高效液相色谱法测定苦檀子中β-谷甾醇的含量——基于正交试验优化的皂化反应法

发布时间：2021-11-28 07:47

　　目的:建立高相液相色谱法测定苦檀子中β-谷甾醇含量,并对提取方法进行优化。方法:采用C18反相色谱柱对β-谷甾醇含量进行测定,流动相为甲醇-乙腈（60∶40）,检测波长210 nm,柱温箱温度40℃,流速1.2 mL/min;以皂化时间（1、2、3、4 h）、皂化温度（70、80、90、100℃）、皂化液加入体积（4、6、8、10 mL）为正交试验考察因素和水平,优选苦檀子的皂化方法。结果:β-谷甾醇在0.05～1μg范围内,质量浓度与峰面积呈良好的线性关系（R2=0.9995）,仪器检出限为0.027μg,精密度（RSD）为0.51%;由正交试验直观分析可知,各因素对提取工艺的影响顺序为皂化液加入体积>皂化时间>皂化温度;根据直观分析K值确定最佳制备工艺条件为:加入10 mL皂化液,皂化时间2 h,皂化温度80℃。测得苦檀子中β-谷甾醇含量为0.020%,方法平均回收率为118.8%。结论:基于正交试验确定的皂化反应法用HPLC测定苦檀子中β-谷甾醇含量,操作简便快速,可为苦檀子中β-谷甾醇含量测定提供依据。 

【文章来源】：北方药学. 2020,17(07)

【文章页数】：3 页

【部分图文】：

β-谷甾醇标准品（A）、苦檀子皂化后收集的正己烷液（B）以及乙醇超声处理得到的苦檀子样品（C）的HPLC图谱

根据“1.2.2”，考察皂化液加入体积对β-谷甾醇提取量的影响，结果见图2。由图2可知，随着加入皂化液的体积逐渐增大，β-谷甾醇的提取量逐渐升高。当加入的皂化液体积达到10 m L时，β-谷甾醇的提取量最大。继续加入皂化液，β-谷甾醇的提取量降低并趋于平稳。因此，选择最佳加入皂化液体积为10 mL。

根据“1.2.2”，考察皂化时间对β-谷甾醇提取量的影响，结果见图3。由图3可知，当加入皂化液的体积为10 mL，皂化温度为80℃时，随着皂化时间的延长，β-谷甾醇的提取量先升高；当皂化时间为2 h时，β-谷甾醇的提取量最大；继续延长皂化时间，β-谷甾醇提取量呈现下降趋势并趋于平稳。因此，选择最佳皂化时间为2 h。


本文编号：3524009