吉林省马勃资源及药效物质基础研究

发布时间：2022-01-13 12:20

　　目的:对吉林省马勃资源进行调研,明确马勃药效物质基础,为马勃质量标准提升与马勃资源开发利用提供依据。方法:本课题对吉林省马勃资源进行调研,采用基原、性状、显微、理化等方法对采集到的马勃标本进行鉴定。通过单孢子培养法和组织分离法分离纯化马勃菌株,利用液体深层发酵技术对马勃菌株进行发酵,获得马勃发酵产物。利用有机溶剂提取,LC、TLC、HPLC等色谱手段对栓皮马勃子实体与菌丝中化学成分分别进行分离。UV、¹HNMR、¹³CNMR、ESI-MS等方法对分离的化学成分进行鉴定。HPLC双波长法对吉林省马勃类药材中的主要成分麦角甾醇和麦角甾酮进行含量测定。设计药理实验研究了尖顶地星醇提物对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的治疗作用,麦角甾醇对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠肾损伤的治疗作用。结果:本课题采集马勃标本500余份,已鉴定马勃覆盖4科7属25种。分离纯化马勃菌株10株。从栓皮马勃子实体和菌丝中分离鉴定6种化合物。并对16种马勃类药材中麦角甾醇和麦角甾酮的含量进行测定。药理实验结果表明尖顶地星醇提物可以显著降低LPS诱导的急性肺损伤小鼠血清中TNF-α、I... 

【文章来源】：长春中医药大学吉林省

【文章页数】：104 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英文缩略语
前言
文献综述
    1 马勃的基原考证
    2 马勃生境分布
        2.1 马勃的生境
        2.2 马勃的分布
    3 马勃的生长发育条件
    4 马勃化学成分
        4.1 甾体化合物
        4.2 生物碱
        4.3 其他
    5 马勃的药理作用和临床应用
    6 展望
第一章 吉林省马勃资源的采集、鉴定与发酵培养
    1 马勃资源研究概况
    2 仪器与材料
        2.1 实验仪器
        2.2 实验材料
    3 实验方法
        3.1 野外采集
        3.2 观察标本
            3.2.1 性状鉴别
        3.3 显微鉴别
            3.3.1 光学显微镜下观察
            3.3.2 电子显微镜下观察
        3.4 薄层鉴别
    4 采集到吉林省的马勃类真菌汇总
    5 马勃类真菌菌株分离与发酵培养
        5.1 仪器与材料
            5.1.1 实验仪器
            5.1.2 实验材料
        5.2 马勃类真菌菌株分离
            5.2.1 固体培养基配制
            5.2.2 接种与培养
        5.3 马勃类真菌液体发酵培养
            5.3.1 液体培养基配制
            5.3.2 接种与培养
        5.4 栓皮马勃发酵物制备
            5.4.1 仪器与材料
            5.4.2 培养基配制
            5.4.3 菌种培养
            5.4.4 发酵培养
    6 结果与讨论
第二章 栓皮马勃化学成分分离纯化及结构解析
    1 栓皮马勃子实体化学成分提取分离
        1.1 仪器与材料
            1.1.1 实验仪器
            1.1.2 实验材料
        1.2 提取分离
            1.2.1 栓皮马勃子实体提取分离流程图
            1.2.2 提取
            1.2.3 硅胶柱层析
            1.2.4 薄层检识
    2 栓皮马勃菌丝化学成分提取分离
        2.1 仪器与材料
            2.1.1 材料
            2.1.2 实验仪器
        2.2 提取分离
            2.2.1 栓皮马勃菌丝提取分离流程图
            2.2.2 提取
            2.2.3 硅胶柱层析
            2.2.4 栓皮马勃菌丝醇提物重结晶
            2.2.5 薄层检识
    3 HPLC分析
        3.1 仪器与材料
        3.2 方法与结果
    4 化合物结构解析
    5 实验结果
    6 讨论
第三章 吉林省马勃类药材中麦角甾醇和麦角甾酮含量测定
    1 仪器与材料
        1.1 实验仪器
        1.2 实验材料
    2 测定方法
        2.1 色谱条件
        2.2 对照品溶液的制备
        2.3 供试品溶液的制备
    3 方法学考察
        3.1 线性关系考察
            3.1.1 麦角甾酮线性关系考察
            3.1.2 麦角甾醇线性关系考察
        3.2 精密度试验
            3.2.1 麦角甾酮精密度试验
            3.2.2 麦角甾醇精密度试验
        3.3 稳定性试验
        3.4 重复性试验
        3.5 加样回收试验
    4 样品中麦角甾酮、麦角甾醇含量测定
    5 讨论
第四章 药效学研究
    1 尖顶地星对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的治疗作用
        1.1 实验试剂与仪器
        1.2 实验动物及分组
        1.3 实验方法
            1.3.1 ALI模型的建立
            1.3.2 血清的提取
            1.3.3 小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量的测定
            1.3.4 小鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1α细胞因子含量的测定
            1.3.5 统计学处理
        1.4 结果
            1.4.1 实验数据
            1.4.2 尖顶地星提取物对血液中细胞因子IL-6的影响
            1.4.3 尖顶地星提取物对血液中细胞因子IL-1α的影响
            1.4.4 尖顶地星提取物对血液中细胞因子TNF-α的影响
            1.4.5 尖顶地星提取物对小鼠体内SOD活性及MDA含量的影响
        1.5 讨论
            1.5.1 细胞因子与抗炎作用
            1.5.2 炎症因子与急性肺损伤
            1.5.3 尖顶地星提取物与肺损伤的治疗
    2 麦角甾醇对链脲霉素诱导的糖尿病小鼠的治疗作用
        2.1 实验材料
            2.1.1 主要的试剂和试剂盒
            2.1.2 动物
        2.2 实验方法
            2.2.1 实验方案
            2.2.2 样品制备
            2.2.3 口服葡萄糖耐量试验(OGTT)
            2.2.4 胰岛素含量
            2.2.5 生化分析
            2.2.6 肾脏的组织学分析
            2.2.7 WesternBlot
            2.2.8 统计分析
        2.3 结果
            2.3.1 血糖和血清胰岛素水平的改变
            2.3.2 各组的血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的水平
            2.3.3 糖尿病组合对照组小鼠的尿酸和肌酐浓度
            2.3.4 麦角甾醇对肾脏病理变化的影响
            2.3.5 麦角甾醇对PI3K/Akt/NF-κB信号传导通路和相关信号传导通路的影响
        2.4 讨论
总结与讨论
致谢
参考文献
附图
    附图1 部分马勃类真菌性状与生境图片
    附图2 部分马勃担孢子光镜图片
    附图3 部分马勃类真菌担孢子电镜图片
    附图4 部分分离菌种液体培养图片
    附图5 分离化合物图谱
    附图6 菌类标本采集记录(示例)
硕士期间论文发表情况


