补肾壮筋汤抑制炎症介导骨关节炎软骨基质降解的作用机制研究

发布时间：2022-02-20 17:58

　　目的探讨补肾壮筋汤抑制炎症介导骨关节炎软骨基质降解的作用机制研究方法1.选取2月龄SPF级雄性SD大鼠共45只,采用随机数字法将所选取的大鼠均分为三组,即空白组（15只）和造模组（30只）,空白组行假手术（生理盐水灌胃）,造模组采用改良Hulth法建立动物模型,随机数字表法分为模型组（15只,生理盐水灌胃）和补肾壮筋汤组（15只,补肾壮筋汤灌胃）,灌胃1次/日,连续灌胃12周。HE染色观察关节软骨组织形态、结构的变化,通过甲苯胺蓝染色法检测关节软骨中软骨细胞数量以及蛋白多糖等相应改变,采用ELISA法检测关节滑膜组织中IL-1β、TNF-α、MMP-13的表达量。2.机械-II型胶原酶消化法,消化SPF级四周龄SD大鼠,分离出软骨细胞,LPS诱导大鼠软骨细胞体建立炎症细胞模型。体外培养的软骨细胞,分为空白组、模型组（10ng/ml LPS）、抑制剂组（10 ng/ml U0126干预30 min后加入10 ng/ml LPS）、氨基葡萄糖组（10 ng/ml LPS+1.35μg/ml氨基葡萄糖）、补肾壮筋汤组（10 ng/mlLPS+200μg/ml补肾壮筋汤）,干预8 h。II型胶... 

【文章来源】：福建中医药大学福建省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
实验一 补肾壮筋汤对骨关节炎软骨基质降解的影响
    研宄目的
    1 实验材料
        1.1 实验药物
        1.2 实验试剂、耗材
        1.3 实验仪器
    2 实验动物
    3 实验方法与步骤
        3.1 实验动物造模、分组与给药
        3.2 实验动物取材
        3.3 指标检测
        3.4 数据统计
    4 实验结果
        4.1 HE染色观察膝关节软骨组织形态
        4.2 甲苯胺蓝染色观察关节软骨蛋白多糖变化
        4.3 ELISA检测滑膜组织IL-1 β、TNF-α、MMP-13表达
    5. 讨论
        5.1 改良Hulth法建立骨关节炎动物模型
        5.2 软骨退变与软骨基质稳态失衡的关系
        5.3 滑膜炎症与软骨基质稳态失衡的关系
        5.4 补肾壮筋汤调控软骨基质稳态失衡抑制软骨退变的作用机制
    6. 小结
实验二 补肾壮筋汤对软骨基质降解蛋白MMPs与ADAMTS表达的影响
    研宄目的
    1 实验材料
        1.1 实验药物
        1.2 实验动物
    2 实验方法与步骤
        2.1 实验试剂的配制
        2.2 大鼠软骨细胞的分离培养与鉴定
        2.3 补肾壮筋汤干预炎症性软骨细胞模型浓度的确立
        2.4 实验分组及干预方法的确立
        2.5 补肾壮筋汤对炎症性软骨细胞模型影响的检测
        2.6 数据统计
    3 实验结果
        3.1 软骨细胞鉴定
        3.2 补肾壮筋汤干预LPS诱导炎症性软骨细胞模型浓度的确定
        3.3 补肾壮筋汤干预后各组软骨细胞相关蛋白表达
        3.4 补肾壮筋汤干预后各组软骨细胞相关基因表达
    4 讨论
        4.1 软骨细胞的分离培养与鉴定
        4.2 LPS介导软骨细胞表达软骨基质降解蛋白的作用途径
        4.3 炎症因子介导软骨基质降解的作用途径
        4.4 基于骨关节炎中医病理特点的补肾壮筋汤组方依据
        4.5 补肾壮筋汤调节炎症介导软骨基质降解蛋白表达抑制骨关节炎筋骨失养的作用机制
    5. 小结
结论
不足与展望
参考文献
致谢
文献综述
    参考文献
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3635550