欧前胡素抑制HIF-1α信号转导通路和ZFP91促进白介素-1β分泌的研究

发布时间：2022-02-10 01:49

　　背景:炎症与肿瘤之间有着密切的联系,据报道HIF-1α是癌症中一个重要的调节因子,IL-1β是炎症中重要的标志物。白芷是一种可以用来治疗偏头痛、牙痛和癌症的传统的中药。从白芷中分离出来的欧前胡素是香豆素类化合物,拥有多种生物活性,包含抗肿瘤活性,但是我们并不了解欧前胡素遏制HIF-1α介导的肿瘤生长的作用机制。白介素-1β（IL-1β）是炎症、感染和自身免疫疾病中具有重要作用的细胞因子。据报道锌指蛋白91（ZFP91）参与各种生物学过程,但对于ZFP91调节IL-1β的表达机制尚未明确,该研究首次揭示ZFP91可促进pro-IL-1β的产生和IL-1β的分泌。目的:（1）研究目的是揭示欧前胡素对于人结肠癌HCT116细胞中的HIF-1α信号通路的影响,阐明其抗肿瘤作用机理。（2）我们旨在阐明在巨噬细胞中ZFP91促进pro-IL-1β产生和IL-1β分泌的作用机制。方法:（1）主要实验方法有荧光素酶报告基因法、MTT法、蛋白免疫印迹实验法、免疫荧光法、逆转录PCR法、流式细胞法、集落形成实验法、EdU标记免疫荧光法、裸鼠移植瘤实验法、免疫组化实验法和酶联免疫吸附法。（2）主要分析方法有... 

【文章来源】：延边大学吉林省211工程院校

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１?ＨＩＦ－ｌａ蛋白质合成的调节??１??

图２氧气依赖性的ＨＩＦ－１降解的调节??ＨＩＦ－ｌａ蛋白降解受氧气依赖性脯氨酰羟化酶羟化作用调控，其靶向作用于??Ｅ３泛素蛋白连接酶的泛素化（图２）。脯氨酰羟化酶结构域蛋白（ＰＨＤ）?１－３修??饰ＨＩＦ－ｌａ的脯氨酸（Ｐｒｏ）?－４０２和－５６４的羟基化［１Ｑ’１１］。ＨＩＦ－ｌａ与肿瘤抑制蛋白??ＶＨＬ的相互作用需要Ｐｒｏ－４０２和Ｐｒｏ－５６４的羟基化［１２４５］。ＶＨＬ是Ｅ３泛素－蛋白连??接酶的识别组分，其靶向作用于ＨＩＦ－ｌａ使其通过蛋白酶体路径降解。通过乙酰??转移酶ＡＲＤ１使ＨＩＦ－ｌｃｔ上５３２位赖氨酸乙酰化增强了?ＶＨＬ与ＨＩＦ－ｌａ的相互作??用，促进其泛素化和降解［１６］。通过ＦＩＨ－１?（抑制ＨＩＦ－１的因子）的作用，ＨＩＦ－ｌａ??转移结构域功能也被〇２调节［１７－１９］。ＦＩＨ－１通过天冬酰胺（Ａｓｎ）?－８０３的羟化作用??介导其转录激活，其防止ＨＩＦ－ｌａ与共激活因子ｐ３００和ＣＢＰ结合［２（）＿２２］。与ＶＨＬ??或Ｐ３００／ＣＢＰ相互作用的ＨＩＦ－ｌａ结构域的结构分析表明，羟基化是一种明显改??２??

或ＡＰ－１上调从而上调各种信号传导成分（包括ＮＬＲＰ３、ｐｒｏ－ＩＬ－１?Ｐ和ｐｒｏ－ＩＬ－１８?）??的基因。Ｓｉｇｎａｌｌｌ涉及通过ＮＬＲＰ３识别ＰＡＭＰＳ或ＤＡＭＰｓ，从而促进了?ＡＳＣ和??ｐｒｏ－ｃａｓｐａｓｅ－１向复合物的募集（图３）。Ｐｒｏ－ｃａｓｐａｓｅ－１在基质复合体中的聚集启动??了其自身裂解为ｐｌ〇?（ｌＯｋＤａ）和ｐ２０?（２０ｋＤａ）的二个亚基，其通过异二聚化形??成有活性的半胱天冬酶－１酶［４４］。最近，己经表明，除了?ｃａｓｐａｓｅ－丨之外，ｃａｓｐａｓｅ－８??也能够将ｐｒｏ－ＩＬ－ｉｐ蛋白水解加工成其活性形式。这是由Ｍａｅｌｆａｉｔ及其同事首次??报道的，他们证明?Ｔｏｌｌ?ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１?ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｄｏｍａｉｎ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎｄｕｃｉｎｇ?ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ??５??


本文编号：3618028