冬凌甲草素在体外促进成骨分化和抑制破骨形成及其机制研究

发布时间：2022-02-20 14:48

　　目的研究冬凌甲草素对成骨细胞分化和破骨细胞形成的作用及分子机制。方法从SD大鼠股骨和胫骨中分离出骨髓间充质干细胞和骨髓单核细胞,培养于含10%胎牛血清的α-MEM培养基,细胞80%～90%汇合后采用不同浓度的冬凌甲草素（0、1、2、3、4μM）进行分组干预,CCK-8法及活死染色检测不同浓度的冬凌甲草素对间充质干细胞及骨髓单核细胞活力的影响;通过碱性磷酸酶（ALP）染色、茜素红染色、ALP活性的测定以及TRAP染色检测冬凌甲草素对成骨和破骨分化的影响;qRT-PCR检测wnt1、β-catenin、Runx2、ALP、collage-1（col-1）、骨钙蛋白（OCN）、TRAP、c-Fos、NFATc1和CTSK的表达;Western-blot及免疫荧光检测wnt1、β-catenin、ALP、col-1、OCN、Runx2、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、骨保护素（OPG）、GSK-3β、p-GSK-3β的表达。结果 （1）与对照组比较,冬凌甲草素（2μM）具有促进间充质干细胞向成骨细胞分化和提高ALP活性的作用;（2）冬凌甲草素可以促进wnt1、β-catenin、Ru... 

【文章来源】：中华肥胖与代谢病电子杂志. 2020,6(02)

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
资料与方法
    一、一般资料
        1.试剂和抗体
        2.细胞提取
    二、方法
        1.细胞培养
        2.细胞毒性试验
        3.活/死染色
        4.成骨细胞分化
            (1)ALP染色
            (2）茜素红染色
            (3）碱性磷酸酶活力
            (5)TRAP染色
        6.免疫荧光分析
        7.qRT-PCR检测
        8.Western-blot检测
    三、统计学分析
结果
    一、高浓度的ORI抑制了骨髓间充质干细胞的增殖
    二、ORI促进骨髓间充质干细胞的成骨分化
    三、ORI通过Wnt/β-catenin信号通路促进成骨细胞分化并下调RANKL/OPG的比值
    四、ORI直接抑制RANKL诱导的骨髓单核细胞的增殖和破骨细胞分化
    五、ORI间接抑制了RANKL诱导的骨髓单核的破骨细胞分化
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Oridonin induces apoptosis via PI3K/Akt pathway in cervical carcinoma HeLa cell line[J]. Hong-zhen HU~2,Yue-bo YANG~3,Xiang-dong XU~4,Hong-wei SHEN~5,Yi-min SHU~6,Zi REN~7,Xiao-mao LI~3,Hui-ming SHEN~3,Hai-tao ZENG~(3,8)~2 Department of Gynecology and Obstetrics,Yijishan Hospital,Wannan Medical College,Wuhu 241001,China;~3 Department of Gynecologyand Obstetrics,the Third Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China;~4 Department of Surgery,the First AffiliatedHospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China;~2 Department of Gynecology and Obstetrics,the First Affiliated Hospital,SunYat-sen University,Guangzhou 510080.China;~6 Department of Obstetrics and Gynecology,IVF Program,Stanford University MedicalCenter,Palo Alto,CA 94304,USA;~7 Department of Gynecology and Obstetrics,Guangdong Provincial People’s Hospital,Guangzhou510080.China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2007(11)



本文编号：3635271