转基因红花表达oleosin-rhFGF-10药理学活性研究

发布时间：2022-02-08 20:50

　　重组人成纤维细胞生长因子10（Recombinant human fibroblast growth factor10,rh FGF-10）被广泛应用于皮肤损伤修复,同时其也有促进毛发生长的作用。然而,其不稳定性、透皮吸收效果差等缺点限制了其临床应用。因此本研究主要针对其不足之处,利用基因工程技术使rh FGF-10基因与油体蛋白基因oleosin在红花中融合表达oleosin-rh FGF-10蛋白,通过融合表达对rh FGF进行结构修饰使oleosin-rh FGF-10能克服传统rh FGF-10的不足之处,并对其相关药理学活性进行实验探究。转基因红花种植后待长出6-8片新叶,初步进行0.1%Basta抗性筛选,选择具有抗性的株系对其基因组进行PCR鉴定和Southern blot鉴定,待红花种子成熟后从种子中提取总油体蛋白,SDS-PAGE和Western blotting鉴定转基因红花种子中是否能成功表达出目的蛋白oleosin-rh FGF-10蛋白。将oleosin-rh FGF-10进行抗胰蛋白酶实验,经SDS-PAGE电泳和Western blotting来验证目的蛋... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

基因组PCR鉴定结果

图 1.2 基因组 Southern blot 鉴定Fig 1.2 Southern blot detection of genomeM：DL15000Marker；b-c：转基因红花基因组；d：阴性对照组 转基因红花表达目的蛋白鉴定结果基因红花总油体蛋白经 SDS-PAGE 和 Western blot 鉴定后如图 在 45 KDa 左右出现目的条带，与预期目的蛋白大小相同，而阴带，说明该株系的红花种子中能够成功表达出目的蛋白 oleosin-r

图 1.4 Western blot 鉴定 oleosin-rhFGF-10 蛋白Fig. 1.4 oleosin-rhFGF-10 was detected by Western blotlot 鉴定结果，其中 M 蛋白 Mark，a 为阳性对照组，b-c 为转基因，在 45KDa 处出现目的条带。年来，随着人们对 FGF-10 研究的不断深入，发现 FGF-1病方面有着重要的作用。目前，FGF-10 主要被用于治疗各伤，肺表皮细胞损伤，角膜损伤，以及 FGF-10 具有良好有潜在的治疗脱发性疾病的应用价值。因此，寻求一种高 FGF-10 的方法既可以满足人们对 FGF-10 的需求，又可。究将外源重组人成纤维细胞生长因子 10 基因，经过相应的的表达载体，利用农杆菌遗传转化法转化红花，最终在红出重组人成纤维细胞生长因子 10 蛋白，经过一系列的鉴

【参考文献】：
期刊论文
[1]重组人角质细胞生长因子-2对实验秃毛大鼠的毛发再生作用[J]. 王泽,黄鹏煌,赵海洋,李海燕,田海山,李校堃.  中国药理学通报. 2012(12)



本文编号：3615727