基于肝器官芯片的中草药成分肝毒性评价

发布时间：2022-05-08 20:46

　　近年来,我国对中草药的重视程度日益加深,中药以及相关制剂的研发引起大家关注。普遍认为中草药的安全性要优于西药,但同时也不能忽视因中草药成分混杂,活性物质、药物机制以及安全性能探索困难,进而导致对中草药相关毒性的研究以及研究受试者较少。同时,很多中草药潜在肝损伤是导致其难以通过临床前试验、临床三期检验的一大重要原因,从而耗费大量的时间和科研精力,因此在新药研发的早期评价中草药的肝毒性是十分必要的。目前,国内外关于中草药肝毒性的文献报道主要是基于孔板模型以及动物模型;其中,孔板模型结构单一、与体内真实条件相差较大,动物模型周期较长、花费高,且个体差异性较大,因此这两种模型都存在一定局限性。因此,在本实验中通过微流控芯片平台,在平台内按照正常肝血窦结构组成,对应培养U937细胞（人组织淋巴瘤细胞系）、HUVEC细胞（人脐静脉内皮细胞系）、LX-2细胞（人肝星状细胞系）以及三维培养的HepG-2细胞（人肝癌细胞系）来构建以模仿肝血窦组织结构为目的的器官芯片模型,实现中草药成分体外肝毒性的评价。实验中所用的器官芯片模型主要由上下两层亚克力板、三层材质为PDMS（聚二甲基硅氧烷）的芯片层以及两片直... 

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 绪论
    1.1 微流控芯片技术介绍
        1.1.1 微流控芯片的概念及发展
        1.1.2 微流控芯片的制作材料与加工工艺
        1.1.3 微流控芯片在类器官方向的应用
    1.2 细胞外基质与3D细胞培养技术
    1.3 中药肝毒性
        1.3.1 肝脏的生理结构与功能
        1.3.2 药物肝毒性的产生
        1.3.3 中草药与药物性肝损伤
    1.4 肝器官芯片药物筛选模型
    1.5 本论文研究目的和内容
2 实验部分
    2.1 实验中所用耗材、仪器
        2.1.1 微流控芯片相关制作耗材及仪器
        2.1.2 常规细胞培养的耗材及仪器
        2.1.3 芯片运行与检测的耗材及仪器
    2.2 微流控芯片的设计及制作
        2.2.1 微流控芯片设计
        2.2.2 微流控芯片制作
    2.3 相关细胞培养及表征
        2.3.1 试剂配制
        2.3.2 细胞培养方法
    2.4 肝微流控器官芯片的搭建及功能验证
        2.4.1 试剂配制
        2.4.2 膜上细胞的接种及细胞分化
        2.4.3 芯片搭建
    2.5 肝微流控器官芯片模型对中药成分肝毒性的评价
        2.5.1 试剂配制
        2.5.2 96孔板中药物浓度对细胞活力的影响
        2.5.3 芯片运行
        2.5.4 HepG-2 细胞的表征及损伤评价
        2.5.5 芯片上药物IC50 值的测定
3 结果与讨论
    3.1 肝微流控器官芯片的制作与运行
        3.1.1 芯片设计
        3.1.2 芯片上HepG-2 细胞的表征
    3.2 中药成分肝毒性的评价
        3.2.1 肝毒性评价
        3.2.2 对氧化苦参碱肝毒性的评价
        3.2.3 对吴茱萸碱肝毒性的评价
        3.2.4 对油酸肝毒性的评价
        3.2.5 对氯化两面针碱肝毒性的评价
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]微流控芯片的研究及产业化[J]. 林炳承.  分析化学. 2016(04)
[2]世界卫生组织促进传统医药安全性相关政策回顾[J]. 苏芮,陈岩,孙鹏,范吉平.  中国中医药信息杂志. 2015(08)
[3]石英微机械陀螺敏感芯片的抗振动分析与改进[J]. 李文蕴,林日乐,满欣.  压电与声光. 2015(04)



本文编号：3652347