筛选[J]. 何铃,方梅霞,陈利国,袁静,周建华,徐婧. 中国病理生理杂志. 2015(05)
[8]肿瘤血瘀证和活血化瘀药对血管生成的作用[J]. 缪黎玮,叶丽红. 吉林中医药. 2015(05)
[9]氧化应激介导糖尿病血管内皮损伤的研究进展[J]. 蓝宇涛,旷焱平,陈垦. 齐齐哈尔医学院学报. 2015(10)
[10]葡萄糖调节蛋白GRP78研究进展[J]. 扎西英派,张涛杰,霍生东,魏锁成,阿依木古丽. 西北民族大学学报(自然科学版). 2015(01)
博士论文
[1]内质网应激—自噬对脑缺血再灌注能量代谢障碍与氧化应激的影响[D]. 王伟伟.吉林大学 2014
[2]动脉硬化关键信号分子相关的血清microRNA在亚临床甲减病人中表达谱初探[D]. 张新焕.山东大学 2014
[3]NF-κB介导的炎症相关疾病的分子调控机制研究[D]. 方飞.南京医科大学 2013
[4]冠心病不稳定性心绞痛血瘀证的microRNA生物标志物研究[D]. 虞桂.中国中医科学院 2013
[5]冠心病患者炎性生物标志物变化规律及黄芪多糖干预调节的机制探讨[D]. 刘蓓.北京中医药大学 2013
[6]粘附分子与UAP中医证候相关规律及黄芪多糖干预机理研究[D]. 徐冰.北京中医药大学 2012
[7]糖皮质激素下调microRNA-155发挥抑炎作用的机制研究[D]. 郑一诫.复旦大学 2012
[8]血管内皮细胞miR-125和miR-126的功能研究[D]. 李东.第二军医大学 2010
[9]气虚血瘀大鼠模型表征及生物学基础相关研究[D]. 扈新刚.北京中医药大学 2007
硕士论文
[1]血小板微泡介导microRNA对内皮细胞的作用和机制研究[D]. 陈启.第二军医大学 2015
[2]第一部分 HBV相关原发性肝癌的遗传易感性研究 第二部分 ATF6启动子的结构和功能研究[D]. 陈康梅.北京协和医学院 2014
[3]未折叠蛋白反应相关因子GRP78、ATF6和XPB1在食管鳞癌中的表达及其意义[D]. 闫东.郑州大学 2014
[4]miRNA-499与冠心病中医证型的相关性研究[D]. 张家仕.广州中医药大学 2014
[5]DAA-Ⅰ对心肌微血管内皮细胞缺血/再灌注损伤的作用及机制研究[D]. 党晶艺.第四军医大学 2013
[6]循环血microRNA作为血管内皮损伤标志物的研究[D]. 安丽娜.第二军医大学 2013
[7]ATF6对XBP1基因转录调控机制的实验研究[D]. 赵文君.重庆医科大学 2012
[8]心绞痛不同血瘀证型与冠心病危险因素及炎症因子相关性[D]. 王珊珊.山东中医药大学 2012
[9]高血压病血瘀证患者血清对血管内皮细胞损伤的研究[D]. 贾会欣.暨南大学 2008
[10]丹参酮ⅡA、黄芪多糖及其配伍对血管内皮细胞保护作用的研究[D]. 李权.暨南大学 2008
本文编号：3520783
【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
内质网应激3条经典通路图
图 2 miRanda 靶标软件预测示意图黄芪，为补药之长，是益气活血代表方补阳还五汤的君药，临床上对心血管疾病血瘀证有较好的疗效。作为黄芪的主要有效成分，黄芪多糖（APS）近年来的药理研究被发现其有心血管获益，可降血糖，调节血脂、血压，防治动脉粥样硬化，并对血管内皮细胞有较好的保护作用[25-27]。黄芪多糖可显著抑制内皮损伤时与血瘀形成密切相关的粘附分子 P-选择素、血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）等因子的表达，提示其具有活血作用，可改善心血管病血瘀状态[28]；本课题组研究也证实，黄芪多糖增强高血压血瘀证模型细胞活性,促进血瘀异常细胞形态修复，可维持细胞正常形态结构[29]。可见，黄芪多糖对血管内皮损伤有良好的修复作用，然而其具体作用机制尚未得到公认。近年来，关于黄芪多糖缓解机体内质网应激反应方面有不少报道表明 APS 可抑制内质网应激标志基因 GRP78、CHOP、IRE1 等的表达，在抑制心肌细胞损伤、凋亡，减轻糖尿病大鼠内质网应激反应，增加胰岛素敏感性等方面发挥重[30-31]
图 3：a 各组 NO 分泌量；b 各组 ET-1 分泌量；c 各组 TM 分泌量；d 各组 vWF 分泌量注:*,P<0.05;**,P<0.01(与正常组比较).#,P<0.05;##,P<0.01(与 Inhibitor 组比较).果分析：内皮功能指标检测结果显示，miRNA-199a-5p mimic 组与 inhibitor 较，mimic 组 NO 分泌量明显增高(P<0.01)，ET、TM、vWF 分泌量显著下降(P<0.01而与正常组以及 mimic 对照组相比，miRNA-199a-5p mimic 组各内皮功能因子量未出见显著差异(P>0.05)。与正常组比较，miRNA-199a-5p inhibitor 组 NO 量减少(P<0.01)，ET、TM、vWF 产生增加(P<0.01)；而 miRNA-199a-5p inhibit照组与正常组相比，各内皮因子分泌量未见显著差异(P>0.05)，与正常组相近芪多糖组与 miRNA-199a-5p inhibitor 组比较，NO 分泌量显著提升(P<0.05)，EM、vWF 分泌量降低(P<0.01)。实验结论miRNA-199a-5p mimic组与正常组相比，内皮因子未见显著差异，提示该miRN
