雷公藤红素在棕榈酸诱导心肌细胞凋亡中的协同毒性作用及其机制研究
发布时间：2021-11-28 04:07
目的:评价雷公藤红素（celastrol,cel）在棕榈酸诱导心肌细胞凋亡中的协同毒性作用及其可能的机制,为雷公藤红素更广泛的应用,降低心脏毒副反应提供理论依据。方法:心肌细胞H9c2生长至汇合度达到约80%时,用不同浓度雷公藤红素（100、200、400、800、1600 nmol/L）处理心肌细胞H9c2,其中Dox作为阳性对照。雷公藤红素联合棕榈酸（PA,0.1 mmol/L）处理心肌细胞H9c2或原代心肌细胞,CCK-8及蛋白印迹法分别检测细胞活力和胞内Cleaved caspase 3,p-AMPKα,AMPKα,p-JNK,JNK,LC3,β-actin的表达水平;采用ROS检测试剂盒和酶标仪检测心肌细胞内ROS水平的变化。结果:1、不同浓度雷公藤红素单独作用H9c2 12h,结果显示雷公藤红素浓度在800 nmol/L及以下时,对心肌细胞活力和激活型caspase3产物没有明显影响（p>0.05）,浓度达到1600 nmol/L时,心肌细胞活力下降,胞内激活型caspase3产物增加,对心肌细胞表现出明显毒性作用（p<0.05）。2、不同浓度雷公藤红素与棕榈酸...
【文章来源】：湖北科技学院湖北省
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PA单独处理心肌细胞H9c2不同时间(x±s,n=3)
图 2 雷公藤红素对心肌细胞毒性评价( x±s, n=3)。A 分析不同浓度雷公藤红素对心肌细胞活力的影响，其中棕榈酸和阿霉素作为阳性对照，与 CON 组相比，*p<0.05；B 分析不同浓度雷公藤红素对胞内激活型 caspase3 积累的影响，与 CON 组相比，*p<0.05。3.雷公藤红素联合 PA 处理心肌细胞 H9c2采用 CCK8 试剂盒，PA 能够明显下调 H9c2 细胞活力，而联合雷公藤红素产生正向协同作用，结果显示（图 3-A），如 400 nmol/L 的雷公藤红素与棕榈酸共同作用，细胞活力仅为棕榈酸单独处理组的 50%。蛋白质印迹分析发现，采用不同浓度雷公藤红素预处理原代心肌细胞及 H9c2 细胞 1 h，再加 PA，两者同时处理心肌细胞 24 h 后，检测 caspase3 的表达水平。结果显示，低剂量的雷公藤红素（200，400 nmol/L）和 PA 同时处理心肌细胞时，明显增加激活型 caspase3的积累。结果显示（图 3-B），且各组数据 p<0.05，差异具有统计学意义。
图 3 低剂量雷公藤红素与棕榈酸的协同毒性作用检测 ( x±s, n=3)。榈酸对 H9c2 细胞活力的影响，与 CON 组相比，*p<0.05，与 PA 组相比量雷公藤红素联合棕榈酸对 H9c2 胞内激活型 caspase3 的积累的影响*p<0.05；与 PA 组相比，#p<0.05。4.雷公藤红素联合 PA 处理原代心肌细胞蛋白质印迹分析发现，采用不同浓度雷公藤红素预处理心β
【参考文献】：
期刊论文
[1]Celastrol targets IRAKs to block Toll-like receptor 4-mediated nuclear factor-κB activation[J]. Yu-fan Shen,Xue Zhang,Ying Wang,Fan-fan Cao,Georges Uzan,Bin Peng,Deng-hai Zhang. Journal of Integrative Medicine. 2016(03)
[2]雷公藤红素通过ROS/JNK途径诱导Saos-2细胞发生caspase依赖的凋亡[J]. 黄志平,邵立龙,阮阳平. 中国病理生理杂志. 2015(08)
[3]雷公藤毒性作用机制研究进展[J]. 昊霞,王忠震,林兵,刘志宏,宋洪涛. 中国医院药学杂志. 2015(16)
[4]自噬发生中的ROS调节机制[J]. 纪元,龙建纲,刘健康. 中国生物化学与分子生物学报. 2014(04)
[5]雷公藤红素抑制大鼠胰岛细胞功能损伤研究[J]. 黄明来,马卓. 湖北大学学报(自然科学版). 2014(01)