【参考文献】：
期刊论文
[1]黄硬皮马勃子实体提取物抑菌活性[J]. 周会明,张焱珍,柴红梅,张小雷,刘璇,孔令舰,和娇娇.  食用菌学报. 2016(02)
[2]Comparison of effects of obesity and non-alcoholic fatty liver disease on incidence of type 2 diabetes mellitus[J]. Wei-Dong Li,Kun-Fa Fu,Gui-Mei Li,Yan-Shu Lian,Ai-Min Ren,Yun-Jue Chen,Jin-Rong Xia.  World Journal of Gastroenterology. 2015(32)
[3]Is there a relationship between vitamin D with insulin resistance and diabetes mellitus?[J]. Kamal AS Al-Shoumer,Thamer M Al-Essa.  World Journal of Diabetes. 2015(08)
[4]毛竹笋化学成分研究（Ⅰ）[J]. 杜文鹏,徐彭,刘波,徐向红,赖学文,李斌.  中草药. 2015(03)
[5]苓桂术甘汤对心肌缺血再灌注损伤SOD、MDA含量的影响[J]. 康天济,韩宇博,田苗,郭维毅,周彬彬,于丽楠,田明.  中医药信息. 2014(03)
[6]肥胖小鼠急性肺损伤模型的生物学特点[J]. 杨进,陆友金.  临床肺科杂志. 2013(07)
[7]马勃化学成分及药理作用研究进展[J]. 郭晶,江蔚新,范明松.  现代医药卫生. 2013(03)
[8]糖皮质激素的副作用及并发症治疗[J]. 马茂森.  中国城乡企业卫生. 2011(03)
[9]内毒素致急性肺损伤发病机制研究进展[J]. 陆立仁,张良清.  医学综述. 2010(02)
[10]人参川芎嗪注射液对局灶性脑缺血大鼠血清SOD活性、MDA含量及脑组织氨基酸含量的影响[J]. 韩辉,吴丽敏,汪瀚,汪美霞,张娟,涂晋文,韩明向.  成都中医药大学学报. 2009(01)

博士论文
[1]中药猪苓的化学成分及其药理学研究[D]. 赵英永.西北大学 2010
[2]Imipramine对内毒素诱导的小鼠急性肺损伤的抗炎症、抗凋亡作用的研究[D]. 杨进.复旦大学 2010

硕士论文
[1]达原饮对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的治疗作用[D]. 任慧玲.苏州大学 2016
[2]脱皮马勃次生代谢产物和抗肿瘤活性研究[D]. 王雪芹.山东大学 2007
[3]脱皮马勃化学成分及抗肿瘤活性研究[D]. 崔磊.山东大学 2006



本文编号：3586414