【参考文献】：
期刊论文
[1]雪莲通脉丸对冠心病气虚血瘀证小鼠血管内皮细胞功能相关指标ET-1、NO、ACE的影响[J]. 秦汉,胡志希,李琳,吕佳,杨杨,张易. 湖南中医药大学学报. 2016(02)
[2]桃仁提取物抗血瘀证大鼠血栓形成的机制[J]. 以敏,徐君毅,郝二伟,邓家刚. 中国实验方剂学杂志. 2016(01)
[3]低氧时miR-199a-5p通过调节UPR反应发挥神经保护作用的研究[J]. 李鹏,周思敏,郑善军. 中国病理生理杂志. 2015(10)
[4]高血压病血瘀证血管内皮损伤的内质网应激细胞凋亡机制研究[J]. 孙喜稳,陈利国,王华强,屈援,颜亮,唐海兰. 中华中医药杂志. 2015(09)
[5]黄芪多糖对毒胡萝卜素诱导大鼠心肌细胞内质网应激的影响[J]. 袁成代,陈永波. 临床和实验医学杂志. 2015(16)
[6]高血压发病相关miRNAs的研究进展[J]. 宁冰冰,陈瑜,张腾. 中西医结合心脑血管病杂志. 2015(06)
[7]高血压病血瘀证相关miRNA的筛选[J]. 何铃,方梅霞,陈利国,袁静,周建华,徐婧. 中国病理生理杂志. 2015(05)
[8]肿瘤血瘀证和活血化瘀药对血管生成的作用[J]. 缪黎玮,叶丽红. 吉林中医药. 2015(05)
[9]氧化应激介导糖尿病血管内皮损伤的研究进展[J]. 蓝宇涛,旷焱平,陈垦. 齐齐哈尔医学院学报. 2015(10)
[10]葡萄糖调节蛋白GRP78研究进展[J]. 扎西英派,张涛杰,霍生东,魏锁成,阿依木古丽. 西北民族大学学报(自然科学版). 2015(01)
博士论文
[1]内质网应激—自噬对脑缺血再灌注能量代谢障碍与氧化应激的影响[D]. 王伟伟.吉林大学 2014
[2]动脉硬化关键信号分子相关的血清microRNA在亚临床甲减病人中表达谱初探[D]. 张新焕.山东大学 2014
[3]NF-κB介导的炎症相关疾病的分子调控机制研究[D]. 方飞.南京医科大学 2013
[4]冠心病不稳定性心绞痛血瘀证的microRNA生物标志物研究[D]. 虞桂.中国中医科学院 2013
[5]冠心病患者炎性生物标志物变化规律及黄芪多糖干预调节的机制探讨[D]. 刘蓓.北京中医药大学 2013
[6]粘附分子与UAP中医证候相关规律及黄芪多糖干预机理研究[D]. 徐冰.北京中医药大学 2012
[7]糖皮质激素下调microRNA-155发挥抑炎作用的机制研究[D]. 郑一诫.复旦大学 2012
[8]血管内皮细胞miR-125和miR-126的功能研究[D]. 李东.第二军医大学 2010
[9]气虚血瘀大鼠模型表征及生物学基础相关研究[D]. 扈新刚.北京中医药大学 2007
硕士论文
[1]血小板微泡介导microRNA对内皮细胞的作用和机制研究[D]. 陈启.第二军医大学 2015
[2]第一部分 HBV相关原发性肝癌的遗传易感性研究 第二部分 ATF6启动子的结构和功能研究[D]. 陈康梅.北京协和医学院 2014
[3]未折叠蛋白反应相关因子GRP78、ATF6和XPB1在食管鳞癌中的表达及其意义[D]. 闫东.郑州大学 2014
[4]miRNA-499与冠心病中医证型的相关性研究[D]. 张家仕.广州中医药大学 2014
[5]DAA-Ⅰ对心肌微血管内皮细胞缺血/再灌注损伤的作用及机制研究[D]. 党晶艺.第四军医大学 2013
[6]循环血microRNA作为血管内皮损伤标志物的研究[D]. 安丽娜.第二军医大学 2013
[7]ATF6对XBP1基因转录调控机制的实验研究[D]. 赵文君.重庆医科大学 2012
[8]心绞痛不同血瘀证型与冠心病危险因素及炎症因子相关性[D]. 王珊珊.山东中医药大学 2012
[9]高血压病血瘀证患者血清对血管内皮细胞损伤的研究[D]. 贾会欣.暨南大学 2008
[10]丹参酮ⅡA、黄芪多糖及其配伍对血管内皮细胞保护作用的研究[D]. 李权.暨南大学 2008
本文编号：3520783
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3520783.html
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