人参有效组分对皮肤细胞及B淋巴母细胞的保护作用及枸杞有效组分的初筛

发布时间：2022-01-14 01:17

　　人参及枸杞作为传统中药材,对人体具有调整血压、恢复心脏功能、增强免疫等作用。为了综合利用开发人参及枸杞产品,提高其药用价值,我们以人皮肤成纤维细胞及人B淋巴母细胞作为模型,研究人参及枸杞有效组分对人体健康的影响。本研究的目的为:1)人参有效组分Gx是否对人皮肤细胞具有保护作用;2)人参有效组分Gx是否能够改善免疫细胞功能;3)对初步分离的枸杞各组分进行免疫活性的初筛。结果显示:1)Gx能够缓解由ROS引起的人皮肤成纤维细胞的氧化应激损伤。首先显微观察到,Gx可以改善ROS损伤处理的人皮肤成纤维细胞形态;其次SRB方法测定发现,Gx提高损伤细胞的增殖率;使用免疫荧光方法进一步探索Gx保护细胞形态的机理,发现Gx恢复损伤细胞的骨架相关蛋白Tubulin、跨膜蛋白Integrin和胞外基质蛋白Fibronectin的有序排列,并且Western blotting检测结果显示Gx调控损伤细胞内MMP-1蛋白的含量。2)Gx能够保护由重离子辐照引起的人B淋巴母细胞的损伤。首先观察到损伤的细胞形态得到恢复。流式细胞术方法检测到Gx可以降低损伤细胞的凋亡,并且降低细胞内ROS的水平。此外,ELISA... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文缩写对照表
第一章 前言
    1.1 皮肤损伤保护的研究进展
        1.1.1 皮肤损伤的模型
        1.1.2 皮肤细胞损伤的可能途径
            1.1.2.1 微管蛋白
            1.1.2.2 整联蛋白
            1.1.2.3 纤连蛋白
            1.1.2.4 MMP-1 蛋白
        1.1.3 天然产物在皮肤保护中的应用
    1.2 辐射损伤免疫功能的研究进展
        1.2.1 辐射诱导免疫损伤的可能途径
            1.2.1.1 TNF-α
            1.2.1.2 IL-1α
        1.2.2 人参在免疫损伤保护方面的应用现状
    1.3 枸杞的免疫活性
    1.4 研究目的和意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 试剂与仪器
        2.1.2 主要溶液配置
    2.2 实验方法
        2.2.1 台盼蓝计数
        2.2.2 磺基罗丹明B（SRB）检测细胞毒性
        2.2.3 酶联免疫分析法（ELISA）测定IL-1α、TNFα
        2.2.4 流式细胞术测定细胞凋亡
        2.2.5 流式细胞术测定细胞内ROS
        2.2.6 蛋白免疫印记（Western Blotting）
        2.2.7 免疫荧光
        2.2.8 H_2O_2处理和重离子辐照条件
第三章 结果与分析
    3.1 人参有效组分Gx保护氧化损伤的人皮肤成纤维细胞
        3.1.1 人参有效组分Gx改善损伤细胞的形态
        3.1.2 人参有效组分Gx提高损伤细胞的增殖率
        3.1.3 人参有效组分Gx恢复微管蛋白的表达排列
        3.1.4 人参有效组分Gx恢复整联蛋白的表达排列
        3.1.5 人参有效组分Gx恢复纤连蛋白的表达排列
        3.1.6 人参有效组分Gx恢复MMP-1 蛋白的分泌
    3.2 人参有效组分Gx保护重离子辐照损伤的人B淋巴母细胞
        3.2.1 人参有效组分Gx改善细胞形态
        3.2.2 人参有效组分Gx促进细胞增殖
        3.2.3 人参有效组分Gx抑制细胞凋亡
        3.2.4 人参有效组分Gx抑制ROS的产生
        3.2.5 人参有效组分Gx调控炎症因子的分泌
    3.3 枸杞有效组分保护氧化损伤的人B淋巴母细胞
        3.3.1 枸杞皮渣提取物的免疫活性初筛
        3.3.2 枸杞酒提取物的免疫活性初筛
        3.3.3 地骨皮提取物的免疫活性初筛
        3.3.4 枸杞有效组分对氧化损伤细胞的保护作用
        3.3.5 枸杞有效组份调控炎症因子的分泌
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
在学期间的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]人参皂苷Rb1与红景天苷对抗皮肤光老化作用[J]. 曾秀兰.  北方药学. 2016(12)
[2]重离子(12C6+)治疗恶性黑色素瘤的临床研究现状[J]. 秦进,张超,李莎.  现代肿瘤医学. 2017(01)
[3]枸杞多糖对H2O2诱导人晶状体上皮细胞氧化应激损伤的保护作用[J]. 俞茜,季青山,孙思勤.  眼科新进展. 2016(06)
[4]枸杞多糖对亚健康小鼠免疫功能及抗疲劳作用的影响[J]. 郝文丽,陈志宝,赵蕊,薄乐.  中国生物制品学杂志. 2015(07)
[5]人参皂苷Rg1保护UVB所致皮肤成纤维细胞急性损伤[J]. 刘勇,徐浩翔,惠云,张晓峰,肖学敏,王宝玺.  中国麻风皮肤病杂志. 2015(03)
[6]人参皂苷对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠TNF-α及IL-6影响的研究[J]. 冯晓红,黄琦,张寅晓,陈颉,王东,袁晓.  新中医. 2015(01)
[7]人参皂甙Rg3对Lewis肺癌细胞体外增殖及荷瘤小鼠免疫功能的影响[J]. 张玉梅,王家晓.  实用临床医药杂志. 2014(01)
[8]人参皂苷对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠Th1/Th2相关细胞因子的影响[J]. 黄琦,冯晓红,张寅晓,赵闫丽,苗青,林筱洁.  中医杂志. 2013(24)
[9]人参皂甙Rg3对肺癌荷瘤小鼠免疫功能影响的研究[J]. 王家晓,张玉梅.  广西医学. 2013(01)
[10]人参皂甙Rg3对H22荷瘤小鼠免疫微环境的影响[J]. 赵刚,葛信国.  实用中医内科杂志. 2012(17)

博士论文
[1]照射后造血干细胞促进辐射损伤小鼠造血及免疫功能修复的实验室研究[D]. 赵红霞.中国人民解放军军事医学科学院 2011
[2]人参皂甙Rg3对荷瘤及环磷酰胺化疗小鼠黏膜免疫的调节机制的研究[D]. 吴皓.中国中医科学院 2006

硕士论文
[1]对人体细胞有紫外线防护和损伤修复功能的天然产物的筛选和细胞学研究[D]. 陈晓明.四川农业大学 2003



本文编号：3587514