[6]雷公藤的现代应用及不良反应研究进展[J]. 孔蓓俊,刘继勇,高申,杨帝顺. 上海中医药杂志. 2011(06)
[7]雷公藤红素的研究进展[J]. 陈铭祥,冯玉静,王定勇,杨雯. 中成药. 2010(03)
[8]雷公藤红素对斑马鱼胚胎心脏毒性的初步研究[J]. 王思锋,刘可春,王希敏,何秋霞,韩利文,侯海荣. 中国药理学通报. 2009(05)
硕士论文
[1]雷公藤红素和YK1101通过抑制Ikr钾电流而影响心肌复极化[D]. 庄重.南京师范大学 2013
本文编号：3523671
【文章来源】：湖北科技学院湖北省
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PA单独处理心肌细胞H9c2不同时间(x±s,n=3)
图 2 雷公藤红素对心肌细胞毒性评价( x±s, n=3)。A 分析不同浓度雷公藤红素对心肌细胞活力的影响，其中棕榈酸和阿霉素作为阳性对照，与 CON 组相比，*p<0.05；B 分析不同浓度雷公藤红素对胞内激活型 caspase3 积累的影响，与 CON 组相比，*p<0.05。3.雷公藤红素联合 PA 处理心肌细胞 H9c2采用 CCK8 试剂盒，PA 能够明显下调 H9c2 细胞活力，而联合雷公藤红素产生正向协同作用，结果显示（图 3-A），如 400 nmol/L 的雷公藤红素与棕榈酸共同作用，细胞活力仅为棕榈酸单独处理组的 50%。蛋白质印迹分析发现，采用不同浓度雷公藤红素预处理原代心肌细胞及 H9c2 细胞 1 h，再加 PA，两者同时处理心肌细胞 24 h 后，检测 caspase3 的表达水平。结果显示，低剂量的雷公藤红素（200，400 nmol/L）和 PA 同时处理心肌细胞时，明显增加激活型 caspase3的积累。结果显示（图 3-B），且各组数据 p<0.05，差异具有统计学意义。
图 3 低剂量雷公藤红素与棕榈酸的协同毒性作用检测 ( x±s, n=3)。榈酸对 H9c2 细胞活力的影响，与 CON 组相比，*p<0.05，与 PA 组相比量雷公藤红素联合棕榈酸对 H9c2 胞内激活型 caspase3 的积累的影响*p<0.05；与 PA 组相比，#p<0.05。4.雷公藤红素联合 PA 处理原代心肌细胞蛋白质印迹分析发现，采用不同浓度雷公藤红素预处理心β
【参考文献】：
期刊论文
[1]Celastrol targets IRAKs to block Toll-like receptor 4-mediated nuclear factor-κB activation[J]. Yu-fan Shen,Xue Zhang,Ying Wang,Fan-fan Cao,Georges Uzan,Bin Peng,Deng-hai Zhang. Journal of Integrative Medicine. 2016(03)
[2]雷公藤红素通过ROS/JNK途径诱导Saos-2细胞发生caspase依赖的凋亡[J]. 黄志平,邵立龙,阮阳平. 中国病理生理杂志. 2015(08)
[3]雷公藤毒性作用机制研究进展[J]. 昊霞,王忠震,林兵,刘志宏,宋洪涛. 中国医院药学杂志. 2015(16)
[4]自噬发生中的ROS调节机制[J]. 纪元,龙建纲,刘健康. 中国生物化学与分子生物学报. 2014(04)
[5]雷公藤红素抑制大鼠胰岛细胞功能损伤研究[J]. 黄明来,马卓. 湖北大学学报(自然科学版). 2014(01)
[6]雷公藤的现代应用及不良反应研究进展[J]. 孔蓓俊,刘继勇,高申,杨帝顺. 上海中医药杂志. 2011(06)
[7]雷公藤红素的研究进展[J]. 陈铭祥,冯玉静,王定勇,杨雯. 中成药. 2010(03)
[8]雷公藤红素对斑马鱼胚胎心脏毒性的初步研究[J]. 王思锋,刘可春,王希敏,何秋霞,韩利文,侯海荣. 中国药理学通报. 2009(05)
硕士论文
[1]雷公藤红素和YK1101通过抑制Ikr钾电流而影响心肌复极化[D]. 庄重.南京师范大学 2013
本文编号：3523671
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3523671.html
最近更新
教材专著
